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      標(biāo)本DNA的分離與純化

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-02
      用5-10ml 1xNTE(NaCl 100mmol/L ,Tris-HCl 10mmol/l pH7.4,EDTa 1mmol/L pH8.0)調(diào)整細(xì)胞為2×107個(gè)(組織應(yīng)切碎置液氮冰凍,高速攪切成粉末后,加入緩沖液)。加1/10-1/20體積(V)10mg/ml蛋白酶(Sigma Ⅷ型),1/20v 10%SDS,37℃2小時(shí)。加等量酚/3xNTE(3xNTE上封)混勻(至少7分鐘)。4℃,3000rpm,10分鐘。取上清液,加2ml TE(Tris-HCl 10mmol/L pH7.5,EDTa 1mmol/L pH8.0),充分混勻。乙醇沉淀。2mlTE溶解沉淀。加1/30xNTE,蛋白酶K(10mg/ml)代替蛋白酶重復(fù)2-4步驟。測(cè)定含量。
       

       

       
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