我們以SN標準中的最近似值(MPN)測定法來進行講解：

　　　附：MPN方法簡介

　　這種方法適用于檢測認為帶有大量競爭菌的食品及其原料和未經處理的食品中的少量金黃色 葡萄球菌。

1、樣品制備：

　　固體或半固體食品: 以無菌操作稱取25g樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌均 質杯內,于8000r/min均質1～2min,制成1:10樣品勻液。
　　液體食品: 用滅菌吸管吸取25mL樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶內 (瓶內預置適當數(shù)量的玻璃珠),經充分振搖制成1:10樣品勻液。
　　供計數(shù)檢驗時,可按十進位遞增稀釋法將樣品勻液再進行適當稀釋。

2、選三個連續(xù)稀釋度，從每個稀釋度分別取1 mL稀釋樣品液，接種3管含10％氯化鈉還記得么？ 金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性，可在10-15%NaCl肉湯中生長。 因此，這事實上是一種選擇性的增菌。胰蛋白胨大豆肉湯。樣品的最高稀釋度必須達到能獲得陰性終點,置36±1℃培養(yǎng)48 h。

3、用3 mm接種環(huán),從有細菌生長的各管中移取1 環(huán),劃線接種于表面干燥的Baird- Parker瓊脂平板,置36±1℃培養(yǎng)45～48h。

　　附：怎樣在平板上進行細菌的劃線分離。

4、從有細菌生長的每一平板上至少挑取1個可疑金黃色葡萄球菌菌落,移種到肉湯培養(yǎng)基中,置36±1℃培養(yǎng)20～24 h。

　　附：金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)-1
　　　　金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)-2
　　　　金黃色葡萄球菌在甘露醇高鹽平板上的菌落

5、取肉湯培養(yǎng)物0.3mL同0.5mL凝固酶試驗兔血漿于8mm×100mm試管內充分混合,置 36±1℃培養(yǎng),定時觀察是否有凝塊形成,至少觀察6 h,以內容物完全凝固,使試管倒置或 傾斜時不流動者為陽性。試驗中需同時做巳知陽性和陰性對照。對可疑結果,應進行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗{如耐熱核酸酶試驗等} 加以證實。

　　附：金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗

6、報告結果：根據(jù)凝固酶試驗結果查最近似值(MPN)表,報告金黃色葡萄球菌 的MPN/g (mL)。

　　附：國家標準：GB/T4789.10-2008 食品衛(wèi)生微生物學檢驗　金黃色葡萄球菌檢驗

　　　 行業(yè)標準：SN0172-92：出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法