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      LST培養(yǎng)基滅菌失敗的原因分析

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2019-04-23
      核心提示:大腸菌群(大腸桿菌)檢測實驗培養(yǎng)基(LST)滅菌時,偶爾會有小氣泡留在小導管內(nèi),導致培養(yǎng)基不能使用。重復滅菌不僅費時費電,還
       大腸菌群(大腸桿菌)檢測實驗培養(yǎng)基(LST)滅菌時,偶爾會有小氣泡留在小導管內(nèi),導致培養(yǎng)基不能使用。重復滅菌不僅費時費電,還會破壞培養(yǎng)基的成分。為了避免問題的發(fā)生,根據(jù)實驗經(jīng)驗和嚴密思考做出幾種原因分析,并給予解決的辦法。

      原因一:過早打開滅菌鍋


      當滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高于室溫時,不要打開滅菌鍋。因為打開鍋蓋瞬間,鍋內(nèi)大量熱量散出,溫度突然降低,試管內(nèi)溫度也隨著降低,導致管內(nèi)氣壓減小,沸點降低,部分水會汽化留在小導管內(nèi)。


      解決辦法:等滅菌鍋內(nèi)氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。

       

      原因二:試管塞塞得太緊


      試管塞塞得太緊在滅菌時會導致試管內(nèi)與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時,鍋內(nèi)壓力會大于管內(nèi)壓力;滅菌鍋降溫降壓時,鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力。鍋內(nèi)壓力大于管內(nèi)壓力時,試管內(nèi)壓力不夠,不能將小導管內(nèi)氣體排盡,就留有氣泡;鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力時,可能會使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報廢。


      解決辦法:改用透氣性好的棉花塞,切勿使用橡皮塞。

       

      原因三:小導管口太小


      我們可以把一根毛細管一端封口,另一端插進水里,毛細管里怎么都不會進水。同樣把一個燒杯倒扣進水里就很容易進水了。小導管在加壓后一方面水要進去,另外里面的空氣要出來,如果口太小的話,空氣不容易出去,水也不容易進來,就會導致氣泡留在里面了。

       
      解決辦法:改用內(nèi)空較大的導管,盡量使用V型管,不要使用錐型管。

       

      原因四:培養(yǎng)基質量引起


      由培養(yǎng)基質量引起氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時用水做培養(yǎng)基組的對照試驗,若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是由此原因引起。


      解決辦法:改用其它培養(yǎng)基。

       

      原因五:滅菌鍋壓力不夠氣體不能排盡


      滅菌鍋最大壓力不夠不能使管內(nèi)液體強行把氣體擠出,最后還留有小氣泡,還會使溫度上升緩慢,或達不到滅菌溫度。此原因的可能性較小,我們可以在排除原因一、二、三、四的情況下,用不加試管塞、大口導管做試驗,若還仍不能達到效果,就要檢查滅菌鍋了。


      解決辦法:修理滅菌鍋。



      注意事項:
      1.小導管內(nèi)出現(xiàn)氣泡通常是由前3種原因引起的,實際操作中可以按以上順序進行排查。2.千萬不要將試管倒置,以免試管口和試管塞受培養(yǎng)基污染。

       

       


      編輯:songjiajie2010

       
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