甘薯屬無性繁殖作物,甘薯田間繁殖很易感染病毒,造成產(chǎn)量和品質(zhì)大幅度下降。據(jù)報道脫毒三代與未脫毒的產(chǎn)量差異不顯著。而且脫毒薯在田間應(yīng)用年限越長,單株薯重越輕。通過組培快繁不但提高繁殖系數(shù),而且避免了病毒的感染,保持品種種性。岳薯1號、梅營1號淀粉含量均達20%以上,產(chǎn)量超過45000kg/hm2;紫薯80是一個深受歡迎的、有廣闊市場前景的紫色品種。組培快繁對這3個無毒甘薯品種生產(chǎn)具有重要意義。
1 材料與方法
于4—6月份采集岳薯一號、梅營一號、紫薯80無毒甘薯苗莖尖,用自來水沖洗0.5—1.0h。置于超凈工作臺上用無菌濾紙吸干水分后,用75%酒精浸30s,再用0.1%升汞消毒4min,最后用無菌水沖洗4—5次。剝?nèi)?.5mm左右的莖尖生長點,接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1)MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖4%上,芽萌發(fā)后剪下轉(zhuǎn)接于繼代增殖培養(yǎng)基(2)MS+BA4mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖4%或(3)MS無激素+蔗糖40%上繼代擴繁。剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)中培養(yǎng)生根。培養(yǎng)基中均加瓊脂0.65%,培養(yǎng)溫度25±1℃,光照10—12h/d,強度2000—2500 lx。試管苗生根培養(yǎng)21d后移栽于基質(zhì)中。
2 生長與分化狀況
2.1 芽的誘導(dǎo)
莖尖在芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)7d轉(zhuǎn)綠,14d形成愈傷組織并產(chǎn)生芽。28—35d芽高度達1.0—1.5cm。
2.2 增殖培養(yǎng)
剪取誘導(dǎo)產(chǎn)生的芽接于培養(yǎng)基(2)上,接后10d莖基部即產(chǎn)生愈傷組織并開始萌發(fā)叢芽,35d產(chǎn)生叢芽3—5個,最大高度達5.4cm。在此培養(yǎng)基增殖培養(yǎng)35d可增殖5—6倍;莖段在培養(yǎng)基(3)上3d即生根,腋芽也開始生長。三周株高平均達5.8cm,具6—8片展開葉,21d繼代一次。在此培養(yǎng)基上增殖培養(yǎng)21d繁殖系數(shù)可達3—4倍。
2.3 生根培養(yǎng)
剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)上,14d生根3—4條,根生長速度較快,根最長達3.6cm,梅營1號根系在前7d里生長稍慢,以后加快。
2.4 移栽
將培養(yǎng)21d的試管苗在自然光下閉瓶煉苗1d,再開瓶煉苗1—3d,然后洗去培養(yǎng)基,栽植于腐殖土與珍珠巖比例4:1的基質(zhì)中。覆蓋薄膜,5d后適當通風,保持土壤濕潤,但膜內(nèi)相對濕度不宜過大,一般控制在85%—90%,移栽苗莖干粗壯,成活率達100%。
1 材料與方法
于4—6月份采集岳薯一號、梅營一號、紫薯80無毒甘薯苗莖尖,用自來水沖洗0.5—1.0h。置于超凈工作臺上用無菌濾紙吸干水分后,用75%酒精浸30s,再用0.1%升汞消毒4min,最后用無菌水沖洗4—5次。剝?nèi)?.5mm左右的莖尖生長點,接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1)MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖4%上,芽萌發(fā)后剪下轉(zhuǎn)接于繼代增殖培養(yǎng)基(2)MS+BA4mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖4%或(3)MS無激素+蔗糖40%上繼代擴繁。剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)中培養(yǎng)生根。培養(yǎng)基中均加瓊脂0.65%,培養(yǎng)溫度25±1℃,光照10—12h/d,強度2000—2500 lx。試管苗生根培養(yǎng)21d后移栽于基質(zhì)中。
2 生長與分化狀況
2.1 芽的誘導(dǎo)
莖尖在芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)7d轉(zhuǎn)綠,14d形成愈傷組織并產(chǎn)生芽。28—35d芽高度達1.0—1.5cm。
2.2 增殖培養(yǎng)
剪取誘導(dǎo)產(chǎn)生的芽接于培養(yǎng)基(2)上,接后10d莖基部即產(chǎn)生愈傷組織并開始萌發(fā)叢芽,35d產(chǎn)生叢芽3—5個,最大高度達5.4cm。在此培養(yǎng)基增殖培養(yǎng)35d可增殖5—6倍;莖段在培養(yǎng)基(3)上3d即生根,腋芽也開始生長。三周株高平均達5.8cm,具6—8片展開葉,21d繼代一次。在此培養(yǎng)基上增殖培養(yǎng)21d繁殖系數(shù)可達3—4倍。
2.3 生根培養(yǎng)
剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)上,14d生根3—4條,根生長速度較快,根最長達3.6cm,梅營1號根系在前7d里生長稍慢,以后加快。
2.4 移栽
將培養(yǎng)21d的試管苗在自然光下閉瓶煉苗1d,再開瓶煉苗1—3d,然后洗去培養(yǎng)基,栽植于腐殖土與珍珠巖比例4:1的基質(zhì)中。覆蓋薄膜,5d后適當通風,保持土壤濕潤,但膜內(nèi)相對濕度不宜過大,一般控制在85%—90%,移栽苗莖干粗壯,成活率達100%。