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食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)審評委員會秘書處關(guān)于征求《食品中低聚半乳糖的測定》等17項(xiàng)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)和修改單（征求意見稿）意見的函
發(fā)布時(shí)間：2022-03-31來源: 食品安全標(biāo)準(zhǔn)與監(jiān)測評估司
食標(biāo)秘發(fā)〔2022〕2號
各有關(guān)單位：
根據(jù)《食品安全法》及其實(shí)施條例規(guī)定，我委組織起草了《食品中低聚半乳糖的測定》等17項(xiàng)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)和修改單（征求意見稿），現(xiàn)向社會公開征求意見。請于2022年5月10日前登錄食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)管理信息系統(tǒng):
http://sppt.cfsa.net.cn:8086/cfsa_aiguo在線提交反饋意見。
食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)審評委員會秘書處
2022年3月30日
GB 4789.40征求意見稿相對于2016年發(fā)布的《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)檢驗(yàn)》（以下簡稱2016版）有哪些不同之處呢？食品伙伴網(wǎng)食品微生物檢測小編對此進(jìn)行了相關(guān)對比，以供大家參考。
將標(biāo)準(zhǔn)名稱由《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）檢驗(yàn)》修改為 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 克羅諾桿菌檢驗(yàn)》。
適用范圍改為“嬰幼兒配方食品、嬰幼兒輔助食品、乳及乳制品及其原料中克羅諾桿菌的檢驗(yàn)”，增加了嬰幼兒輔助食品。
我國現(xiàn)行食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.40-2016中規(guī)定的克羅諾桿菌屬檢測方法，采用44℃的選擇性增菌溫度，該溫度與ISO 22964-2006相同，但是，44℃培養(yǎng)在國際上存在爭議，該溫度被認(rèn)為會抑制部分克羅諾桿菌生長，而降低檢出率。
因此本次修改將mLST-Vm 肉湯增菌溫度由原來的44℃±0.5℃調(diào)為“41.5 ℃±1 ℃”來培養(yǎng)。同時(shí)修改了BPW的預(yù)熱溫度調(diào)至41 ℃，避免溫度較高損傷細(xì)菌，減少漏檢的可能。
ISO 22964-2017中分離平板TSA是36℃±2℃培養(yǎng)21h±3h，F(xiàn)DA方法中分離培養(yǎng)也是36℃培養(yǎng)18-24小時(shí)，因此本次修改也將TSA平板的培養(yǎng)溫度和時(shí)間由“25 ℃±1℃培 養(yǎng)48h±4h”調(diào)整為“36℃±1℃培養(yǎng)24 h±2 h”。
有文獻(xiàn)報(bào)道約，部分克羅諾桿菌在TSA上不產(chǎn)黃色素，僅依靠TSA上產(chǎn)黃色素來作為是否進(jìn)行生化鑒定的依據(jù)會造成漏檢，目前在ISO22964-2017也被取消，因此在新版標(biāo)準(zhǔn)中將該生化鑒定中“產(chǎn)黃色素項(xiàng)目”刪除。
GB 4789.40-2016中苦杏仁苷生化反應(yīng)為陽性，目前國際上已不再使用該生化反應(yīng)用于克羅諾桿菌鑒定，而刪除該反應(yīng)也不影響該菌的判定，因此在本次修訂中將生化鑒定中的“苦杏仁苷項(xiàng)目”刪除。
GB 4789.40-2016中，各類培養(yǎng)基的pH值均在高壓前進(jìn)行調(diào)節(jié)，研究發(fā)現(xiàn)高壓過程會對培養(yǎng)基的成分產(chǎn)生影響從而改變pH值，ISO 22964-2017等國際方法已將該值調(diào)整為高壓滅菌后25 ℃時(shí)的pH值，GB 4789.28-2013中也要求pH值應(yīng)為滅菌后測定，因此在本次修訂中也將其進(jìn)行了修改。
增加PCR屬鑒定方法作為選作項(xiàng)目可以減少工作量的同時(shí)，節(jié)省檢測時(shí)間。另外該方法包容性較好，對于克羅諾桿菌不會發(fā)生漏檢的情況，能夠滿足可疑菌落的高通量篩選的需求。因此在本次修訂也增加了“PCR鑒定方法作為選做內(nèi)容”的修改。
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GB、BAM、ISO檢驗(yàn)方法差異比對 |
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方法來源 |
GB 4789.40-2016 |
GB 4789.40-XXX （征求意見稿） |
BAM |
ISO 22964-2017 (定性) |
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取樣量 |
定性: 100g |
定性: 100g |
定性: 100g |
10g/10mL+90mLBPW |
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定量: 100g、10g、 1g |
定量: 100g、10g、 1g |
定量: 100g、10g、 1g |
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增菌 |
BPW（預(yù)熱44℃）預(yù)增菌 |
BPW（預(yù)熱41℃）預(yù)增菌 |
BPW預(yù)增菌 |
BPW預(yù)增菌 |
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mLST-Vm選擇性增菌 |
mLST-Vm選擇性增菌 |
CSB選擇性增菌 |
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培養(yǎng)條件 |
BPW: 36℃±1℃培養(yǎng)18h ±2h |
BPW: 36℃±1℃培養(yǎng)18h ±2h |
36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h |
BPW: 34℃- 38℃培養(yǎng)18h ±2h |
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mLST: 44℃+0.5℃培養(yǎng)24h +2h |
mLST:41.5 ℃±1 ℃培養(yǎng) 24h +2h |
CSB: 41.5℃± 1℃培養(yǎng) 24h ±2h |
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分離培養(yǎng) |
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基 |
克羅諾桿菌顯色培養(yǎng)基 |
DFI和R&F瓊脂 |
CCI瓊脂 |
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計(jì)數(shù)方法 |
MPN |
MPN |
MPN |
無 |
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確證實(shí)驗(yàn) |
TSA平板產(chǎn)黃色素、氧化酶陰性、L-賴氨酸脫羧酶陰性、L-鳥氨酸脫羧酶陽性、L-精氨酸雙水解酶陽性、檸檬酸水解陽性、D-山梨醇陰性、L-鼠李糖陽性、D-蔗糖陽性、D-蜜二糖陽性、苦杏仁苷陽性 |
TSA平板產(chǎn)黃色素、氧化酶陰性、L-賴氨酸脫羧酶陰性、L-鳥氨酸脫羧酶陽性、L-精氨酸雙水解酶陽性、檸檬酸水解陽性、D-山梨醇陰性、L-鼠李糖陽性、D-蔗糖陽性、D-蜜二糖陽性、苦杏仁苷陽性 |
VITEK 2.0或Rapid ID 32E |
氧化酶、4-硝基苯基a-D吡喃葡萄糖苷底物、L-賴氨酸脫羧酶、L-鳥氨酸脫羧 酶、甲基紅(可選)、VP (可選) 發(fā)酵: D-阿拉伯糖醇、D-山梨醇、D-蔗糖、a-甲基-D-葡萄糖苷陽性(可選) |
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分子方法 |
無 |
PCR |
PCR |
無 |
