骨骼肌細胞培養(yǎng)
1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。
2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養(yǎng)基加10%小牛血清培養(yǎng),為促進分化可加1%的胎汁。
3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化。明膠制備比較簡單,常用Hanks液配的0.01%明膠。
肌細胞培養(yǎng)
1.選新鮮受精雞卵,置溫箱中孵育(溫箱中放有水槽,以維持箱內溫度),每日翻動一次(180度),孵育9~12天。
2.取雞胎法相間《組織培養(yǎng)和分子細胞學技術》53頁。
3.用眼科剪剪開胸腔,剝出心臟,置入皿中用Hanks液漂洗1~2次。
4.小心剪除大的動靜脈,保留心室肌,用組織塊或消化培養(yǎng)法均可。