目的：建立紫外可見分光光度計操作規(guī)程，確保其使用安全、正確。

范圍：適用于752型紫外可見分光光度計。

一、操作規(guī)程：

1.  打開儀器開關(guān)，儀器使用前應(yīng)預(yù)熱30分鐘。

2.  轉(zhuǎn)動波長旋鈕，觀察波長顯示窗，調(diào)整至需要的測量波長。

3.  根據(jù)測量波長，撥動光源切換桿，手動切換光源。200-339nm使用氘燈，切換桿撥至紫外區(qū)；340nm-1000nm使用鹵鎢燈，切換桿撥至可見區(qū)。

4.  調(diào)T零

在透視比（T）模式，將遮光體放入樣品架，合上樣品室蓋，拉動樣品架拉桿使其進入光路。按下“調(diào)0%”鍵，屏幕上顯示“000.0”或“-000.0”時，調(diào)T零完成。

調(diào)100%T/ OA

先用參比（空白）溶液蕩洗比色皿2-3次，將參比（空白）溶液倒入比色皿，溶液量約為比色皿高度的3/4，用擦鏡紙將透光面擦拭干凈，按一定的方向，將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋，拉動樣品架拉桿使其進入光路。按下“調(diào)100%”鍵，屏幕上顯示“BL”延時數(shù)秒便出現(xiàn)“100.0”（T模式）或“000.0”、“-000.0”（A模式）。調(diào)100%T/ OA完成。

測量吸光度

參照操作步驟3、步驟4。

在吸光度（A）模式，參照步驟5調(diào)100%T/ OA。

用待測溶液蕩洗比色皿2-3次，將待測溶液倒入比色皿，溶液量約為比色皿  高度的3/4，用擦鏡紙將透光面擦拭干凈，按一定的方向，將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋，拉動樣品架拉桿使其進入光路，讀取測量數(shù)據(jù)。

測量透視比

參照操作步驟3、步驟4。

在透視比（T）模式，參照步驟5調(diào)100%T/ OA。

用待測溶液蕩洗比色皿2-3次，將待測溶液倒入比色皿，溶液量約為比色皿  高度的3/4，用擦鏡紙將透光面擦拭干凈，按一定的方向，將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋，拉動樣品架拉桿使其進入光路，讀取測量數(shù)據(jù)。

濃度測量

參照操作步驟3、步驟4。

在透視比（T）模式，參照步驟5調(diào)100%T/ OA。

用標準濃度溶液蕩洗比色皿2-3次，將標準濃度溶液倒入比色皿，溶液量約為比色皿高度的3/4，用擦鏡紙將透光面擦拭干凈，按一定的方向，將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋，拉動樣品架拉桿使其進入光路。

按下“功能鍵”切換至濃度（C）模式。

按下“▲”或“▼”鍵，設(shè)置標準溶液濃度，并按下“確認”鍵。

用待測溶液蕩洗比色皿2-3次，將待測溶液倒入比色皿，溶液量約為比色皿    高度的3/4，用擦鏡紙將透光面擦拭干凈，按一定的方向，將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋，拉動樣品架拉桿使其進入光路，讀取測量數(shù)據(jù)。

斜率測量

參照操作步驟3、步驟4。

在透視比（T）模式，參照步驟5調(diào)100%T/ OA。

按下“功能鍵”切換至斜率（F）模式。

按下“▲”或“▼”鍵，設(shè)置樣品斜率。

9.5  用待測溶液蕩洗比色皿2-3次，將待測溶液倒入比色皿，溶液量約為比色皿  高度的3/4，用擦鏡紙將透光面擦拭干凈，按一定的方向，將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋，拉動樣品架拉桿使其進入光路，按下“確認”鍵（此時儀器自動切換至濃度（C）模式），讀取測量數(shù)據(jù)。

10.  測量完畢

10.1  測量完畢后，清理樣品室，將比色皿清洗干凈，倒置晾干后收起。

10.2  關(guān)閉電源，蓋好防塵罩，結(jié)束試驗。

二、注意事項：

調(diào)100%T/ OA后，儀器應(yīng)穩(wěn)定5分鐘再進行測量。

光源選擇不正確或光源切換桿不到位，將直接影響儀器的穩(wěn)定性。

比色皿應(yīng)配對使用，不得混用。置入樣品架時，石英比色皿上端的“Q”標記（或箭頭）、玻璃比色皿上端的“G”標記方向應(yīng)一致。

玻璃比色皿適用范圍：320nm~1100nm，石英比色皿適用范圍：200nm~1100nm。