I）分析方法驗證的基本內容

分析方法驗證的基本內容包括方案的起草及審批，檢測儀器的確認。

適用性驗證（包括準確度試驗、精密度測定、線性范圍試驗、專屬性試驗等）和結果評價及批準四個的方面。

II）分析方法驗證的基本步驟

首先是制定驗證方案，然后對大型精密儀器進行確認，最關鍵的一步是檢驗方法的適用性試驗，最后是檢驗方法評價及批準。

1.驗證方案的制定

檢驗方法的驗證方案通常由質量驗證小組提出。根據(jù)產品的工藝條件、原輔料化學結構、中間體、分解產物查閱有關資料，提出規(guī)格標準，確定檢查項目，規(guī)定雜質限度，即為質量標準草案。

根據(jù)質量標準草案確定檢查和試驗范圍，對檢驗方法擬定具體操作步驟，最后經有關人員審批方可實施。

2.大型精密儀器的確認

分析測試中所用的檢測儀器一般可分為三類：

A、普通儀器：崩解儀，折光儀、分析天平、酸度計、溶點測定儀、電導儀等；

B、較精密儀器：旋光儀、永停滴定儀、費休氏水分測定儀、 自動滴定儀、藥物溶出度儀、可見分光光度計、電泳儀等；

C、大型精密儀器：紫外分光光度計、紅外分光光度計、氣相色譜儀、高效液相色譜儀、薄層掃描儀等。

為了保證分析測試數(shù)據(jù)準確可靠，每臺檢測儀器在投入正式使用之前都應進行確認。

檢測儀器的確認是檢驗方法驗證的基礎，應在其它驗證試驗開始之前首先完成。

檢測儀器確認工作內容應根據(jù)儀器類型。技術性能而定，通常包括：安裝確認、校正、適用性預試驗和再確認。

3.校正

校正是儀器確認及檢驗方法驗證中的一個重要環(huán)節(jié)，應當在驗證試驗以前進行校正。紫外分光光度計校正包括波長校正、吸收度測試、準確度測試、雜散光檢查。

氣相色譜儀與高效液相色譜儀均要求做系統(tǒng)適用性試驗。在規(guī)定的色譜條件下測定色譜柱的最小理論塔板數(shù)。分離度和拖尾因子，并規(guī)定變異系數(shù)應不大于2％。

對于化學檢驗中使用的計量儀器包括容量瓶、移液管、滴定管、分析天平亦均應校正。

4.適用性預試驗

儀器的安裝確認完成以后，在其功能試驗符合要求的情況下，應用標準品或對照品對其進行適用性檢查，以確認儀器是否符合使用要求。

例如對熔點測定儀的適用性預試驗是采用已知溶點的甲硝唑做試驗，測試結果與已知熔點比較。

紫外分光光度計可用已知含量的某標準品試驗，測得結果與已知數(shù)值對比，確定儀器是否符合使用要求。

在完成上述各項試驗工作的同時，應做好相應的文件記錄等資料歸檔工作，每一臺儀器均應有一套完整的檔案資料。

5.再確認

為了確保儀器處于良好的使用狀態(tài)，對于一臺新購買的儀器在確認工作結束以后，應根據(jù)儀器的類別。確認的經驗制定再確認的計劃。

再確認的時間間隔和內容要根據(jù)儀器類別和使用情況決定，一般是3個月、6個月或1年。

儀器再確認的內容通常包括線路連接、附件備品消耗檢查、清潔工作、功能試驗、工作日記等，其中重點安裝確認中的功能試驗。

III）分析方法的適用性驗證

藥品質量標準分析方法驗證的目的是證明采用的方法適合于相應的檢測要求。

在起草藥品質量標準時，分析方法需經驗證：在藥物生產方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進行修訂時，則質量標準分析方法也需進行驗證。

方法驗證過程和結果均應記載在藥品標準起草或修訂說明中。

根據(jù)《中國藥典》附錄XIXA的原則要求，檢驗方法的驗證可分為三種情況處理。

1.無需驗證的方法。如藥典(包括USP、EP、CP、JP等各國藥典)的方法，一般只做系統(tǒng)適用性試驗，以確認系統(tǒng)是否符合要求(主要指儀器穩(wěn)定性及柱的分離度是否達標)。

2.對比法。已在參比實驗室驗證過的分析方法，可用對比試驗的方法來確認方法的可靠性，即將本實驗室與參比實驗室用同一方法對同批樣品所測數(shù)據(jù)進行比較(如至少取五個批號，每批重復測定五次)，判斷方法在本實驗室的可行性。

如有差異需查明原因或設計方案，對方法進行再驗證。

3.需進行系統(tǒng)驗證的方法。

IV）分析方法的評價及批準

安裝確認及適用性試驗結束后，應將試驗數(shù)據(jù)資料進行匯總分析。對檢驗方法作出正確的評價，驗證報告的說明及結論部分應簡明扼要。

試驗中的主要偏差應有適當解釋。然后，報主管領導審批。檢驗方法驗證的最終產物是一個經過驗證的方法—根據(jù)驗證的結果制訂的由有關領導批準的檢驗方法。