分子生物學(xué)操作中會涉及一系列儀器，使用不當導(dǎo)致實驗失敗、減少儀器使用壽命或損壞儀器。因此在進行操作前細致地了解各種儀器的使用方法及注意事項，是使后繼實驗事半功倍的一個必要準備。

一、冷凍離心機

低溫分離技術(shù)是分子生物學(xué)研究中必不可少的手段。基因片段的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實驗中，都離不開低溫離心技術(shù)，因此低溫冷凍離心機已成為分子生物學(xué)研究中必需的重要工具。

使用方法：

1.離心機應(yīng)放置在水平堅固的地板或平臺上，并力求使機器處于水平位置以免離心時造成機器震動。 

2.打開電源開關(guān)，按要求裝上所需的轉(zhuǎn)頭，將預(yù)先以托盤天平平衡好的樣品放置于轉(zhuǎn)頭樣品架上(離心筒須與樣品同時平衡)，關(guān)閉機蓋。 

3.按功能選擇鍵，設(shè)置各項要求：溫度、速度、時間、加速度及減速度，帶電腦控制的機器還需按儲存鍵，以便記憶輸入的各項信息。 

4.按啟動鍵，離心機將執(zhí)行上述參數(shù)進行運作，到預(yù)定時間自動關(guān)機。 

5.待離心機完全停止轉(zhuǎn)動后打開機蓋，取出離心樣品，用柔軟干凈的布擦凈轉(zhuǎn)頭和機腔內(nèi)壁，待離心機腔內(nèi)溫度與室溫平衡后方可蓋上機蓋。

注意事項：

1.機體應(yīng)始終處于水平位置，外接電源系統(tǒng)的電壓要匹配，并要求有良好的接地線。 

2.開機前應(yīng)檢查轉(zhuǎn)頭安裝是否牢固，機腔有無異物掉入。 

3.樣品應(yīng)預(yù)先平衡，使用離心筒離心時離心筒與樣品應(yīng)同時平衡。 

4.揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時，應(yīng)使用帶蓋的離心管，并確保液體不外漏，以免腐蝕機腔或造成事故。 

5.擦拭離心機腔時動作要輕，以免損壞機腔內(nèi)溫度感應(yīng)器。 

6.每次操作完畢應(yīng)作好使用情況記錄，并定期對機器各項性能進行檢修。 

7.離心過程中若發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象，應(yīng)立即關(guān)閉電源，報請有關(guān)技術(shù)人員檢修。

附：相對離心力與每分鐘轉(zhuǎn)速的換算

離心機的轉(zhuǎn)速，在以前實驗資料中一般以每分鐘多少轉(zhuǎn)來表示。由于離心力不僅為轉(zhuǎn)速函數(shù)，亦為離心半徑的函數(shù)，即轉(zhuǎn)速相同時，離心半徑越長，產(chǎn)生的離心力越大。因此僅以轉(zhuǎn)速表達離心力是不夠科學(xué)的，近年來主張用相對離心力(RCF)來表示比較合理�，F(xiàn)在國際資料中，已改用相對離心力來表示。

二、PCR擴增儀

目前各公司提供的PCR儀操作方法各有不同，按其操作說明進行操作。

值得提出的是，在使用一定時期后，樣品孔的實際溫度與儀器顯示溫度有時會有較大差異，應(yīng)當請廠商的技術(shù)支持人員校對儀器的各項性能。 

三、數(shù)字式酸度計

【一】、準備工作

1.儀器應(yīng)平放在符合使用環(huán)境的工作臺上，依視覺角度支起支架。

2.pH值的定位測量法： 

(一)二點定位法(高精度測量方法) 

(1) 連接好電極線路，將參比電極及活化滿24h以上清潔的PH電極移入第一標準緩沖液pH1中(例pH1=4.00)，待儀器響應(yīng)穩(wěn)定后，調(diào)節(jié)定位旋鈕至儀器顯示為“0.00”； 

(2) 將電級系統(tǒng)從第1種標準液中取出，用去離子水沖洗干凈后以濾紙吸干電級表面水份，移入第2種標準液(例pH2=9.18)中，儀器響應(yīng)穩(wěn)定后，調(diào)節(jié)斜率旋鈕，使儀器顯示為(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此后斜率旋鈕不可再動，除非更換電極系統(tǒng)； 

(3) 斜率調(diào)節(jié)完成后，重新調(diào)節(jié)定位旋鈕，使儀器顯示第2種標準液的實際pH值(9.18)，至此2點定位結(jié)束； 

(4) 將電極從第2種標準液中取出沖洗、吸干后移入待測溶液中，儀器響應(yīng)穩(wěn)定后顯示的數(shù)值即為待測溶液的pH值。 

(二)一點定位法(粗略測量法) 

(1) 將溫度補償旋鈕調(diào)至溶液溫度值； 

(2) 向左將斜率補償旋鈕旋轉(zhuǎn)至頭； 

(3) 將電級系統(tǒng)移入標準液中(一點法僅用一種標準液，如pH=4.00時)，調(diào)節(jié)定位旋鈕使儀器顯示“4.00”； 

(4) 取出電級沖洗吸干水分后移至待測溶液中，儀器響應(yīng)穩(wěn)定后顯示的數(shù)值即為待測溶液的pH值。

(三)溫度的測量

1.將功能選擇撥至溫度檔。

2.將溫度探頭插入插孔，并將溫度探頭置于環(huán)境條件或溶液中，儀器響應(yīng)穩(wěn)定后儀器顯示值即為環(huán)境條件或溶液溫度值。 

(四)注意事項 

1.認真做好儀器使用前準備工作。 

2.儀器通電后或測量過程中出現(xiàn)顯示不穩(wěn)或亂跳現(xiàn)象，應(yīng)切斷電源進行檢查，如電壓、預(yù)熱時間及電極系統(tǒng)等是否正常。 

3.使用不同電極應(yīng)注意排除離子的干擾，選擇好鹽橋，必要時應(yīng)使用離子強度固定劑。 

4.電極系統(tǒng)從第1種溶液取出移入第2種溶液之前，須用去離子水或雙蒸水清洗干凈，再用濾紙吸干表面水分，以免影響測定結(jié)果的準確性。 

5.儀器應(yīng)存放于干燥、清潔無腐蝕的場所，每次測量結(jié)束后應(yīng)關(guān)閉電源，退出電極及溫度探頭妥善保存。玻璃電極清洗后可浸于去離子水待用(注意水面不得低于玻璃球泡)，甘汞電極清潔后套上橡皮帽置于配套盒中保存，當甘汞電極內(nèi)充液泄漏或不飽和及鹽橋中斷時，應(yīng)及時補充飽和內(nèi)充液。 

6.該類儀器均采用大規(guī)模集成電路，輸入阻值較高，在對儀器內(nèi)部進行任何零部件修理焊接時，應(yīng)使用45W以下有良好地線的烙鐵，無接地線烙鐵應(yīng)撥下電源插頭焊接。

【二】、pH(酸堿度)測量

1.將功能選擇撥至“pH”檔，調(diào)節(jié)定位旋扭，斜率補償旋鈕及溫度補償旋鈕顯示值應(yīng)有相應(yīng)變化。 

2.通過儀器溫度檔測定標準液及待測樣品液溫度(要求兩種液體溫度保持一致，以減少測定誤差)，并用溫度補償旋鈕調(diào)節(jié)至溶液實際溫度值。

四、分光光度計

不同物質(zhì)對不同波長入射光的吸收程度各不相同，從而形成特征性的吸收光譜。分光光度法不僅適應(yīng)于可見光區(qū)，同時還可擴展至紫外光區(qū)及紅外光區(qū)，因此給科研實驗帶來了極大方便。下面重點介紹分光光度計的使用及注意事項。

使用規(guī)則：

1.接通穩(wěn)壓器電源，待穩(wěn)壓器輸出電壓穩(wěn)定至200V后打開光度計電源，儀器自動進入初始化。 

2.初始化約需時10 min，內(nèi)容包括：①尋找零級光；②建立基線；③最后當顯示器指示××nm時，，表明儀器完成初始化程序，可進入檢測狀態(tài)。 

3.按要求輸入各項參數(shù)，選擇相應(yīng)比色杯(玻璃或石英)，將空白管、標準管及待測管依次放入比色皿架內(nèi)，關(guān)上比色池蓋。 

4.以空白管自動調(diào)零。 

5.試樣槽依次移至樣品位置，待數(shù)據(jù)顯示穩(wěn)定后按“START/STOP”鍵，打印機自動打印所測數(shù)據(jù)，重復(fù)上述步驟，直到所有樣品檢測完畢。 

6.檢測結(jié)束后應(yīng)及時取出比色杯，并清洗干凈放回原處，同時關(guān)上儀器電源開關(guān)及穩(wěn)壓器電源開關(guān)，做好使用情況登記。

注意事項：

1.儀器初次使用或使用較長時間(一般為一年)，需檢查波長準確度，以確保檢測結(jié)果的可靠性。 

2.由于長途運輸或室內(nèi)搬運可能造成光源位置偏移，導(dǎo)致亮電流漂移增大。此時對光源位置進行調(diào)整，直至達到有關(guān)技術(shù)指標為止。若經(jīng)調(diào)整校正后波長準確度、暗電源漂移及亮電流漂移三項關(guān)鍵指標仍未符合要求，則應(yīng)停止使用，并及時通知有關(guān)技術(shù)人員檢修。 

3.每次檢測結(jié)束后應(yīng)檢查比色池內(nèi)有否溶液溢出，若有溢出應(yīng)隨時用濾紙吸干，以免引起測量誤差或影響儀器使用壽命。 

4.儀器每次使用完畢，應(yīng)于燈室內(nèi)放置數(shù)袋硅膠(或其它干燥劑)，以免反射鏡受潮霉變或沾污，影響儀器使用，同時蓋好防塵罩。 

5.儀器室應(yīng)通常保持潔凈干燥，室溫以5-35℃為宜，相對溫度不得超過85%。有條件者應(yīng)于室內(nèi)配備空調(diào)機及除濕機，以確保儀器性能穩(wěn)定。 

6.儀器室不得存放酸、堿、揮發(fā)性或腐蝕性等物質(zhì)，以免損壞儀器。 

7.儀器長時間不用時，應(yīng)定時通電預(yù)熱，每周1次，每次30min，以保證儀器處于良好使用狀態(tài)。

五、電泳儀

電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可缺少的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類，自由界面電泳不需支持物，如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。而區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質(zhì)作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等，分子生物學(xué)領(lǐng)域中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳，是指帶電粒子在電場中的運動，不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同，因此在電場中運動速度不同，根據(jù)這一特征，應(yīng)用電泳法便可以對不同物質(zhì)進行定性或定量分析，或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M行組份分析或單個組份提取制備，這在臨床檢驗或?qū)嶒炑芯恐芯哂袠O其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設(shè)計制造的。下面簡單介紹其使用方法及注意事項。

使用方法：

1.首先用導(dǎo)線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接，注意極性不要接反。 

2.電泳儀電源開關(guān)調(diào)至關(guān)的位置，電壓旋鈕轉(zhuǎn)到最小，根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。 

3.接通電源，緩緩旋轉(zhuǎn)電壓調(diào)節(jié)鈕直到達到的所需電壓為止，設(shè)定電泳終止時間，此時電泳即開始進行。 

4.工作完畢后，應(yīng)將各旋鈕、開關(guān)旋至零位或關(guān)閉狀態(tài)，并撥出電泳插頭。

注意事項：

1.電泳儀通電進入工作狀態(tài)后，禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳槽內(nèi)取放東西，如需要應(yīng)先斷電，以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端，以防漏電。 

2.儀器通電后，不要臨時增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭，以防短路現(xiàn)象發(fā)生，雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險絲，但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。 

3.由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同，電泳時所通過的電流量也不同，其泳動速度及泳至終點所需時間也不同，故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。 

4.在總電流不超過儀器額定電流時(最大電流范圍)，可以多槽關(guān)聯(lián)使用，但要注意不能超載，否則容易影響儀器壽命。 

5.某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時，允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機，但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負載再開機，否則電壓表指針將大幅度跳動，容易造成不必要的人為機器損壞。 

6.使用過程中發(fā)現(xiàn)異�，F(xiàn)象，如較大噪音、放電或異常氣味，須立即切斷電源，進行檢修，以免發(fā)生意外事故。

六、分析天平

分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要儀器，充分了解儀器性能及熟練掌握其使用方法，是獲得可靠分析結(jié)果的保證。分析天平的種類很多，有普通分析天平、半自動/全自動加碼電光投影阻尼分析天平及電子分析天平等。下面就電子分析天平的使用方法及注意事項做一介紹。

操作方法：

1.檢查并調(diào)整天平至水平位置。 

2.事先檢查電源電壓是否匹配(必要時配置穩(wěn)壓器)，按儀器要求通電預(yù)熱至所需時間。 

3.預(yù)熱足夠時間后打開天平開關(guān)，天平則自動進行靈敏度及零點調(diào)節(jié)。待穩(wěn)定標志顯示后，可進行正式稱量。 

4.稱量時將潔凈稱量瓶或稱量紙置于稱盤上，關(guān)上側(cè)門，輕按一下去皮鍵，天平將自動校對零點，然后逐漸加入待稱物質(zhì)，直到所需重量為止。 

5.被稱物質(zhì)的重量是顯示屏左下角出現(xiàn)“→”標志時，顯示屏所顯示的實際數(shù)值。 

6.稱量結(jié)束應(yīng)及時除去稱量瓶(紙)，關(guān)上側(cè)門，切斷電源，并做好使用情況登記。

注意事項：

1.天平應(yīng)放置在牢固平穩(wěn)水泥臺或木臺上，室內(nèi)要求清潔、干燥及較恒定的溫度，同時應(yīng)避免光線直接照射到天平上。 

2.稱量時應(yīng)從側(cè)門取放物質(zhì)，讀數(shù)時應(yīng)關(guān)閉箱門以免空氣流動引起天平擺動。前門僅在檢修或清除殘留物質(zhì)時使用。 

3.電子分析天平若長時間不使用，則應(yīng)定時通電預(yù)熱，每周一次，每次預(yù)熱2h，以確保儀器始終處于良好使用狀態(tài)。 

4.天平箱內(nèi)應(yīng)放置吸潮劑(如硅膠)，當吸潮劑吸水變色，應(yīng)立即高溫烘烤更換，以確保吸濕性能。 

5.揮發(fā)性、腐蝕性、強酸強堿類物質(zhì)應(yīng)盛于帶蓋稱量瓶內(nèi)稱量，防止腐蝕天平。

6.通電前應(yīng)按工作電源要求檢查電壓是否符合要求，若電源波動太大，應(yīng)經(jīng)交流穩(wěn)壓后再送接儀器。 

7.電源應(yīng)用良好接線，以消除外界干擾，使用攪拌器時，務(wù)必使攪拌器外殼與儀器接地端相連。 

8.接通儀器電源，經(jīng)10min預(yù)熱后，可進行測量工作。