一、測定溶液中物質(zhì)的含量
可見或紫外分光光度法都可用于測定溶液中物質(zhì)的含量。測定標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度已知的溶液)和未知液(濃度待測定的溶液)的吸光度,進(jìn)行比較,由于所用吸收池的厚度是一樣的。也可以先測出不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,在選定的濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該是一條直線,然后測定出未知液的吸光度,即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其相對應(yīng)的濃度。
含量測定時所用波長通常要選擇被測物質(zhì)的最大吸收波長,這樣做有兩個好處:⑴靈敏度大,物質(zhì)在含量上的稍許變化將引起較大的吸光度差異;⑵可以避免其它物質(zhì)的干擾。
二、用紫外光譜鑒定化合物
使用分光光度計(jì)可以繪制吸收光譜曲線。方法是用各種波長不同的單色光分別通過某一濃度的溶液,測定此溶液對每一種單色光的吸光度,然后以波長為橫座標(biāo),以吸光度為縱座標(biāo)繪制吸光度──波長曲線,此曲線即吸收光譜曲線。各種物質(zhì)有它自己一定的吸收光譜曲線,因此用吸收光譜曲線圖可以進(jìn)行物質(zhì)種類的鑒定。當(dāng)一種未知物質(zhì)的吸收光譜曲線和某一已知物質(zhì)的吸收光譜曲線開關(guān)一樣時,則很可能它們是同一物質(zhì)。一定物質(zhì)在不同濃度時,其吸收光譜曲線中,峰值的大小不同,但形狀相似,即吸收高峰和低峰的波長是一定不變的。紫外線吸收是由不飽和的結(jié)構(gòu)造成的,含有雙鍵的化合物表現(xiàn)出吸收峰。紫外吸收光譜比較簡單,同一種物質(zhì)的紫外吸收光譜應(yīng)完全一致,但具有相同吸收光譜的化合物其結(jié)構(gòu)不一定相同。除了特殊情況外,單獨(dú)依靠紫外吸收光譜決定一個未知物結(jié)構(gòu),必須與其它方法配合。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)的定量分析和純度分析。