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菌總計數(shù)容易會出現(xiàn)哪些問題呢？
1、在營養(yǎng)成分單一、保存條件苛刻的食品（水、水產(chǎn)品等）中，微生物復(fù)蘇、生長緩慢，培養(yǎng)48h計數(shù)時容易遺漏
2、一些食品處理后，仍存在類似菌落的顆粒狀雜質(zhì)，很難判斷是菌落還是雜質(zhì)
3、一些食品容易污染變形桿菌等運動性較強(qiáng)的蔓延菌，培養(yǎng)后無法計數(shù)。
關(guān)鍵是，能力驗證是考察實驗室檢驗?zāi)芰Φ耐獠抠|(zhì)量活動，組織方提供試驗樣本，在菌落總數(shù)項目上，一般會考慮增加上述難度。
防止蔓延的方法有哪些？
No.1 增加覆蓋一層瓊脂培養(yǎng)基
蔓延菌大多為需氧菌，覆蓋一層瓊脂的目的是隔絕空氣，降低需氧菌生長速度。
No.2 添加TTC
TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑），不僅可以使菌落產(chǎn)生紅色，便于辨識，也可部分地抑制大片蔓延菌落的形成。
No.3 陶瓦蓋代替平皿蓋
用陶瓦蓋代替平皿蓋，可有效去除培養(yǎng)基表面水分，阻止細(xì)菌移動，有效抑制蔓延。傾注培養(yǎng)基凝固后，用陶瓦蓋（干熱滅菌）代替平皿蓋，正置放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
❓以上三種方法哪種最好呢？
👉真相大揭秘
方法：我們分別采用PCA直接傾注法、覆蓋一層培養(yǎng)基法、TTC法、用陶瓦蓋代替平皿蓋法對同一樣本進(jìn)行菌落總數(shù)計數(shù)。其中，TTC培養(yǎng)基冷卻至56℃左右加0.5%的TTC溶液（1mL/100mL）。陶瓦蓋法平皿正置放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
從6小時開始觀察菌落生長情況并計數(shù)，以后每隔12小時觀察1次。
結(jié) 果
PCA直接傾注法菌落生長相對較快，培養(yǎng)24h，菌落數(shù)已達(dá)到峰值，其他方法平板培養(yǎng)36h或48h后，達(dá)到峰值。
添加TTC的平板菌落生長相對比較緩慢，且培養(yǎng)到最后，菌落依然比較小，但總體檢出數(shù)值較高。其原因是TTC平板能將部分細(xì)小菌落，或生長于瓊脂內(nèi)部、顏色與平板顏色相近，肉眼不易觀察的菌落計出。
有圖有真相
單因素方差分析，P＞0.05（95%置信度），四種試驗計數(shù)結(jié)果并無顯著差異。按照微生物能力驗證的數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析原則，當(dāng)Z≤2時方為滿意結(jié)果。因此雖然方法之間數(shù)據(jù)差異不大，但有必要提高檢驗技術(shù)，將結(jié)果控制在最準(zhǔn)確的數(shù)值范圍之內(nèi)，才能保證在能力驗證評價中取得滿意結(jié)果。
