国产精品二区按摩片,亚州另类欧美综合一区,亚洲日韩国产一区二区,国产在线观看片免费人成视频

<dfn id="yldih"></dfn>
  • <ul id="yldih"><td id="yldih"></td></ul>

  • <dfn id="yldih"></dfn>
    1. <dfn id="yldih"></dfn>
      <ul id="yldih"></ul>
      VIP標識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設(shè)為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
      食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號
       

      白細胞DNA的制備

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-05
          (1)采集外周靜脈血10ml,加1.7ml ACD(檸檬酸0.48g、檸檬酸鈉1.32g、葡萄糖1.47g、加水至100ml,0.6kg/cm2滅菌30min)抗凝。
        (2)將血液放入已滅菌的50ml塑料離心管內(nèi),加30mlSTMT[0.32mol/L蔗糖、10mmol/l Tris-HCl(pH7.5)、5mmol/L MgCl2、1%Triton –X 100],輕輕上下振蕩至透明,紅細胞完全溶解。
        (3)冰浴10min,離心,3000rpm,10min。棄上清,STMT重復(fù)處理1~3次。
       。4)棄上清,白色沉淀物加10ml STE[0.1mol/L NaCl、10mmol/l Tris-HCl(pH8.0)、1mmol/L EDTA(pH8.0)],先少量,充分混勻,然后加10mg/ml蛋白酶K100μl,20%SDS30μl,搖勻,置37℃水浴15~20h。
       。5)用等體積飽和酚抽提,3000rpm離心5min。
       。6)用大口鈍緣吸管小心吸取上層水相,加飽和酚和氯仿-異戊醇(24:1)抽提,3000rpm離心5min 。
        (7)小心吸取上層水相,用等體積氯仿-異戊醇(24:1),抽提,3000rpm離心5min。
       。8)小心吸取上層水相,加入1/10體積3mol/l NaAc,2.5體積預(yù)冷無水乙醇混勻,-20℃過夜。
        (9)將白色絮狀沉淀物用玻璃棒挑出,放入Eppendorf管內(nèi),加1ml 75%乙醇4℃靜置1h,離心,10000rpm 10min。
       。10)棄上清,用蠟?zāi)⒐芸诜夂茫槾虜?shù)個小孔,真空抽提(10~15min)。
        (11)加200μl 1×TE溶解,置4℃保存。
       。12)對所提DNA用紫外分光光度計進行定量和純度檢測。
        (13)取2~4μl DNA樣品,經(jīng)瓊脂糖凝膠(Agarose)電泳,檢查所提DNA的質(zhì)量及降解情況。
       

       

       
      推薦圖文
      推薦食品專題
      點擊排行
       
       
      Processed in 0.151 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M