索氏抽提法

1范圍

本法適用于水果、蔬菜及其制品、糧食及糧食制品、肉及肉制品、蛋及蛋制品、水產(chǎn)及其制品、焙烤食品、糖果等食品中游離態(tài)脂肪含量的測(cè)定。

2原理

脂肪易溶于有機(jī)溶劑。試樣直接用無(wú)水乙醚或石油醚等溶劑抽提后,蒸發(fā)除去溶劑，干燥,得到游離態(tài)脂肪的含量。

3試劑和材料

除非另有說(shuō)明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682-2008規(guī)定的三級(jí)水。

3.1 試劑

3.1.1無(wú)水乙醚(C₄H₁₀O)。

3.1.2石油醚(C_nH_2n+2):沸程為30 ℃~60℃。

3.2 材料

3.2.1石英砂。

3.2.2脫脂棉。

4儀器和設(shè)備

4.1索氏抽提器。

4.2恒溫水浴鍋。

4.3分析天平:感量0.001 g和0.0001 g。

4.4電熱鼓風(fēng)干燥箱。

4.5干燥器:內(nèi)裝有效干燥劑，如硅膠。

4.6濾紙簡(jiǎn)。

4.7 蒸發(fā)皿。

5分析步驟

5.1試樣處理

5.1.1固體試樣 :稱取充分混勻后的試樣2 g~5 g，準(zhǔn)確至0.001 g,全部移入濾紙簡(jiǎn)內(nèi)。

5.1.2液體或半固體試樣:稱取混勻后的試樣5g~10 g,準(zhǔn)確至0.001 g,置于蒸發(fā)皿中,加入約20g石英砂。于沸水浴上蒸干后,在電熱鼓風(fēng)干燥箱中于100℃土5℃干燥30min后,取出,研細(xì)，全部移入濾紙簡(jiǎn)內(nèi)。蒸發(fā)皿及粘有試樣的玻璃棒,均用沾有乙醚的脫脂棉擦凈,并將棉花放入濾紙簡(jiǎn)內(nèi)。

5.2 抽提

將濾紙簡(jiǎn)放入索氏抽提器的抽提簡(jiǎn)內(nèi),連接已干燥至恒重的接收瓶,由抽提器冷凝管上端加入無(wú)水乙醚或石油醚至瓶?jī)?nèi)容積的三分之二處,于水浴上加熱，使無(wú)水乙醚或石油醚不斷回流抽提(6次/h~8次/h),一般抽提6 h~10 h。提取結(jié)束時(shí),用磨砂玻璃棒接取1滴提取液,磨砂玻璃棒上無(wú)油斑表明提取完畢。

5.3 稱量

取下接收瓶，回收無(wú)水乙醚或石油醚,待接收瓶?jī)?nèi)溶劑剩余1 mL~2 mL時(shí)在水浴上蒸干,再于100 ℃士5℃干燥1 h，放干燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱量。重復(fù)以上操作直至恒重(直至兩次稱量的差不超過(guò)2 mg)。

6分析結(jié)果的表述

試樣中脂肪的含量按式(1)計(jì)算:

式中:

X -試樣中脂肪的含量,單位為克每百克(g/100 g)；

m₁-恒重后接收瓶和脂肪的含量,單位為克(g)；

m₀-接收瓶的質(zhì)量,單位為克(g)；

m₂-試樣的質(zhì)量,單位為克(g)；

100-換算系數(shù)。

計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后-位。

7精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。

酸水解法

1范圍

本法適用于水果、蔬菜及其制品、糧食及糧食制品、肉及肉制品.蛋及蛋制品、水產(chǎn)及其制品、焙烤食品、糖果等食品中游離態(tài)脂肪及結(jié)合態(tài)脂肪總量的測(cè)定。

2原理

食品中的結(jié)合態(tài)脂肪必須用強(qiáng)酸使其游離出來(lái),游離出的脂肪易溶于有機(jī)溶劑。試樣經(jīng)鹽酸水解后用無(wú)水乙醚或石油醚提取,除去溶劑即得游離態(tài)和結(jié)合態(tài)脂肪的總含量。

3試劑和材料

除非另有說(shuō)明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682-2008規(guī)定的三級(jí)水。

3.1 試劑

3.1.1 鹽酸(HC1)。

3.1.2 乙醇(C₂H₅OH)。

3.1.3無(wú)水乙醚(C₄H₁₀O)。

3.1.4 石油醚(C_nH_2n+2):沸程為30 ℃~60℃。

3.1.5碘(I2)。

3.1.6 碘化鉀(KI)。

3.2 試劑的配制

3.2.1 鹽酸溶液(2 mol/L):量取50 mL.鹽酸,加入到250 mL水中,混勻。

3.2.2碘液(0.05 mol/L):稱取6.5 g碘和25 g碘化鉀于少量水中溶解,稀釋至1L。

3.3材料

3.3.1藍(lán)色石蕊試紙。

3.3.2脫脂棉。

3.3.3 濾紙:中速。

4儀器和設(shè)備

4.1恒溫水浴鍋。

4.2電熱板:滿足 200℃高溫。

4.3錐形瓶。

4.4 分析天平:感量為0.1g和0.001g。

4.5 電熱鼓風(fēng)干燥箱。

5分析步驟

5.1 試樣酸水解

5.1.1 肉制品

稱取混勻后的試樣3 g~5 g準(zhǔn)確至0.001 g,置于錐形瓶(250 mL)中,加入50 mL 2 mol/L鹽酸溶液和數(shù)粒玻璃細(xì)珠,蓋上表面皿，于電熱板上加熱至微沸,保持1h，每10min旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)1次。取下錐形瓶,加入150 mL熱水，混勻,過(guò)濾。錐形瓶和表面皿用熱水洗凈,熱水一并過(guò)濾。沉淀用熱水洗至中性(用藍(lán)色石蕊試紙檢驗(yàn),中性時(shí)試紙不變色)。將沉淀和濾紙置于大表面皿上,于100℃士5℃干燥箱內(nèi)干燥1 h,冷卻。

5.1.2 淀粉

根據(jù)總脂肪含量的估計(jì)值，稱取混勻后的試樣25 g~50 g，準(zhǔn)確至0.1 g，倒人燒杯并加入100 mL水。將100mL鹽酸緩慢加到200mL水中,并將該溶液在電熱板上煮沸后加人樣品液中，加熱此混合液至沸騰并維持5min,停止加熱后,取幾滴混合液于試管中,待冷卻后加入1滴碘液,若無(wú)藍(lán)色出現(xiàn)，可進(jìn)行下一步操作。若出現(xiàn)藍(lán)色,應(yīng)繼續(xù)煮沸混合液,并用上述方法不斷地進(jìn)行檢查,直至確定混合液中不含淀粉為止,再進(jìn)行下一步操作。

將盛有混合液的燒杯置于水浴鍋(70℃~80℃)中30min,不停地?cái)嚢?以確保溫度均勻,使脂肪析出。用濾紙過(guò)濾冷卻后的混合液,并用干濾紙片取出粘附于燒杯內(nèi)璧的脂肪。為確保定量的準(zhǔn)確性，應(yīng)將沖洗燒杯的水進(jìn)行過(guò)濾。在室溫下用水沖洗沉淀和干濾紙片，直至濾液用藍(lán)色石蕊試紙檢驗(yàn)不變色。將含有沉淀的濾紙和干濾紙片折疊后,放置于大表面皿上,在100℃土5℃的電熱恒溫干燥箱內(nèi)干燥1h。

5.1.3 其他食品

5.1.3.1固體試樣:稱取約2 g~5 g，準(zhǔn)確至0.001 g，置于50 mL，試管內(nèi),加入8 mL水,混勻后再加10mL鹽酸。將試管放入70℃~80℃水浴中，每隔5min~10min以玻璃棒攪拌1次,至試樣消化完全為止,約40 min~ 50 min。

5.1.3.2液體試樣:稱取約10 g，準(zhǔn)確至0.001 g,置于50 mL試管內(nèi),加10 mL鹽酸。其余操作同5.1.3.1。

5.2 抽提

5.2.1 肉制品、淀粉

將干燥后的試樣裝人濾紙簡(jiǎn)內(nèi)。其余抽提步驟同上法5.2。

5.2.2 其他食品

取出試管,加入10 mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移入100 mL具塞量簡(jiǎn)中,以25 mL無(wú)水乙醚分?jǐn)?shù)次洗試管,一并倒入量簡(jiǎn)中。待無(wú)水乙醚全部倒人量簡(jiǎn)后,加塞振搖1 min,小心開(kāi)塞，放出氣體，再塞好,靜置12 min,小心開(kāi)塞,并用乙醚沖洗塞及量簡(jiǎn)口附著的脂肪。靜置10 min~20 min,待上部液體清晰,吸出上清液于已恒重的錐形瓶?jī)?nèi),再加5 mL無(wú)水乙醚于具塞量簡(jiǎn)內(nèi)，振搖，靜置后,仍將上層乙醚吸出,放人原錐形瓶?jī)?nèi)。

5.3 稱量

同上5.3。

6分析結(jié)果的表述

同上6。

7精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。