現(xiàn)在我們就一起來看一下超聲波提取罐在使用時(shí)應(yīng)注意的關(guān)鍵事項(xiàng):
1、切記空載(一定要將超聲變幅桿插入樣品后才能開機(jī))。
2、變幅桿(超聲探頭)入水深度:1.5Cm左右,液面高度需要有30mm以上,探頭要居中,不要貼壁。超聲波是垂直縱波,插入太深不容易形成對流,影響破碎效率。
3、超聲參數(shù)設(shè)置:設(shè)置儀器工作參數(shù)(具體設(shè)置見說明書),對于對溫度要求比較敏感的樣品(比如細(xì)菌)一般外部采用冰浴,實(shí)際溫度肯定是低于25度,蛋白核酸肯定不會變性。
1)時(shí)間:超聲時(shí)間每次不要超過5秒,間隙時(shí)間應(yīng)大于或等于超聲時(shí)間,以便于熱量散發(fā)。時(shí)間設(shè)定應(yīng)以超聲時(shí)間短,超聲次數(shù)多為原則,可延長超聲振子以及探頭的壽命。
2)超聲功率:不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,功率應(yīng)在200w以內(nèi),選用2mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿選擇開關(guān)打到相應(yīng)擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;(2mm的小探頭功率不要超過350W)。
3)容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對流,提高破碎效率。例如;20ml的處理量需要用20ml的燒杯。
如100ml大腸桿菌樣品設(shè)置參數(shù):超聲5秒/間隙5秒次數(shù)70次(總時(shí)間為10分鐘),功率300W(僅供參考)500ml左右的量,功率開到500W-800W左右。
4、若樣品放在1.5ml的EP管里請一定要將EP管固定好,以防冰浴融化后液面下降導(dǎo)致空載。
5、日常保養(yǎng):用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲!