1、超凈工作臺
微生物的培養(yǎng)都是在特定培養(yǎng)基中進(jìn)行無菌培養(yǎng),那么無菌培養(yǎng)必然需要超凈工作臺提供一個無菌的工作環(huán)境。超凈工作臺的主要用途是微生物的接種及處理時的無菌操作。
2、無菌室(接種室)或接種箱
要培養(yǎng)微生物,首先就需要接種,而接種必須在無菌條件下進(jìn)行。這就需要建造無菌室或接種箱,為接種創(chuàng)造必要的條件。無菌室可以建在實驗室內(nèi),作為實驗室的一個小套間。面積為4~5平方米,高2.5米左右。無菌室外應(yīng)連接一個小緩沖間,面積為2平方米左右。緩沖間和無菌室的門不要建在同一條直線上,以減少空氣中雜菌進(jìn)入無菌室。無菌室和緩沖間應(yīng)作到清潔、密閉性好,室內(nèi)最好有換氣設(shè)備,以便在工作結(jié)束后更換室內(nèi)空氣。兩個房間中應(yīng)各安裝1盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,無菌室的紫外線燈應(yīng)懸吊在工作臺的正上方,距臺面1米,以發(fā)揮最大的消毒功能。無菌室內(nèi)的工作臺等用具用品,應(yīng)經(jīng)常保持清潔,避免雜菌污染。如果沒有條件建造無菌室,可以用木制的接種箱代替。接種箱結(jié)構(gòu)簡單,容易制作,其正面安裝玻璃,便于觀察。箱前方開兩個圓洞各接連1只套袖,操作時將兩臂從套袖伸入箱內(nèi)進(jìn)行操作。箱內(nèi)也應(yīng)懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。
3、培養(yǎng)箱
培養(yǎng)箱有很多種類型,它的用途在于為微生物提供一個適宜的生長環(huán)境。主要類型包括生化培養(yǎng)箱,霉菌培養(yǎng)箱,厭氧培養(yǎng)箱等。它們的區(qū)別主要在于:
a.生化培養(yǎng)箱只能控制溫度。這類培養(yǎng)箱可作為一般細(xì)菌的平板培養(yǎng)。
b.霉菌培養(yǎng)箱可以控制濕度和溫度。它主要用在霉菌的培養(yǎng)。
c.CO2培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng),例如,雙歧桿菌。
4、天平
它是用于精確稱量各類試劑。實驗室常用的是電子天平,電子天平按照精度不同又有不同的級別。
5、微生物均質(zhì)器
它的作用在于從固體樣品中提取細(xì)菌。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測樣本具有樣品無損傷、無污染、不升溫、不需要洗刷器皿,不需滅菌處理等特點,是微生物實驗中使用較為方便的儀器。
6、菌落計數(shù)器
菌落計數(shù)儀可幫助操作者計數(shù)菌落數(shù)量。通過放大、拍照、計數(shù)等方式準(zhǔn)確獲取菌落的數(shù)量。有些高性能的菌落計數(shù)器還可直接連接電腦來完成自動計數(shù)的操作,方便快捷的計數(shù)。
7、微波爐/電爐
它主要用于溶液的快速加熱,微生物固體培養(yǎng)基的加熱熔化。
8、高壓滅菌鍋
微生物學(xué)所用到的大部分實驗物品、培養(yǎng)基、試劑都應(yīng)嚴(yán)格通過消毒滅菌。滅菌鍋也有不同的大小型號,有些是手動的,有些是全自動的。用戶就要根據(jù)自己的需要選購。
9、移液器
它是用于精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒、微量取液器、移液管、刻度試管、燒杯等。
10、冰箱
冰箱是實驗室中保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學(xué)實驗中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負(fù)20度保存,實驗人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當(dāng)?shù)臏囟认卤4妗?/span>
具體來說,不同溫度下保存的物品如下:
a.4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。
b.-20℃適用于某些試劑、藥品、配好的抗生素等。
c.-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態(tài)等的保存。
11、生物安全柜
微生物實驗中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的,對于操作人員來說傷害比較大。為了防止有害的懸浮微粒、氣溶膠的擴散,可以利用生物安全柜對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全的保護(hù)作用。
12、搖床
搖床是實驗室比較常用的一種儀器,在微生物實驗操作過程中,液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時需要在特定溫度下振蕩使用。
13、純水裝置
純水裝置包括純水機和蒸餾水器。蒸餾水器的價格比較便宜,但在造水過程中需要有人值守;純水機價格高些,但是使用方便,可以儲存一定量的純水。純水的使用也有不同級別,實驗中配制試劑,配制培養(yǎng)基均都需用純水。
14、生物顯微鏡
由于微生物的體積比較小,所以在觀察時需要借助生物顯微鏡。生物顯微鏡主要用于微生物和微小物品結(jié)構(gòu)和形態(tài)等方面的觀察。
15、冷凍干燥機
主要適用于細(xì)菌、微生物、酵母等的干燥作用。用于干燥保存易脫水的產(chǎn)品,在加水以后能夠再次恢復(fù)原材料的特性,不影響其生物活性。通過冷凍干燥,細(xì)菌之類的材料成為干燥狀態(tài),從而不會發(fā)生化學(xué)改變。
16、分光光度計
分光光度計在微生物試驗中用于測定微生物懸液的濃度,可以正確選取合適的培養(yǎng)時間。一般是在600nm波長測定菌液濃度。
17、恒溫箱
用于恒溫條件下培養(yǎng)微生物。恒溫箱的調(diào)溫范圍一般為20~45℃之間。培養(yǎng)酵母菌和霉菌時,一般可調(diào)至28℃,培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌時,可根據(jù)菌種的生長溫度進(jìn)行調(diào)溫,一般為30~37℃。
18、電烘箱(干燥箱)
用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌。電烘箱的調(diào)溫的范圍一般為40~180℃,對玻璃器皿等物進(jìn)行滅菌時,可將溫度調(diào)至160℃,滅菌4小時,即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢后,在電烘箱溫度還沒有降到50~70℃以前,不要打開電烘箱,以免器皿破裂。
19、恒溫水浴鍋
水浴鍋是一種控溫裝置,水浴控溫對于樣品來說比較快速且接觸充分。有些微生物反應(yīng)需要在37度,42度,56度下水浴進(jìn)行,所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度。
20、酸度計
用于配制試劑時精確測量pH值,從而保證配制的溶液的精確性。有時也需要利用pH計測定樣品溶液的酸堿度。
21、離心機
用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機有冷凍和常溫之分。有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定,需要低溫環(huán)境,要視樣品的種類而定。
離心機清洗要求:在離心機內(nèi)腔,設(shè)置多個清洗頭或清洗管,離心機可在不開蓋或運轉(zhuǎn)過程中對離心機內(nèi)部進(jìn)行清洗。
重點有以下幾個部位:①轉(zhuǎn)鼓底面及軸承座部位的清洗;②攔液板表面及轉(zhuǎn)鼓筒體外表面;③轉(zhuǎn)鼓筒體內(nèi)表面;④翻蓋內(nèi)表面及進(jìn)料、刮刀等裝置表面;⑤外殼內(nèi)表面。
離心機維護(hù)規(guī)則:
(1)一次規(guī)則
當(dāng)系統(tǒng)出了故障,你可以試探性地改變某些狀態(tài),一次可以改變一個參數(shù)。做一些簡單的改變步驟,也許就能解決問題。
(2)二次比較規(guī)則
在動手檢修之前已經(jīng)明確了故障所在,或者已經(jīng)確定了解決故障的方案。換句話說,動手之前已經(jīng)找對了解決辦法。例如,在進(jìn)樣過程中發(fā)現(xiàn)內(nèi)標(biāo)物的峰值變低了,可以重復(fù)進(jìn)樣看看重復(fù)性如何,如果是偶然變低,是否是定量管里進(jìn)了氣泡。這個規(guī)則可用于考察系統(tǒng)改變后的情況。更換了流動向后在正式進(jìn)樣前可以進(jìn)兩次標(biāo)準(zhǔn)品以檢查保留時間的穩(wěn)定情況和色譜峰的穩(wěn)定性。在梯度洗脫中如果出現(xiàn)了多余的峰,可以空載梯度洗脫一次,用此規(guī)則可以避免不必要的改變,盡快確定糾正措施。
(3)取代規(guī)則
用好的部件換下可疑的部件,是查找故障的最好方法。如果你懷疑檢測器引起了噪音,就換一個性能好的無轉(zhuǎn)子硫化儀檢測器。如果故障被排除了,就說明換下的檢測器有問題。這個規(guī)則應(yīng)用的規(guī)模有大有小,可以從換整個部件到換印刷線路板上的集成塊。
(4)換回規(guī)則
這個規(guī)則和取代規(guī)則一起運用,好部件取代了溶體流動速率測定儀可疑部件后情況并未得到改善,應(yīng)重新?lián)Q上原部件。這樣做的維修費用最小,也防止了用過的部件積壓下來無轉(zhuǎn)子硫化儀。這條規(guī)則僅適用于單一的故障。
換回原則不適用于以下的情況:
①在取下時新部件已損壞(如泵密封墊圈);
②部件價格低(如柱內(nèi)襯過濾片);
③重新裝上原部件要冒損壞的風(fēng)險;
④定期更換的部件。
22、液氮罐
液氮罐儲存液氮,可用于細(xì)菌、酵母、霉菌和大型真菌等各種微生物的長期保存。
23、接種針
用于接種和分離微生物。根據(jù)不同用途做成針狀、環(huán)狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金(細(xì)電爐絲)制成,長約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管制成,長約20厘米。將針頭燒結(jié)在針柄上即成。
24、酒精燈
用于接種時對接種工具進(jìn)行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高,應(yīng)利用這一最高溫度區(qū)燒灼接種針或試管口。
25、均質(zhì)器
均質(zhì)器使樣品處理過程中不可缺少的設(shè)備。常用的均質(zhì)器主要是旋轉(zhuǎn)均質(zhì)器和拍擊式均質(zhì)器。旋轉(zhuǎn)式均質(zhì)器是靠旋轉(zhuǎn)的刀片將均質(zhì)杯中的樣品打碎。缺點是每次均質(zhì)都要更換刀片和均質(zhì)杯,樣品易受到污染,均質(zhì)過程中容易產(chǎn)生熱量使樣品中的微生物受損。拍擊式均質(zhì)器使用無菌均質(zhì)袋,拍擊的機械裝置作用在均質(zhì)袋上,不和樣品直接接觸,因此不會受污染。拍擊式均質(zhì)器由于使用方便,不易受污染,使用越來越廣泛。但其缺點是均質(zhì)的力量不足,對于堅硬的樣品不但無法均質(zhì)均勻,還會引起均質(zhì)袋的破損。
使用注意事項:
(1)使用前先將電源插頭固定牢靠后,再打開機器開關(guān)。插頭不能使其出現(xiàn)松動,因為機器工作時會產(chǎn)生振動導(dǎo)致插頭脫落。這種突然短點對機器會造成損傷。
(2)均質(zhì)器工作時不準(zhǔn)隨便打開均質(zhì)器門,防止樣液飛濺(有的均質(zhì)器打開門以后自動停止拍擊均質(zhì)),一定要先關(guān)機器再開門,然后同樣關(guān)閉門之后再開機。
(3)使用均質(zhì)器之前,一定要檢查均質(zhì)器內(nèi)是否有異物,防止損傷機械裝置或均質(zhì)袋。
(4)堅硬樣品,盡量不要用拍打式均質(zhì)器,防止均質(zhì)袋破裂,冷凍樣品需緩化解凍以后才能使用拍擊式均質(zhì)器。當(dāng)一定要拍打堅硬樣品時,最好加套均質(zhì)袋。
(5)均質(zhì)器的底部是空的,如遇均質(zhì)袋意外破裂時,方便清理溢出物。
(6)均質(zhì)器和均質(zhì)袋放置在陰涼干燥處,特別是均質(zhì)袋應(yīng)避酸堿、避陽光,防止其過早的變脆老化。
(7)均質(zhì)器用完之后,先關(guān)機斷電,然后將其內(nèi)外清理干凈。
(8)對于一些拍打均質(zhì)后,容易堵塞移液管或移液器槍頭的樣品,建議使用帶過濾網(wǎng)的無菌均質(zhì)袋。
26、常用玻璃器皿
①培養(yǎng)皿(平皿):用于盛放固體培養(yǎng)基,是培養(yǎng)微生物和觀察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米?筛鶕(jù)活動規(guī)模準(zhǔn)備若干個。
②試管:用于盛放斜面培養(yǎng)基(固體),是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長220毫米,直徑20毫米;較小的長150毫米,直徑15毫米?筛鶕(jù)需要選用其中一種并準(zhǔn)備若干個。
③錐形瓶:用于盛放液體培養(yǎng)基。是用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升?筛鶕(jù)活動需要選擇和準(zhǔn)備。
④量筒、量杯:用于定量量取各種液體。
⑤移液管(吸管):一般容量為0.5、1、5、10毫升等,可根據(jù)需要選擇和準(zhǔn)備。