手機(jī)版
（一）能力驗(yàn)證樣品接收及準(zhǔn)備
1.操作前仔細(xì)閱讀參指導(dǎo)書，關(guān)鍵是小的備注要注意，很多特殊情況的處理大都在備注里。
2.樣品接收前的檢查很重要，首先對樣品的完整性進(jìn)行檢查，對信息的閱讀要全面，如果發(fā)現(xiàn)樣品有問題及時(shí)溝通，這樣要比做樣品的時(shí)候在發(fā)現(xiàn)來的要及時(shí)，能節(jié)省不少的時(shí)間。
3.作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位，很多能力驗(yàn)證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書，作業(yè)指導(dǎo)書中往往會(huì)對本次能力驗(yàn)證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項(xiàng)等有明確的規(guī)定，熟讀這些對試驗(yàn)準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會(huì)要求將試驗(yàn)后樣品一塊寄發(fā)組織單位，有的實(shí)驗(yàn)室如果不仔細(xì)閱讀的話很容易將測試后樣品立即處理掉，如果寄樣時(shí)再看見可就完了。
4.測試前的準(zhǔn)備工作一定要做好，包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運(yùn)行等，有條件的情況下可以在正式測試前選擇一塊相仿的樣品進(jìn)行一下預(yù)測試，這樣會(huì)將測試過程中的問題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對正式測試的操作有幫助。
（二）能力驗(yàn)證樣品預(yù)處理
1.樣品測試過程中的判斷能力很重要，有時(shí)候我們在測試中往往會(huì)自以為是，為了保證測試過程中的準(zhǔn)確操作最好是找一個(gè)經(jīng)驗(yàn)豐富的作督察，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)解決，如果等操作完畢再發(fā)現(xiàn)問題的話可能會(huì)因?yàn)闃悠返南亩鵁o法驗(yàn)證結(jié)果。
2.定量項(xiàng)目，西林瓶內(nèi)樣品不可分割，應(yīng)全部用于檢測。一般參考書指導(dǎo)的是加40mL稀釋液制成40mL樣品。
3.定量項(xiàng)目樣品稀釋。指導(dǎo)書標(biāo)明了稀釋范圍的，在稀釋范圍左右各加1個(gè)稀釋度進(jìn)行；書上沒有稀釋范圍的，多做稀釋倍數(shù)，選擇合適的稀釋倍數(shù)計(jì)數(shù)（一般可稀釋至10-8）。
4.定量項(xiàng)目，除了要多做稀釋倍數(shù)外，同時(shí)同一稀釋度要多倒幾皿，從原理上來講，檢測過程屬于隨機(jī)抽樣檢查，平板越多，數(shù)據(jù)越接近真值。考慮性價(jià)比，又不可能一直瘋狂一個(gè)稀釋度很多平板，所以能力驗(yàn)證時(shí)候多倒幾皿，求好結(jié)果。
5.定性項(xiàng)目有一些重要步驟：
a.增菌及分離步驟尤其重要。選擇合適的增菌液和分離用培養(yǎng)基對目標(biāo)菌的檢出非常關(guān)鍵，選擇兩種以上的增菌液和分離用培養(yǎng)基對菌株作直接分離和增菌后分離。
b.劃線分離十分重要，要把增菌液中的目標(biāo)菌盡量多的表達(dá)出來，要分出單個(gè)菌落并盡可能多挑取可疑菌落，確保分離到目標(biāo)菌。
c.生化試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)以營養(yǎng)瓊脂平板上的純培養(yǎng)細(xì)菌為好。
（三）實(shí)驗(yàn)過程一定要做陰陽對照
陽性對照，是在試驗(yàn)中，檢驗(yàn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合，如果在實(shí)驗(yàn)中，陽性實(shí)驗(yàn)沒有生長的話，那這個(gè)實(shí)驗(yàn)是失敗的。陰性對照主要是檢測培養(yǎng)基是否污染，在沒有加入任何東西培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會(huì)顯示陽性結(jié)果，這就說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，染菌了，這樣也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的。
（四）培養(yǎng)基方面需要注意地方
1.培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌
正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝�，再加入剩余水量，混勻后滅菌或分裝。
一定要用震蕩器充分混勻水化液，作為檢測原液，普通手搖混勻與經(jīng)震蕩器混勻的樣品液，計(jì)數(shù)結(jié)果相差較大。混勻后的樣品嚴(yán)格按照指導(dǎo)書規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行檢驗(yàn)。
2.混菌法倒皿要充分混勻
培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈（混勻速度一定要慢，目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染），找較水平位置冷卻凝固。
3.培養(yǎng)基要不要覆蓋問題
覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動(dòng)，造成片狀生長，無法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對于不運(yùn)動(dòng)的菌，可以不覆蓋，對于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。
（五）結(jié)果判斷
結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作，但是對于人為操作如評級、手工操作等結(jié)果可能會(huì)因?yàn)槿藛T的差別而會(huì)有不同的偏差，這樣在判定時(shí)最好是找有經(jīng)驗(yàn)的部門負(fù)責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪，這樣的話會(huì)減少很多不必要的錯(cuò)誤。
1.操作前仔細(xì)閱讀參指導(dǎo)書，關(guān)鍵是小的備注要注意，很多特殊情況的處理大都在備注里。
2.樣品接收前的檢查很重要，首先對樣品的完整性進(jìn)行檢查，對信息的閱讀要全面，如果發(fā)現(xiàn)樣品有問題及時(shí)溝通，這樣要比做樣品的時(shí)候在發(fā)現(xiàn)來的要及時(shí)，能節(jié)省不少的時(shí)間。
3.作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位，很多能力驗(yàn)證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書，作業(yè)指導(dǎo)書中往往會(huì)對本次能力驗(yàn)證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項(xiàng)等有明確的規(guī)定，熟讀這些對試驗(yàn)準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會(huì)要求將試驗(yàn)后樣品一塊寄發(fā)組織單位，有的實(shí)驗(yàn)室如果不仔細(xì)閱讀的話很容易將測試后樣品立即處理掉，如果寄樣時(shí)再看見可就完了。
4.測試前的準(zhǔn)備工作一定要做好，包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運(yùn)行等，有條件的情況下可以在正式測試前選擇一塊相仿的樣品進(jìn)行一下預(yù)測試，這樣會(huì)將測試過程中的問題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對正式測試的操作有幫助。
（二）能力驗(yàn)證樣品預(yù)處理
1.樣品測試過程中的判斷能力很重要，有時(shí)候我們在測試中往往會(huì)自以為是，為了保證測試過程中的準(zhǔn)確操作最好是找一個(gè)經(jīng)驗(yàn)豐富的作督察，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)解決，如果等操作完畢再發(fā)現(xiàn)問題的話可能會(huì)因?yàn)闃悠返南亩鵁o法驗(yàn)證結(jié)果。
2.定量項(xiàng)目，西林瓶內(nèi)樣品不可分割，應(yīng)全部用于檢測。一般參考書指導(dǎo)的是加40mL稀釋液制成40mL樣品。
3.定量項(xiàng)目樣品稀釋。指導(dǎo)書標(biāo)明了稀釋范圍的，在稀釋范圍左右各加1個(gè)稀釋度進(jìn)行；書上沒有稀釋范圍的，多做稀釋倍數(shù)，選擇合適的稀釋倍數(shù)計(jì)數(shù)（一般可稀釋至10-8）。
4.定量項(xiàng)目，除了要多做稀釋倍數(shù)外，同時(shí)同一稀釋度要多倒幾皿，從原理上來講，檢測過程屬于隨機(jī)抽樣檢查，平板越多，數(shù)據(jù)越接近真值。考慮性價(jià)比，又不可能一直瘋狂一個(gè)稀釋度很多平板，所以能力驗(yàn)證時(shí)候多倒幾皿，求好結(jié)果。
5.定性項(xiàng)目有一些重要步驟：
a.增菌及分離步驟尤其重要。選擇合適的增菌液和分離用培養(yǎng)基對目標(biāo)菌的檢出非常關(guān)鍵，選擇兩種以上的增菌液和分離用培養(yǎng)基對菌株作直接分離和增菌后分離。
b.劃線分離十分重要，要把增菌液中的目標(biāo)菌盡量多的表達(dá)出來，要分出單個(gè)菌落并盡可能多挑取可疑菌落，確保分離到目標(biāo)菌。
c.生化試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)以營養(yǎng)瓊脂平板上的純培養(yǎng)細(xì)菌為好。
（三）實(shí)驗(yàn)過程一定要做陰陽對照
陽性對照，是在試驗(yàn)中，檢驗(yàn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合，如果在實(shí)驗(yàn)中，陽性實(shí)驗(yàn)沒有生長的話，那這個(gè)實(shí)驗(yàn)是失敗的。陰性對照主要是檢測培養(yǎng)基是否污染，在沒有加入任何東西培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會(huì)顯示陽性結(jié)果，這就說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，染菌了，這樣也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的。
（四）培養(yǎng)基方面需要注意地方
1.培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌
正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝�，再加入剩余水量，混勻后滅菌或分裝。
一定要用震蕩器充分混勻水化液，作為檢測原液，普通手搖混勻與經(jīng)震蕩器混勻的樣品液，計(jì)數(shù)結(jié)果相差較大。混勻后的樣品嚴(yán)格按照指導(dǎo)書規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行檢驗(yàn)。
2.混菌法倒皿要充分混勻
培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈（混勻速度一定要慢，目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染），找較水平位置冷卻凝固。
3.培養(yǎng)基要不要覆蓋問題
覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動(dòng)，造成片狀生長，無法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對于不運(yùn)動(dòng)的菌，可以不覆蓋，對于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。
（五）結(jié)果判斷
結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作，但是對于人為操作如評級、手工操作等結(jié)果可能會(huì)因?yàn)槿藛T的差別而會(huì)有不同的偏差，這樣在判定時(shí)最好是找有經(jīng)驗(yàn)的部門負(fù)責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪，這樣的話會(huì)減少很多不必要的錯(cuò)誤。
