時(shí)間分辨熒光分析法（Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA）是近十年發(fā)展起來(lái)的一測(cè)微量分析方法，是目前最靈敏的微量分析技術(shù),其靈敏度高達(dá)10-19，較放射免疫分析（RIA）高出3個(gè)數(shù)量級(jí)。
　　時(shí)間分辨熒光分析法（TRFIA）實(shí)際上是在熒光分析（FIA）的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，它是一種特殊的熒光分析。熒光分析的利用了熒光的波長(zhǎng)與其激發(fā)波長(zhǎng)的巨大差異克服了普通紫外－可見分光分析法中雜色光的影響，同時(shí)，熒光分析與普通分光不同，光電接受器與激發(fā)光不在同一直線上，激發(fā)光不能直接到達(dá)光電接受器，從而大幅度的提高了光學(xué)分析的靈敏度。但是，當(dāng)進(jìn)行超微量分析的時(shí)候，激發(fā)光的雜散光的影響就顯得嚴(yán)重了。因此，解決激發(fā)光的雜散光的影響成了提高靈敏度的瓶頸。
　　解決雜散光影響的最好方法當(dāng)然是測(cè)量時(shí)沒有激發(fā)光的存在。但普通的熒光標(biāo)志物熒光壽命非常短，激發(fā)光消失，熒光也消失。不過(guò)有非常少的稀土金屬（Eu、Tb、Sm、Dy)的熒光壽命較長(zhǎng)，可達(dá)1－2ms，能夠滿足測(cè)量要求，因此而產(chǎn)生了時(shí)間分辨熒光分析法，即使用長(zhǎng)效熒光標(biāo)記物，在關(guān)閉激發(fā)光后再測(cè)定熒光強(qiáng)度的分析方法。
　　平時(shí)常用的稀土金屬主要是Eu(銪）和Tb(鋱），Eu熒光壽命1ms,在水中不穩(wěn)定，但加入增強(qiáng)劑后可以克服；Tb熒光壽命1.6ms，水中穩(wěn)定，但其熒光波長(zhǎng)短、散射嚴(yán)重、能量大易使組分分解，因此從測(cè)量方法學(xué)上看Tb很好，但不適合用于生物分析，故Eu最為常用。
　　由于常用Eu作為熒光標(biāo)記，因此增強(qiáng)劑就成了試劑中的重要組成。增強(qiáng)劑原理：利用含絡(luò)合劑、表面活性劑的溶液的親水和親脂性同時(shí)存在，使Eu在水中處于穩(wěn)定狀態(tài)�，F(xiàn)在有些試劑，在絡(luò)合Eu在抗體上時(shí)已考慮了增強(qiáng)問(wèn)題，而使用了具有增強(qiáng)作用的新絡(luò)合劑，因而有的試劑沒有單獨(dú)的增強(qiáng)劑。
　　隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，對(duì)微量、超微量的測(cè)定會(huì)越來(lái)越多，同時(shí)RIA的污染問(wèn)題會(huì)越來(lái)越被重視，因此，時(shí)間分辨熒光分析法（TRFIA）具有越來(lái)越大的應(yīng)用空間。