微生物檢驗(yàn)
一、微生物實(shí)驗(yàn)室概況
食品微生物實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)各類微生物項(xiàng)目的檢測(cè),主要檢測(cè)項(xiàng)目有菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業(yè)無(wú)菌、致病菌(如沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等)。
微生物實(shí)驗(yàn)室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無(wú)菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實(shí)驗(yàn)室六部分組成。這些房間的共同特點(diǎn)是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬,儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡(jiǎn)潔,便于打掃衛(wèi)生.
二、微生物實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū)
(一)準(zhǔn)備室
準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
(二)洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染,有時(shí)還會(huì)存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,最好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等.
(三)滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施.
(四)無(wú)菌室
無(wú)菌室一般為4 — 5 平方米、高 2。5 米的獨(dú)立小房間(與外間隔離),專辟于微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。
無(wú)菌室也稱接種室,是系統(tǒng)接種、純化菌種等無(wú)菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作,這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對(duì)接種工作干擾很大。
1. 無(wú)菌室的設(shè)置
無(wú)菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn):
(1)無(wú)菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無(wú)菌室,外間是緩沖室.房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌.最小內(nèi)間面積2×2。5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,以減少空氣的波動(dòng),門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上;外間的門最好也用拉門,要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上.
(3)在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應(yīng)開一個(gè)小窗,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇.
(4)無(wú)菌室容積小而嚴(yán)密,使用一段時(shí)間后,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置),最好為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī).
2. 無(wú)菌室內(nèi)設(shè)備和用具
(1)無(wú)菌室內(nèi)的工作臺(tái),不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺(tái)面水平.
(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
(3)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等.
(4)內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。
3.無(wú)菌室的滅菌消毒
(1)薰蒸:這是無(wú)菌室徹底滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間,污染比較嚴(yán)重時(shí),應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌.可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
(2)噴霧:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng),并有殺菌作用.可用5%石炭酸噴霧。
(3)紫外線照射:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行.紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60min。
4.無(wú)菌室工作規(guī)程
(1)無(wú)菌室滅菌.每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。
(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘.
(3)將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位,用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進(jìn)內(nèi)室工作!
(4)接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí),動(dòng)作要輕緩,盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。
(5)工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴(kuò)大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí),應(yīng)用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
(6)工作結(jié)束,立即將臺(tái)面收拾干凈,將不應(yīng)在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后,對(duì)無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min.
(五)恒溫培養(yǎng)室
1. 培養(yǎng)室的設(shè)置
(1)培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內(nèi)室面積在3。2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1。8=6m2左右,高以2。5m左右為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口。
(3)為滿足微生物對(duì)溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機(jī)。
(4)內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈,以供滅菌用。
2. 培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具
(1)內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)(搖床)。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種.
(2)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等.
3. 培養(yǎng)室的滅菌、消毒
同無(wú)菌室的滅菌、消毒措施。
小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行!
(六)普通實(shí)驗(yàn)室
進(jìn)行微生物的觀察、計(jì)數(shù)和生理生化測(cè)定工作的場(chǎng)所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點(diǎn)不同而有很大的差異.一般均配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)要求平整、光滑,實(shí)驗(yàn)柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。
(七)更衣室
是進(jìn)入無(wú)菌室之前工作人員進(jìn)行更衣、洗手的地方.室內(nèi)設(shè)置無(wú)菌室及緩沖室的電源控制開關(guān)和放置無(wú)菌操作時(shí)穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。
(八)辦公室
登記待檢驗(yàn)樣品;出檢測(cè)報(bào)告;處理有關(guān)文件資料;放松休息等
三、微生物實(shí)驗(yàn)室的常用儀器及功能
理化試驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案
一、主要檢測(cè)項(xiàng)目
蛋白、水分、灰分、鈣、磷、鹽、微生物、礦物質(zhì)、藥殘等。在功能上又涉及到排水、通風(fēng)、排風(fēng)、供電、空調(diào)、消防、廢氣、廢液處理等復(fù)雜的工藝技術(shù),同時(shí)還要考慮到環(huán)保、安全、可持續(xù)性發(fā)展等諸多因素,因此是一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)工程。
二、設(shè)計(jì)要求
1.環(huán)境要求
1.通風(fēng)
實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng),人員多和實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生一些有害氣體,造成空氣污濁,對(duì)人體不利。為了防止實(shí)驗(yàn)室工作人員吸入或咽入一些有有毒的、可致病的或毒性不明的化學(xué)物質(zhì)和有機(jī)氣體,實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)有良好的通風(fēng),必要時(shí)應(yīng)設(shè)空調(diào).通風(fēng)設(shè)備有:通風(fēng)柜、通風(fēng)罩或局部通風(fēng)裝置.除了樓主提到的外,需要注意有機(jī)溶劑 前處理和使用電爐進(jìn)行前處理的通風(fēng)柜應(yīng)分別布置在不同的實(shí)驗(yàn)室,局部排風(fēng)裝置和排風(fēng)罩必須具有足夠的功率,否則實(shí)際工作中難以滿足使用要求.
1.2濕度和溫度
實(shí)驗(yàn)室要求適宜的溫度和濕度。室內(nèi)的小氣候,包括氣溫、濕度和氣流速度等,對(duì)在實(shí)驗(yàn)室工作的人員和儀器設(shè)備有影響。夏季的適宜溫度應(yīng)是18-28℃,冬季 為16—20℃,濕度最好在30%(冬季)—70%(夏季)之間。除了特殊實(shí)驗(yàn)室外,溫濕度對(duì)大多數(shù)理化實(shí)驗(yàn)影響不大,但是天平室和精密儀器室應(yīng)根據(jù)需要 對(duì)溫濕度進(jìn)行控制 .
1.3潔凈度
經(jīng)常保持實(shí)驗(yàn)室的清潔是非常重要的。室外大氣中的塵埃,借通風(fēng)換氣過程會(huì)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)內(nèi)含塵量過高,空氣不凈,不但影響檢測(cè)結(jié)果,而且,其微粒落在儀 器設(shè)備的元件表面上,可能構(gòu)成障礙,甚至造成短路或其他潛在危險(xiǎn)。潔凈實(shí)驗(yàn)室是要花銀子的,建議不是特殊需要可不進(jìn)行潔凈實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì),若有需要可以對(duì)大型 精密儀器室、特殊實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)計(jì),一般達(dá)到萬(wàn)級(jí)凈化要求即可。若有多個(gè)潔凈實(shí)驗(yàn)室,送排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)各自獨(dú)立設(shè)計(jì),獨(dú)立使用。
2.設(shè)施要求
2.1供水與排水、排污
實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)有供排水裝置,排水裝置最好用聚氯乙烯管,接口用焊槍焊接;瘜W(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)臺(tái)有可能都應(yīng)安裝水管、水龍頭、水槽、緊急沖淋器、洗眼器等,一般實(shí)驗(yàn) 室的廢水無(wú)須處理就可排入城市下水網(wǎng)道,而實(shí)驗(yàn)室的廢水必須凈化處理后才能排入下水網(wǎng)道。現(xiàn)代化的實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)建設(shè)配套的污水處理站,一般實(shí)驗(yàn)室的廢水 無(wú)須處理就可排入污水處理站進(jìn)行處理,對(duì)高濃度的酸堿廢水應(yīng)先中和再排入污水處理站,對(duì)此類廢水的排放建議采用耐酸減的排水管道,從實(shí)驗(yàn)室直接排放到處理 站,對(duì)大量使用有機(jī)溶劑的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝耐有機(jī)溶劑的排水管道,例如可采用鑄鐵管接入污水處理站,也就是說,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)不同功能,采用不同材料的排水管 道,分別設(shè)計(jì)相互之間不交叉,分別排放到污水處理站。實(shí)驗(yàn)室的廢水必須凈化處理后才能排入下水網(wǎng)道。實(shí)驗(yàn)室的供水有自來水和實(shí)驗(yàn)用純水,除了自來水, 建議安裝純水處理裝置,保障實(shí)驗(yàn)室用水,并且再相關(guān)實(shí)驗(yàn)室純水終端加裝超純水處理裝置,滿足精密儀器使用要求.
2.2供電
電力是實(shí)驗(yàn)室重要?jiǎng)恿。為保障?shí)驗(yàn)室的正常工作,電源的質(zhì)量、安全可靠性及連續(xù)性必需保證。一般用電和實(shí)驗(yàn)用電必須分開;對(duì)一些精密、貴重儀器設(shè)備,要求 提供穩(wěn)壓、恒流、穩(wěn)頻、抗干擾的電源;必要時(shí)須建立不中斷供電系統(tǒng),還要配備專用電源,如不間斷電源(UPS)等。
2.3供氣與排氣
實(shí)驗(yàn)室使用的壓縮氣體鋼瓶,應(yīng)保持最少的數(shù)量,必須牢牢固定,或用金屬鏈栓牢,絕不能靠近火源,直接日曬,高溫房間等溫度可能升高的地方使用。實(shí)驗(yàn)室的廢氣的處理,如量少,可直接排出室外;但排出管必須高出附近房頂3m左右,對(duì)毒性較大或數(shù)量多的廢氣,可參考工業(yè)廢氣處理方法如用吸附,吸收,氧化,分解等 方法來處理.如果理化實(shí)驗(yàn)室不是在最高一層,廢氣的排放必須采用專用管道從樓頂排放。
三、功能與布局
1.特性
根據(jù)理化檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室工作的特性,應(yīng)創(chuàng)造一個(gè)安全、舒適、美化的實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境,辦公區(qū)域與實(shí)驗(yàn)區(qū)域分開,即形成非受控區(qū)域和受控區(qū)域.理化實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配置樣品前處理室、理化分析室(精密儀器室)、天平室、留樣室、辦公室等。
2.布局規(guī)劃
2.1樣品前處理室
實(shí)驗(yàn)室必須有排風(fēng)設(shè)施,獨(dú)立排氣柜,有機(jī)、無(wú)機(jī)前處理室分開,占用面積不少于30m2/間,墻、地板、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、排氣柜等要絕緣、耐熱、耐酸堿和耐有機(jī)溶劑腐蝕;地面應(yīng)有地漏,防倒流。設(shè)置中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)供實(shí)驗(yàn)臺(tái)用的上下水裝置、電源插頭。
2.2理化分析室
(精密儀器室)色譜室:氣相色譜室,氣質(zhì)聯(lián)用室:可聯(lián)用,以單臺(tái)計(jì)算面積不小于10m2為宜.液相色譜室,液質(zhì)聯(lián)用儀室:可聯(lián)用,面積不小于20m2/間(以單臺(tái)計(jì)算)標(biāo)準(zhǔn)化的至少需要3臺(tái)液相色譜儀,兩臺(tái)共用一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,至少2個(gè)房間離子色譜室可以與液相室聯(lián)用,單獨(dú)實(shí)驗(yàn)室房間建議15m2以上。光譜室:建議配置獨(dú)立三相380V電源。原子吸收室:獨(dú)立排風(fēng)(外排)通道,上下水。原子熒光室:獨(dú)立排風(fēng)(外排)通道.原子吸收與原子熒光室可聯(lián)用,條件好的可配備ICP-MS室,單獨(dú)實(shí)驗(yàn)室房面積建議15m2以上。
2.3天平室
天平室應(yīng)有雙層玻璃和窗簾,有恒溫恒濕系統(tǒng),天平臺(tái)必須防震,天平臺(tái)放置必須離開墻壁1cm,可購(gòu)置防震型天平臺(tái)或磚砌大理石臺(tái)面天平臺(tái).建議8m2以上。
2.4小型儀器室
小型儀器室應(yīng)有足夠的電源插座,最好安裝穩(wěn)壓裝置,配備水池.可存放紫外可見分光光度計(jì),顯微鏡,酸度計(jì)等小型儀器。建議15m2以上.
2.5 留樣室
存放樣品柜、工作臺(tái)。房間面積建議20m2以上.獨(dú)立的樣品存儲(chǔ)室,存儲(chǔ)柜功能區(qū)間應(yīng)劃分清楚,標(biāo)明未檢樣品、在檢樣品和已檢樣品。樣品室必須干燥、通風(fēng)、防塵、防鼠。
2.6 辦公室
作為實(shí)驗(yàn)室管理及數(shù)據(jù)報(bào)告填寫等工作要求,具體根據(jù)實(shí)驗(yàn)室人員設(shè)定。建議20m2以上.獨(dú)立的樣品存儲(chǔ)室,存儲(chǔ)柜功能區(qū)間應(yīng)劃分清楚,標(biāo)明未檢樣品、在檢樣品和已檢樣品。樣品室必須干燥、通風(fēng)、防塵、防鼠。
四、常用設(shè)備
水分、含鹽量、含糖量、蛋白含量、脂肪含量、纖維含量、維生素含量、酸度等。對(duì)于這些項(xiàng)目的檢測(cè),如果經(jīng)費(fèi)有限,都可以采用化學(xué)法分析,只需配置最簡(jiǎn)單的烘箱、水浴、電爐、攪拌器、粉碎機(jī)、pH計(jì)等設(shè)備即可。紫外/可見分光光度計(jì)、近紅外分析儀、自動(dòng)滴定儀等。檢測(cè)維生素A、E等有時(shí)還需配置熒光光度計(jì)。檢測(cè)營(yíng)養(yǎng)元素,如鈣、鋅、鐵等,可購(gòu)置原子吸收儀-火焰檢測(cè)器。
a)微生物
建微生物實(shí)驗(yàn)室要按照生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行布局。必要的設(shè)備有潔凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、電爐等,其它設(shè)備則根據(jù)具體檢測(cè)項(xiàng)目配置。經(jīng)費(fèi)少可以買國(guó)產(chǎn)的,經(jīng)費(fèi)多可以考慮買進(jìn)口的,兩者的價(jià)錢相差很多.
b)添加劑和有害元素
有一部分項(xiàng)目可以用化學(xué)法,如亞硝酸鹽、二氧化硫、重金屬含量、總砷等。但要想滿足現(xiàn)在國(guó)標(biāo)的食品衛(wèi)生要求,應(yīng)該購(gòu)置氣相色譜-氫火焰檢測(cè)器、液相色譜—紫外/可見光檢測(cè)器,這樣一般的防腐劑(苯甲酸、山梨酸等)、甜味劑(甜蜜素、糖精鈉等)、色素(檸檬黃、胭脂紅等)都可以檢測(cè)了。購(gòu)置原子吸收儀—石墨爐檢測(cè)器,可以分別檢測(cè)鉛、鉻、鎘、銅、鎳等有害元素,還需要一臺(tái)原子熒光儀,用來檢測(cè)砷和汞等。
c)殘留農(nóng)藥
檢測(cè)殘留農(nóng)藥氣相色譜是不能少的。檢測(cè)有機(jī)氯農(nóng)藥,需配電子俘獲ECD檢測(cè)器;檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥,需配火焰光度FPD檢測(cè)器或氮磷NPD檢測(cè)器,F(xiàn)在農(nóng)殘檢測(cè)的項(xiàng)目越來越多,為提高通用性,建議配置毛細(xì)管柱分流/不分流進(jìn)樣口,安裝毛細(xì)管色譜柱。與傳統(tǒng)填充柱色譜柱相比,毛細(xì)管柱分析項(xiàng)目多,分離度好,可以減少頻繁的更換色譜柱,提高分析效率。出口食品加工企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品在出口時(shí)需檢測(cè)的農(nóng)殘項(xiàng)目越來越多,為了把好生產(chǎn)原料和產(chǎn)品質(zhì)量關(guān),可以配置氣相色譜—質(zhì)譜儀。一般只需配置電子轟擊EI源,如果有必要可再配一個(gè)負(fù)化學(xué)NCI源.是選擇四極質(zhì)譜還是離子阱質(zhì)譜,個(gè)人認(rèn)為都可以,兩種儀器各有優(yōu)缺點(diǎn).還是要看具體工作。
d)殘留獸藥
若進(jìn)行殘留獸藥的檢測(cè),項(xiàng)目不多且批次多,可以考慮配置酶聯(lián)免疫儀,該儀器一次投入不大,操作簡(jiǎn)便,檢測(cè)靈敏度高。采用ELISA也有一些缺點(diǎn),一是試劑盒為長(zhǎng)期的消耗品,若檢測(cè)的批次少成本會(huì)較高,二是特異性不好,可能會(huì)有假陽(yáng)性,三是如果在相對(duì)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)檢測(cè)項(xiàng)目較多,成本甚至比儀器分析還高。對(duì)于有一定規(guī)模的出口食品企業(yè),為適應(yīng)當(dāng)前歐盟、美國(guó)、日本等發(fā)達(dá)國(guó)家檢測(cè)限量要求,最好配置一臺(tái)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀。第一臺(tái)儀器建議配置三重四極質(zhì)譜儀,靈敏度高、重現(xiàn)性好。儀器不一定要追求高配置,夠用就行,但靈敏度、穩(wěn)定性、抗污染等性能要好。
文章(文字)來源:月旭柯技。
一、微生物實(shí)驗(yàn)室概況
食品微生物實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)各類微生物項(xiàng)目的檢測(cè),主要檢測(cè)項(xiàng)目有菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業(yè)無(wú)菌、致病菌(如沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等)。
微生物實(shí)驗(yàn)室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無(wú)菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實(shí)驗(yàn)室六部分組成。這些房間的共同特點(diǎn)是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬,儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡(jiǎn)潔,便于打掃衛(wèi)生.
二、微生物實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū)
(一)準(zhǔn)備室
準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
(二)洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染,有時(shí)還會(huì)存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,最好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等.
(三)滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施.
(四)無(wú)菌室
無(wú)菌室一般為4 — 5 平方米、高 2。5 米的獨(dú)立小房間(與外間隔離),專辟于微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。
無(wú)菌室也稱接種室,是系統(tǒng)接種、純化菌種等無(wú)菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作,這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對(duì)接種工作干擾很大。
1. 無(wú)菌室的設(shè)置
無(wú)菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn):
(1)無(wú)菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無(wú)菌室,外間是緩沖室.房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌.最小內(nèi)間面積2×2。5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,以減少空氣的波動(dòng),門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上;外間的門最好也用拉門,要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上.
(3)在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應(yīng)開一個(gè)小窗,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇.
(4)無(wú)菌室容積小而嚴(yán)密,使用一段時(shí)間后,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置),最好為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī).
2. 無(wú)菌室內(nèi)設(shè)備和用具
(1)無(wú)菌室內(nèi)的工作臺(tái),不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺(tái)面水平.
(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
(3)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等.
(4)內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。
3.無(wú)菌室的滅菌消毒
(1)薰蒸:這是無(wú)菌室徹底滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間,污染比較嚴(yán)重時(shí),應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌.可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
(2)噴霧:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng),并有殺菌作用.可用5%石炭酸噴霧。
(3)紫外線照射:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行.紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60min。
4.無(wú)菌室工作規(guī)程
(1)無(wú)菌室滅菌.每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。
(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘.
(3)將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位,用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進(jìn)內(nèi)室工作!
(4)接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí),動(dòng)作要輕緩,盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。
(5)工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴(kuò)大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí),應(yīng)用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
(6)工作結(jié)束,立即將臺(tái)面收拾干凈,將不應(yīng)在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后,對(duì)無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min.
(五)恒溫培養(yǎng)室
1. 培養(yǎng)室的設(shè)置
(1)培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內(nèi)室面積在3。2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1。8=6m2左右,高以2。5m左右為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口。
(3)為滿足微生物對(duì)溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機(jī)。
(4)內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈,以供滅菌用。
2. 培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具
(1)內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)(搖床)。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種.
(2)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等.
3. 培養(yǎng)室的滅菌、消毒
同無(wú)菌室的滅菌、消毒措施。
小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行!
(六)普通實(shí)驗(yàn)室
進(jìn)行微生物的觀察、計(jì)數(shù)和生理生化測(cè)定工作的場(chǎng)所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點(diǎn)不同而有很大的差異.一般均配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)要求平整、光滑,實(shí)驗(yàn)柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。
(七)更衣室
是進(jìn)入無(wú)菌室之前工作人員進(jìn)行更衣、洗手的地方.室內(nèi)設(shè)置無(wú)菌室及緩沖室的電源控制開關(guān)和放置無(wú)菌操作時(shí)穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。
(八)辦公室
登記待檢驗(yàn)樣品;出檢測(cè)報(bào)告;處理有關(guān)文件資料;放松休息等
三、微生物實(shí)驗(yàn)室的常用儀器及功能
理化試驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案
一、主要檢測(cè)項(xiàng)目
蛋白、水分、灰分、鈣、磷、鹽、微生物、礦物質(zhì)、藥殘等。在功能上又涉及到排水、通風(fēng)、排風(fēng)、供電、空調(diào)、消防、廢氣、廢液處理等復(fù)雜的工藝技術(shù),同時(shí)還要考慮到環(huán)保、安全、可持續(xù)性發(fā)展等諸多因素,因此是一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)工程。
二、設(shè)計(jì)要求
1.環(huán)境要求
1.通風(fēng)
實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng),人員多和實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生一些有害氣體,造成空氣污濁,對(duì)人體不利。為了防止實(shí)驗(yàn)室工作人員吸入或咽入一些有有毒的、可致病的或毒性不明的化學(xué)物質(zhì)和有機(jī)氣體,實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)有良好的通風(fēng),必要時(shí)應(yīng)設(shè)空調(diào).通風(fēng)設(shè)備有:通風(fēng)柜、通風(fēng)罩或局部通風(fēng)裝置.除了樓主提到的外,需要注意有機(jī)溶劑 前處理和使用電爐進(jìn)行前處理的通風(fēng)柜應(yīng)分別布置在不同的實(shí)驗(yàn)室,局部排風(fēng)裝置和排風(fēng)罩必須具有足夠的功率,否則實(shí)際工作中難以滿足使用要求.
1.2濕度和溫度
實(shí)驗(yàn)室要求適宜的溫度和濕度。室內(nèi)的小氣候,包括氣溫、濕度和氣流速度等,對(duì)在實(shí)驗(yàn)室工作的人員和儀器設(shè)備有影響。夏季的適宜溫度應(yīng)是18-28℃,冬季 為16—20℃,濕度最好在30%(冬季)—70%(夏季)之間。除了特殊實(shí)驗(yàn)室外,溫濕度對(duì)大多數(shù)理化實(shí)驗(yàn)影響不大,但是天平室和精密儀器室應(yīng)根據(jù)需要 對(duì)溫濕度進(jìn)行控制 .
1.3潔凈度
經(jīng)常保持實(shí)驗(yàn)室的清潔是非常重要的。室外大氣中的塵埃,借通風(fēng)換氣過程會(huì)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)內(nèi)含塵量過高,空氣不凈,不但影響檢測(cè)結(jié)果,而且,其微粒落在儀 器設(shè)備的元件表面上,可能構(gòu)成障礙,甚至造成短路或其他潛在危險(xiǎn)。潔凈實(shí)驗(yàn)室是要花銀子的,建議不是特殊需要可不進(jìn)行潔凈實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì),若有需要可以對(duì)大型 精密儀器室、特殊實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)計(jì),一般達(dá)到萬(wàn)級(jí)凈化要求即可。若有多個(gè)潔凈實(shí)驗(yàn)室,送排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)各自獨(dú)立設(shè)計(jì),獨(dú)立使用。
2.設(shè)施要求
2.1供水與排水、排污
實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)有供排水裝置,排水裝置最好用聚氯乙烯管,接口用焊槍焊接;瘜W(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)臺(tái)有可能都應(yīng)安裝水管、水龍頭、水槽、緊急沖淋器、洗眼器等,一般實(shí)驗(yàn) 室的廢水無(wú)須處理就可排入城市下水網(wǎng)道,而實(shí)驗(yàn)室的廢水必須凈化處理后才能排入下水網(wǎng)道。現(xiàn)代化的實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)建設(shè)配套的污水處理站,一般實(shí)驗(yàn)室的廢水 無(wú)須處理就可排入污水處理站進(jìn)行處理,對(duì)高濃度的酸堿廢水應(yīng)先中和再排入污水處理站,對(duì)此類廢水的排放建議采用耐酸減的排水管道,從實(shí)驗(yàn)室直接排放到處理 站,對(duì)大量使用有機(jī)溶劑的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝耐有機(jī)溶劑的排水管道,例如可采用鑄鐵管接入污水處理站,也就是說,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)不同功能,采用不同材料的排水管 道,分別設(shè)計(jì)相互之間不交叉,分別排放到污水處理站。實(shí)驗(yàn)室的廢水必須凈化處理后才能排入下水網(wǎng)道。實(shí)驗(yàn)室的供水有自來水和實(shí)驗(yàn)用純水,除了自來水, 建議安裝純水處理裝置,保障實(shí)驗(yàn)室用水,并且再相關(guān)實(shí)驗(yàn)室純水終端加裝超純水處理裝置,滿足精密儀器使用要求.
2.2供電
電力是實(shí)驗(yàn)室重要?jiǎng)恿。為保障?shí)驗(yàn)室的正常工作,電源的質(zhì)量、安全可靠性及連續(xù)性必需保證。一般用電和實(shí)驗(yàn)用電必須分開;對(duì)一些精密、貴重儀器設(shè)備,要求 提供穩(wěn)壓、恒流、穩(wěn)頻、抗干擾的電源;必要時(shí)須建立不中斷供電系統(tǒng),還要配備專用電源,如不間斷電源(UPS)等。
2.3供氣與排氣
實(shí)驗(yàn)室使用的壓縮氣體鋼瓶,應(yīng)保持最少的數(shù)量,必須牢牢固定,或用金屬鏈栓牢,絕不能靠近火源,直接日曬,高溫房間等溫度可能升高的地方使用。實(shí)驗(yàn)室的廢氣的處理,如量少,可直接排出室外;但排出管必須高出附近房頂3m左右,對(duì)毒性較大或數(shù)量多的廢氣,可參考工業(yè)廢氣處理方法如用吸附,吸收,氧化,分解等 方法來處理.如果理化實(shí)驗(yàn)室不是在最高一層,廢氣的排放必須采用專用管道從樓頂排放。
三、功能與布局
1.特性
根據(jù)理化檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室工作的特性,應(yīng)創(chuàng)造一個(gè)安全、舒適、美化的實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境,辦公區(qū)域與實(shí)驗(yàn)區(qū)域分開,即形成非受控區(qū)域和受控區(qū)域.理化實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配置樣品前處理室、理化分析室(精密儀器室)、天平室、留樣室、辦公室等。
2.布局規(guī)劃
2.1樣品前處理室
實(shí)驗(yàn)室必須有排風(fēng)設(shè)施,獨(dú)立排氣柜,有機(jī)、無(wú)機(jī)前處理室分開,占用面積不少于30m2/間,墻、地板、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、排氣柜等要絕緣、耐熱、耐酸堿和耐有機(jī)溶劑腐蝕;地面應(yīng)有地漏,防倒流。設(shè)置中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)供實(shí)驗(yàn)臺(tái)用的上下水裝置、電源插頭。
2.2理化分析室
(精密儀器室)色譜室:氣相色譜室,氣質(zhì)聯(lián)用室:可聯(lián)用,以單臺(tái)計(jì)算面積不小于10m2為宜.液相色譜室,液質(zhì)聯(lián)用儀室:可聯(lián)用,面積不小于20m2/間(以單臺(tái)計(jì)算)標(biāo)準(zhǔn)化的至少需要3臺(tái)液相色譜儀,兩臺(tái)共用一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,至少2個(gè)房間離子色譜室可以與液相室聯(lián)用,單獨(dú)實(shí)驗(yàn)室房間建議15m2以上。光譜室:建議配置獨(dú)立三相380V電源。原子吸收室:獨(dú)立排風(fēng)(外排)通道,上下水。原子熒光室:獨(dú)立排風(fēng)(外排)通道.原子吸收與原子熒光室可聯(lián)用,條件好的可配備ICP-MS室,單獨(dú)實(shí)驗(yàn)室房面積建議15m2以上。
2.3天平室
天平室應(yīng)有雙層玻璃和窗簾,有恒溫恒濕系統(tǒng),天平臺(tái)必須防震,天平臺(tái)放置必須離開墻壁1cm,可購(gòu)置防震型天平臺(tái)或磚砌大理石臺(tái)面天平臺(tái).建議8m2以上。
2.4小型儀器室
小型儀器室應(yīng)有足夠的電源插座,最好安裝穩(wěn)壓裝置,配備水池.可存放紫外可見分光光度計(jì),顯微鏡,酸度計(jì)等小型儀器。建議15m2以上.
2.5 留樣室
存放樣品柜、工作臺(tái)。房間面積建議20m2以上.獨(dú)立的樣品存儲(chǔ)室,存儲(chǔ)柜功能區(qū)間應(yīng)劃分清楚,標(biāo)明未檢樣品、在檢樣品和已檢樣品。樣品室必須干燥、通風(fēng)、防塵、防鼠。
2.6 辦公室
作為實(shí)驗(yàn)室管理及數(shù)據(jù)報(bào)告填寫等工作要求,具體根據(jù)實(shí)驗(yàn)室人員設(shè)定。建議20m2以上.獨(dú)立的樣品存儲(chǔ)室,存儲(chǔ)柜功能區(qū)間應(yīng)劃分清楚,標(biāo)明未檢樣品、在檢樣品和已檢樣品。樣品室必須干燥、通風(fēng)、防塵、防鼠。
四、常用設(shè)備
水分、含鹽量、含糖量、蛋白含量、脂肪含量、纖維含量、維生素含量、酸度等。對(duì)于這些項(xiàng)目的檢測(cè),如果經(jīng)費(fèi)有限,都可以采用化學(xué)法分析,只需配置最簡(jiǎn)單的烘箱、水浴、電爐、攪拌器、粉碎機(jī)、pH計(jì)等設(shè)備即可。紫外/可見分光光度計(jì)、近紅外分析儀、自動(dòng)滴定儀等。檢測(cè)維生素A、E等有時(shí)還需配置熒光光度計(jì)。檢測(cè)營(yíng)養(yǎng)元素,如鈣、鋅、鐵等,可購(gòu)置原子吸收儀-火焰檢測(cè)器。
a)微生物
建微生物實(shí)驗(yàn)室要按照生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行布局。必要的設(shè)備有潔凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、電爐等,其它設(shè)備則根據(jù)具體檢測(cè)項(xiàng)目配置。經(jīng)費(fèi)少可以買國(guó)產(chǎn)的,經(jīng)費(fèi)多可以考慮買進(jìn)口的,兩者的價(jià)錢相差很多.
b)添加劑和有害元素
有一部分項(xiàng)目可以用化學(xué)法,如亞硝酸鹽、二氧化硫、重金屬含量、總砷等。但要想滿足現(xiàn)在國(guó)標(biāo)的食品衛(wèi)生要求,應(yīng)該購(gòu)置氣相色譜-氫火焰檢測(cè)器、液相色譜—紫外/可見光檢測(cè)器,這樣一般的防腐劑(苯甲酸、山梨酸等)、甜味劑(甜蜜素、糖精鈉等)、色素(檸檬黃、胭脂紅等)都可以檢測(cè)了。購(gòu)置原子吸收儀—石墨爐檢測(cè)器,可以分別檢測(cè)鉛、鉻、鎘、銅、鎳等有害元素,還需要一臺(tái)原子熒光儀,用來檢測(cè)砷和汞等。
c)殘留農(nóng)藥
檢測(cè)殘留農(nóng)藥氣相色譜是不能少的。檢測(cè)有機(jī)氯農(nóng)藥,需配電子俘獲ECD檢測(cè)器;檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥,需配火焰光度FPD檢測(cè)器或氮磷NPD檢測(cè)器,F(xiàn)在農(nóng)殘檢測(cè)的項(xiàng)目越來越多,為提高通用性,建議配置毛細(xì)管柱分流/不分流進(jìn)樣口,安裝毛細(xì)管色譜柱。與傳統(tǒng)填充柱色譜柱相比,毛細(xì)管柱分析項(xiàng)目多,分離度好,可以減少頻繁的更換色譜柱,提高分析效率。出口食品加工企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品在出口時(shí)需檢測(cè)的農(nóng)殘項(xiàng)目越來越多,為了把好生產(chǎn)原料和產(chǎn)品質(zhì)量關(guān),可以配置氣相色譜—質(zhì)譜儀。一般只需配置電子轟擊EI源,如果有必要可再配一個(gè)負(fù)化學(xué)NCI源.是選擇四極質(zhì)譜還是離子阱質(zhì)譜,個(gè)人認(rèn)為都可以,兩種儀器各有優(yōu)缺點(diǎn).還是要看具體工作。
d)殘留獸藥
若進(jìn)行殘留獸藥的檢測(cè),項(xiàng)目不多且批次多,可以考慮配置酶聯(lián)免疫儀,該儀器一次投入不大,操作簡(jiǎn)便,檢測(cè)靈敏度高。采用ELISA也有一些缺點(diǎn),一是試劑盒為長(zhǎng)期的消耗品,若檢測(cè)的批次少成本會(huì)較高,二是特異性不好,可能會(huì)有假陽(yáng)性,三是如果在相對(duì)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)檢測(cè)項(xiàng)目較多,成本甚至比儀器分析還高。對(duì)于有一定規(guī)模的出口食品企業(yè),為適應(yīng)當(dāng)前歐盟、美國(guó)、日本等發(fā)達(dá)國(guó)家檢測(cè)限量要求,最好配置一臺(tái)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀。第一臺(tái)儀器建議配置三重四極質(zhì)譜儀,靈敏度高、重現(xiàn)性好。儀器不一定要追求高配置,夠用就行,但靈敏度、穩(wěn)定性、抗污染等性能要好。
文章(文字)來源:月旭柯技。