目的:建立紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)操作規(guī)程,確保其使用安全、正確。
范圍:適用于752型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。
一、操作規(guī)程:
1. 打開儀器開關(guān),儀器使用前應(yīng)預(yù)熱30分鐘。
2. 轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)旋鈕,觀察波長(zhǎng)顯示窗,調(diào)整至需要的測(cè)量波長(zhǎng)。
3. 根據(jù)測(cè)量波長(zhǎng),撥動(dòng)光源切換桿,手動(dòng)切換光源。200-339nm使用氘燈,切換桿撥至紫外區(qū);340nm-1000nm使用鹵鎢燈,切換桿撥至可見(jiàn)區(qū)。
4. 調(diào)T零
在透視比(T)模式,將遮光體放入樣品架,合上樣品室蓋,拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路。按下“調(diào)0%”鍵,屏幕上顯示“000.0”或“-000.0”時(shí),調(diào)T零完成。
調(diào)100%T/ OA
先用參比(空白)溶液蕩洗比色皿2-3次,將參比(空白)溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路。按下“調(diào)100%”鍵,屏幕上顯示“BL”延時(shí)數(shù)秒便出現(xiàn)“100.0”(T模式)或“000.0”、“-000.0”(A模式)。調(diào)100%T/ OA完成。
測(cè)量吸光度
參照操作步驟3、步驟4。
在吸光度(A)模式,參照步驟5調(diào)100%T/ OA。
用待測(cè)溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測(cè)溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路,讀取測(cè)量數(shù)據(jù)。
測(cè)量透視比
參照操作步驟3、步驟4。
在透視比(T)模式,參照步驟5調(diào)100%T/ OA。
用待測(cè)溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測(cè)溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路,讀取測(cè)量數(shù)據(jù)。
濃度測(cè)量
參照操作步驟3、步驟4。
在透視比(T)模式,參照步驟5調(diào)100%T/ OA。
用標(biāo)準(zhǔn)濃度溶液蕩洗比色皿2-3次,將標(biāo)準(zhǔn)濃度溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路。
按下“功能鍵”切換至濃度(C)模式。
按下“▲”或“▼”鍵,設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,并按下“確認(rèn)”鍵。
用待測(cè)溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測(cè)溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路,讀取測(cè)量數(shù)據(jù)。
斜率測(cè)量
參照操作步驟3、步驟4。
在透視比(T)模式,參照步驟5調(diào)100%T/ OA。
按下“功能鍵”切換至斜率(F)模式。
按下“▲”或“▼”鍵,設(shè)置樣品斜率。
9.5 用待測(cè)溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測(cè)溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路,按下“確認(rèn)”鍵(此時(shí)儀器自動(dòng)切換至濃度(C)模式),讀取測(cè)量數(shù)據(jù)。
10. 測(cè)量完畢
10.1 測(cè)量完畢后,清理樣品室,將比色皿清洗干凈,倒置晾干后收起。
10.2 關(guān)閉電源,蓋好防塵罩,結(jié)束試驗(yàn)。
二、注意事項(xiàng):
調(diào)100%T/ OA后,儀器應(yīng)穩(wěn)定5分鐘再進(jìn)行測(cè)量。
光源選擇不正確或光源切換桿不到位,將直接影響儀器的穩(wěn)定性。
比色皿應(yīng)配對(duì)使用,不得混用。置入樣品架時(shí),石英比色皿上端的“Q”標(biāo)記(或箭頭)、玻璃比色皿上端的“G”標(biāo)記方向應(yīng)一致。
玻璃比色皿適用范圍:320nm~1100nm,石英比色皿適用范圍:200nm~1100nm。