一、染色注意事項

1．染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的處理是不一樣的。 

2．染色過程中所用的時間要根據(jù)染色時的室內(nèi)溫度、染液的新鮮程度及實驗室的實際情況等靈活掌握。在室溫高、切片、染色液又是新配制的，染色時間就要短，反之時間就長。 

3．伊紅有水溶的和醇溶的，如果用的是水溶的，應(yīng)該在脫水前進(jìn)行染色，如果是醇溶的，應(yīng)使用與溶解伊紅等濃度的酒精開始脫水。 

4．在二甲苯脫蠟之前可以先在60℃烤箱內(nèi)0.5~1小時，這樣可以使切片粘附更牢固不易脫片，也有利于脫蠟。 

5．二甲苯在HE染色中有脫蠟、透明的作用。二甲苯脫蠟的好壞主要取決于切片在二甲苯內(nèi)放置的時間和脫蠟時的溫度以及二甲苯的使用次數(shù)。染好的切片必須經(jīng)過透明，有利于顯微鏡觀察，同時并為封片起到了橋梁作用。 

6．用梯度酒精脫水時，在低濃度酒精中時間不宜過長，到高濃度時逐步延長脫水時間。以免脫水不徹底，影響二甲苯透明的效果。 

7．在酸性分化液內(nèi)停留的時間不要過長，分化不可過度，避免使細(xì)胞核內(nèi)該染上色的結(jié)構(gòu)脫色。不需分化處理的蘇木精染色時要注意掌握染色時間，以防止組織切片染色背景過深或細(xì)胞核、胞質(zhì)染色不足。
二、取材注意事項

1）取材動作要迅速，不宜作太久的拖延以免組織細(xì)胞的成分、結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。

2）切片材料應(yīng)根據(jù)需要觀察的部位進(jìn)行選擇，盡可能不要損傷所需要的部分。 
三、固定注意事項

（1）一般固定液，都以新配為好，配好后應(yīng)貯存在陰涼處，不宜放在日光下，以免引起化學(xué)變化，失去固定作用。 

（2）有些混合固定液的成份之間會發(fā)生氧化還原作用，一定要在使用前才混合，如果混合太早，固定時就沒有作用了。 

（3）固定材料時，固定液必須充足，一般為材料塊的20~30倍，有些水分多的材料，中間應(yīng)更換1-2次新液。 

（4）材料固定完畢后，保存于嚴(yán)密緊塞或加蓋的容器里，同時在容器外上標(biāo)簽，并隨同材料在溶液中投入相應(yīng)的標(biāo)簽，以免相互混淆。標(biāo)簽上注明固定液、材料來源、日期等。標(biāo)簽上的文字，應(yīng)用黑色鉛筆或繪圖黑墨水書寫。 

四、 脫水注意事項

（1）脫水必須在有蓋的玻璃品中進(jìn)行，防止吸收空氣中的水分和酒精揮發(fā)。 

（2）在更換高一級的脫水劑時，最好不要移動材料以免損壞，可用吸管吸出器皿中的脫水劑，再用吸水器吸盡皿內(nèi)剩余液，然后于皿中加入高一級脫水劑。 

（3）在低濃度酒精中，每級停留不宜太長，否則易使組織變軟，助長材料的解體。 

（4）在高濃度或純酒精中，每級停留的時間也不宜太長，否則會使組織變脆，影響切片。 

（5）如需過夜，應(yīng)停留在75%酒精中。 

（6）脫水必須徹底，否則不易透明，甚至使透明劑內(nèi)出現(xiàn)白色混濁現(xiàn)象。
五、透明注意事項

（1）使用透明劑時，要隨時蓋緊蓋子，以免空氣中的水分進(jìn)入和透明劑的揮發(fā)。 

（2）更換每級透明劑，動作要迅速，一方面為了不使材料塊干涸，另一方面能避免吸收濕氣。 

（3）在透明過程中，如果材料周圍出現(xiàn)白色霧狀，說明材料中的水未被脫凈，應(yīng)退回純酒精中重新脫水，然后再透明。
六、透蠟注意事項  

（1）盡量保持在較低溫度中進(jìn)行，以石蠟不凝固為度。

（2）透蠟溫度要恒定，不可忽高忽低。 

（3）操作要迅速，力求在最短的時間內(nèi)完成石蠟透入過程，以免引起組織變硬、變脆、收縮等。