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1)波長準(zhǔn)確度
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實(shí)際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是，當(dāng)吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直，此時波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。
2)透射比（吸光度）準(zhǔn)確度
很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
3)雜散光
分光光度計(jì)的使用與維護(hù)
1）若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測量。
2）指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3）比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4）操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5）WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì)，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大，因而可以用于檢測微弱光電信號，而不能用來檢測強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點(diǎn)，在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下，因此在預(yù)熱時，應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
6）放大器靈敏度換擋后，必須重新調(diào)零。
7）比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用，否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下；分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色杯；220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色杯：700nm處裝蒸餾水，將某一個池的透射比值調(diào)至100%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用，若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響。
典型故障及其排除方法
1）儀器不能調(diào)零。可能原因：
a）光門不能完全關(guān)閉。解決方法：修復(fù)光門部件，使其完全關(guān)閉。
b）透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調(diào)整“100%”旋鈕。 c）儀器嚴(yán)重受潮。解決方法：可打開光電管暗盒，用電吹風(fēng)吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑。d）電路故障。解決方法：檢修電路。
2）儀器不能調(diào)“100%”�？赡茉颍�
a）光能量不夠。解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈（盡管燈還亮）。
b）比色皿架未落位。解決方法：調(diào)整比色皿架使其落位。
c）光電轉(zhuǎn)換部分老化。解決方法：更換部件。
d）電路故障。解決方法：調(diào)修電路。
3)測量過程中,“100%”點(diǎn)經(jīng)常變動。可能原因：
a）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。
b）電路故障（電壓、光電接收、放大電路）。解決方法：送修。
4)數(shù)顯不穩(wěn)。可能原因：
a）預(yù)熱時間不夠。解決方法：延長預(yù)熱時間至30分鐘左右（部分儀器由于老化等原因，長時間處于工作狀態(tài)時，也會工作不穩(wěn)）。
b）光電管內(nèi)的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。
c）環(huán)境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強(qiáng)光照射等。解決方法：改善工作環(huán)境。
d）光電管、電路等其它原因。
小結(jié)
綜上所述，以下幾個問題應(yīng)引起儀器操作人員注意：
1）比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。
有些使用者對這個問題不夠重視，因操作不當(dāng)造成偶然誤差，嚴(yán)重影響分析結(jié)果。首先，應(yīng)保證比色皿不傾斜放置。稍許傾斜，就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致，還可能使入射光不能全部通過樣品池，導(dǎo)致測試比準(zhǔn)確度不符合要求。其次，應(yīng)保證每次測試時，比色皿架推拉到位。若不到位，將影響到測試值的重復(fù)性或準(zhǔn)確度。最后,還應(yīng)保證比色皿的清潔度,延長其使用壽命。
2）干燥劑的使用問題。干燥劑失效將導(dǎo)致：
a）數(shù)顯不穩(wěn)、無法調(diào)“0”點(diǎn)或“100%”點(diǎn)（電路或光電管受潮）。
b）反射鏡發(fā)霉或沾污，影響光效率、雜散光增加。鑒于上述原因，分光光度計(jì)的放置地點(diǎn)應(yīng)遠(yuǎn)離水池等濕度大的地方、干燥劑應(yīng)定期更換或烘烤。
3）儀器的工作環(huán)境
應(yīng)避免陽光直射、避免強(qiáng)電場、避免與較大功率的電器設(shè)備共電、避開腐蝕性氣體等。
