2 在空白出現(xiàn)菌落的時候需要去分析哪一步出現(xiàn)問題，人機料法環(huán)。當(dāng)然空白出現(xiàn)菌落的時候，那么該批次的菌落總數(shù)數(shù)據(jù)都作廢處理。在制樣和做樣的時候需要在百級的環(huán)境（百級的潔凈工作臺）下進行。

3 稀釋液的均勻性，這個會影響結(jié)果，剛開始的時候可能會造成同一梯度的兩個結(jié)果相差有點遠，這個是因為做的時候沒有把稀釋液均勻。如果前后兩個梯度沒有梯度性，那么就是在做稀釋做不好。這個都是靠多做，技術(shù)才會提高。（當(dāng)然還有一種情況，樣品是中添加了抑菌物質(zhì)，這樣沒有梯度性。）

1  可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位(colony-formingunits , CFU )表示。

2  選取菌落數(shù)在 30CFU~300CFU 之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于 30CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于 300CFU 的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)。

3  其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2，代表一個平板菌落數(shù)。（這個是很多新手會問的一個問題）

4  當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。

1  若只有一個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)，計算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每 g ( mL )樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。

2  若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按式( 1 )計算:

3  若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于 300CFU，則對稀釋度最高的平板進行計數(shù)，其他平板可記錄為多不可計，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計算。

4  若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于 30CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。

5  若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長，則以小于 1 乘以最低稀釋倍數(shù)計算。

6  若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在 30CFU~300CFU 之間，其中一部分小于 30CFU 或大于300CFU 時，則以最接近 30CFU 或 300CFU 的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。