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      石蠟切片的制作

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-08-09  來(lái)源:實(shí)驗(yàn)室資訊網(wǎng)
      核心提示:以石蠟制作的切片,可以制成極薄的切片。一般的切片厚度要求在46微米。而石蠟切片不但可以達(dá)到這個(gè)要求,甚至可以切得更薄到2微米
       以石蠟制作的切片,可以制成極薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蠟切片不但可以達(dá)到這個(gè)要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。這一點(diǎn)是冰凍切片和火棉膠切片難以獲得的結(jié)果。另外,石蠟切片還便于制作大批的或是連續(xù)的切片。而且以石蠟包埋的組織塊便于長(zhǎng)期保存。所以石蠟切片是目前各種切片制作方法中最普通常用的一種方法。
       
      一、切片前的準(zhǔn)備: 
      1、恒溫水浴 鍋首先預(yù)熱至35℃—40℃。
      2、蠟塊整修,將蠟塊組織面的石蠟用刀修去,使組織全部暴露出切面并修平,以減少切片刀的磨損。將組織塊左右兩側(cè)的石蠟在不損傷組織及影響診斷的原則上,全部切除;否則切片容易皺褶。組織塊上下邊緣的石蠟視組織情況修齊修平;石蠟不須留得過(guò)多,應(yīng)盡量少留,以保持組織間距的最小限度。這樣切下的切片既呈帶狀,也不彎曲。片距小,在貼片時(shí)就可相應(yīng)多貼片,有利于檢查診斷。修切蠟塊時(shí)只能一點(diǎn)一點(diǎn)地切掉蠟邊,要是大片修切易使蠟塊斷裂露出組織;遇此情況應(yīng)返入新蠟再次包埋。
      3.載玻片應(yīng)事先洗滌干凈,無(wú)油膩和不透明現(xiàn)象,應(yīng)將載玻片浸入酸缸內(nèi)12小時(shí)后流水沖洗,再烤干備用。根據(jù)切片需要張數(shù),每片涂上一層極薄的蛋白甘油,插于載片板(或載片架)上備用。
      蛋白甘油的配制:取新鮮雞蛋1份加甘油1份再加適量麝香草酚攪勻。此法主要是防止脫片,實(shí)際上一張很清潔的載玻片不涂蛋白甘油也不會(huì)脫片。
      4、將鋒利的刀片裝入切片刀夾鉗內(nèi),調(diào)整角度和位置后隨即緊固,檢查切片刀的傾斜度是否正確,傾角過(guò)大、則切片上卷;傾角過(guò)小則切片皺起,以20°-30°為佳。
      5、備用小型毛筆、小型無(wú)鉤鑷子、鉛筆。
       
      二、切片的步驟:
      1、將蠟塊固定于切片機(jī)頭上的夾座內(nèi),調(diào)整到稍離開(kāi)切片能夠切到的位置上,注意蠟塊組織切面與切片刀口要垂直平行。
      2、再調(diào)整蠟塊組織切面恰好與刀口接觸,旋緊刀架,固定好機(jī)頭。
      3、根據(jù)需要調(diào)整切片厚度。
      4、搖動(dòng)切片機(jī)手輪先進(jìn)行修整切片,直到切出完整的最大組織切面后,再進(jìn)行切制。
      5、實(shí)踐中可用右手轉(zhuǎn)動(dòng)切片機(jī)手輪,左手用毛筆托起蠟片,協(xié)調(diào)地進(jìn)行切片操作。
      6、切下的切片帶,一端用鑷子輕輕拉起,應(yīng)盡可能將切片帶拉直展開(kāi),用毛筆將切片帶從刀口向上挑起,拉下切片帶,然后輕拖鋪于恒溫水面上。
       
      三、切片的注意事項(xiàng) 
      1、切片質(zhì)量的好壞,除與技術(shù)熟練程度和切片機(jī)的好壞有關(guān)外,切片刀是決定的因素,所以刀一定要磨得十分鋒利。否則在切片時(shí)會(huì)自行卷起或皺起,或?qū)⒔M織劃傷出現(xiàn)刀痕,更不能順利地將切片切成連續(xù)地長(zhǎng)條帶狀。切片刀如有缺口存在,將使制成的切片斷裂、破碎,不完整,切片時(shí)應(yīng)時(shí)時(shí)擦凈刀口。
      2、切片機(jī)的各個(gè)零件和螺絲應(yīng)旋緊,否則將會(huì)產(chǎn)生震動(dòng)。在每次更換蠟塊時(shí),應(yīng)習(xí)慣地檢查一下組織塊是否夾緊,切片刀是否穩(wěn)固,稍有疏忽就會(huì)影響切片質(zhì)量,甚至將蠟塊全部切壞,造成不可彌補(bǔ)的后果。在切制切片的開(kāi)頭階段如出現(xiàn)切制不良與其他故障,最常見(jiàn)的原因是蠟塊或切片刀的松動(dòng)所致。
      3、在搖動(dòng)切片機(jī)時(shí),用力要求均勻一致,不宜過(guò)重過(guò)猛,否則可因用力過(guò)重而使機(jī)身震動(dòng),造成切片厚薄不均。遇有硬化過(guò)度的腦、肝、脾等組織時(shí),更應(yīng)該輕輕切削,以防組織由于震動(dòng)形成空洞現(xiàn)象。
      4、在夏秋季節(jié)進(jìn)行切片時(shí),應(yīng)使用冰塊加強(qiáng)冷卻,這樣不僅可保持石蠟的硬度,同時(shí)也減少了切片的褶皺,給切片制作帶來(lái)方便。
       
      四、貼片 :
      1、將單張或數(shù)張切片,用鑷子夾住蠟片的一邊并提起,鋪于恒溫水中,(光亮的一面朝下)立即用毛筆輕輕拉展以切片無(wú)皺褶為最好。如有皺褶時(shí)用鑷子細(xì)心地逐個(gè)輕輕撥開(kāi),注意不可撥破組織。然后分開(kāi)每張切片,選取其中最完整的,沒(méi)有皺褶的切片。
      2、待切片在恒溫水內(nèi)充分?jǐn)傞_(kāi)展平后,將載玻片垂直插入水中以涂有蛋白甘油面輕靠切片,并用毛筆將切片一邊撥于玻片上,隨即將玻片直立提起,趁玻片上仍有少量水份時(shí)用毛筆,撥正切片位置。如組織較小,可在玻片上多貼幾片或幾排,但排列應(yīng)密集、整齊。
      3、用鉛筆在玻片一端的毛玻璃上寫(xiě)上標(biāo)本編號(hào),字要寫(xiě)得小而清楚、端正。
      4、將附貼好的切片置于60℃恒溫箱 內(nèi)干燥2小時(shí),蛋白質(zhì)凝固后即可進(jìn)行染色。
       
      編輯:songjiajie2010

       
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