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      食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)

      常用的電泳緩沖液

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-11-18

      緩沖液

      使用液

      濃貯存液(每升)

      tris-乙酸(tae)

      1×:0.04mol/l tris-乙酸

      50×:242g tris堿

       

      0.001mol/l edta

      57.1ml冰乙酸

         

      100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

      tris-磷酸(tpe)

      1×:0.09mol/l tris-磷酸

      10×:10g tris堿

       

      0.002mol/l edta

      15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

         

      40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

      tris-硼酸(tbe)a

      0.5×0.045mol/l tris-硼酸

      5×:54g tris堿

       

      0.001mol/l edta

      27.5硼酸

         

      20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

      堿性緩沖液b

      1×:50mmol/l naoh

      1×:5ml 10mol/l naoh

       

      1mmol/l edta

      2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0)

      tris-甘氨酸c

      1×:25mmol/l tris

      5×:15.1g tris

       

      250mmol/l 甘氨酸

      94g 苷氨酸(電泳級(jí))(ph8.3)

       

      0.1% sds

      50ml 10% sds(電泳級(jí))

      說(shuō)明:

      ①tbe溶液長(zhǎng)時(shí)間存放后會(huì)形成沉淀物,為避免這一問(wèn)題,可在室溫下用玻璃瓶保存5×溶液,出現(xiàn)沉淀后則予以廢棄。

      以片都以1×tbe作為使用液(即1:5稀釋濃貯液)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。但0.5×的使用液已具備足夠的緩沖容量。目前幾乎所有的瓊脂糖膠電泳都以1:10稀釋的貯存液作為使用液。

      進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠垂直槽的緩沖液槽較小, 故通過(guò)緩沖液的電流量通常較大,需要使用1×tbe以提供足夠的緩沖容量。

      ②堿性電泳緩沖液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

      ③tris-甘氨酸緩沖液用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳。

      2×sds凝膠加樣緩沖液:

      100mmol/l tris·hcl(6.8)

      200mmol/l二硫蘇糖醇(dtt)

      4%sds(電泳級(jí))

      0.2%溴酚藍(lán)

      20%甘油

      不含dtt的2×sds凝膠加樣緩沖液可保存于室溫,應(yīng)在臨用前取1mol/l貯存液現(xiàn)加于上述緩沖液中。

       
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