水體污染慢性甲基汞中毒是長期食用被汞（甲基汞）污染水體的魚貝類食物，造成體內(nèi)甲基汞蓄積并超過一定閾值引起以神經(jīng)系統(tǒng)損傷為主的中毒表現(xiàn)。

    為了對水體汞（甲基汞）污染所引起的健康危害進行科學評價，統(tǒng)一診斷標準，以推動防治和污染治理工作，特制定本標準。

1 診斷原則

    根據(jù)水體汞污染水平、食用被汞污染的魚貝類食物的歷史、體內(nèi)汞蓄積狀況、以及臨床表現(xiàn)和化驗資料，進行綜合分析，排除其他疾病，方可診斷。

2 診斷及分級

2.1甲基汞吸收

    頭發(fā)中總汞值超過10μg/g，其中甲基汞值超過5μg/g者。

2.2觀察對象

    在汞吸收的基礎上，出現(xiàn)下列三項體征當中的1～2項陽性體征者。

a.四肢周圍型（手套、襪套型）感覺減退。

b.向心性視野縮小15～30度。

c.高頻部感音神經(jīng)性聽力減退11～30dB。

2.3慢性甲基汞中毒

    在汞吸收的基礎上，具有下列a、b、c三項體征者，可診斷為慢性甲基汞中毒。

a.四肢周圍型（手套、襪套型）感覺減退。

b.向心性視野縮小15～30度，或有顳側(cè)月芽狀缺損到30度者。

c.高頻部感音神經(jīng)性聽力減退l1～30dB。

d.具有上述三項體征，但發(fā)汞低于10μg/g以下時，可做驅(qū)汞試驗，驅(qū)汞后尿中總汞值超過20μg/L,其中甲基汞超過10μg/L者，方可診斷。

3 處理原則

    禁止食用被甲基汞污染水體的魚貝類食物。

3.1 甲基汞吸收

    定期檢查發(fā)汞。

3.2 觀察對象

    定期復查。

3.3 慢性甲基汞中毒

    適當休息、驅(qū)汞治療、定期復查。

 A.1詢問：四肢遠端麻木感、頭痛、頭暈、無力、健忘、睡眠障礙、流涎、多浮等，以及有無其他中毒史和其他神經(jīng)病史。

    A.2痛覺：按目前普遍應用的針刺法，在兩側(cè)肢體相應部位上對比檢查，由遠端向近端檢查，讓受檢者回答有無痛覺減退。

    A.3溫度覺：用金屬管分別盛10～15℃水測冷覺；用金屬管盛50～55℃水測熱覺。進行兩側(cè)肢體遠端、近端對比檢查，讓受檢者區(qū)別涼熱程度。

    A.4觸覺：用棉絮進行兩側(cè)肢體遠端、近端對比檢查，讓受檢者回答有無觸覺減退。

    A.5振動覺：以C 128振的音叉進行雙側(cè)遠端、近端對比檢查，讓受檢者回答振動感的程度。

    A.6小腦功能檢查：檢查構(gòu)音、眼球震顫、走直線、昂白(Romberg′s）氏征、指鼻、輪替及跟膝脛試驗等。

    A.7 有條件可檢查肌電、神經(jīng)傳導速度等。

附錄B視野檢查法（補充件）

B.1儀器

    用光點投射視野計或330mm半徑的弓形視野計。視標3～5mm白色視標。

B.2 方法步驟 
    a.用光點投射視野計檢查,在暗室進行,用弓形視野計時,爭取在固定人工照明下進行。受檢者將下頜置于視野計頦架上遮蓋一眼，分別檢查。 
    b.用3～5mm白視標分別檢查8～12個方位。 
    c.記錄于視野紙上，以備判斷。

B.3 注意事項 
    a.視野檢查背景光應為“明適應”狀態(tài),選用30lx左右,視標光斑亮度約為背景光的一倍。
    b.視野首選3mm直徑。如果視野已表現(xiàn)為較重的向心性縮小，可收用5或10mm的視標重查。此時可能只呈現(xiàn)顳側(cè)月芽狀缺損（表明矩狀裂前端病變較重），有助于對本病的診斷。
    c.檢查視野的各項條件，在各次檢查中統(tǒng)一標準。
    d.檢查時視標由里向外或由外向里移動，其結(jié)果相差在10度以內(nèi)者，則取用多次所在點位，如果相差在10度以上者，應考慮為視標移動太快或病人反應遲鈍，有待追隨復查。
    e.有瞼下垂或上瞼皮膚松弛影響檢查結(jié)果時，應協(xié)助處理后再行檢查。

B.4 其他

    a.在有條件情況下，對視野明顯缺損者，建議做ERG，暗適應等。
    b.為了解視皮質(zhì)功能狀態(tài)，建議用VEP�！�

C.1測聽儀器

    純音聽力計。

C.2方法

    a.檢查外耳及中耳情況，以排除傳音性聾。詳細詢問病史，排除其他原因所致的感音神經(jīng)性聾。

    b.在隔音條件下分別檢測兩耳聽閾，先測氣導，后測骨導，檢測時，以5dB為一檔，檢測骨時必須加適量噪聲遮蓋。

    c.有條件可查語言測聽的最大清晰度（PB_max），Bekesy測聽、聲阻抗測聽和耳蝸電圖及腦干電測聽。

C.3記錄方法

    檢查結(jié)果按全國通用符號標記。右耳氣導符號為“O”左耳為“x”。右耳骨導符號為“[”，  左耳為“]”。氣導以實線相聯(lián)，骨導以虛線相聯(lián)，制成聽力曲線。

C.4 檢查標準

    慢性甲基汞中毒引起的聽力損失在高頻部（2、4、6、8 kHz），高頻部平均損失11～30dB為輕度；31～60dB為中度；61～90dB為重度； 91dB以上為全聾�！�

D.1原理

    汞蒸氣對波長253.7nm的紫外光具有強烈的吸收作用，試樣經(jīng)適當處理后，將各種形態(tài)的汞轉(zhuǎn)變成汞離子，用氯化亞錫將汞離子還原成元素汞，再用測汞儀進行測定，汞濃度與吸收值成正比。

D.2方法一

    加氧燃燒-冷原子吸收法。

D.2.1儀器

    a.測汞儀（F732型系列）。

    b.管式電爐。

    D.2.2試劑

D.2.2.1 30％氯化亞錫：取30g氯化亞錫（SnCl₂·2H₂O）溶于100ml 1N硫酸溶液中，或加10ml濃鹽酸，溶解后用去離子水稀釋至100ml（發(fā)黃的氯化亞錫不能用）。

D.2.2.2吸收液：2％高錳酸鉀溶液和10％硫酸溶液，臨用時等體積混合。

D.2.2.3汞標準液：
    a.汞標準貯備液：稱取二氯化汞（分析純）0.1354g，用1N硫酸溶解并稀釋至100ml。此溶液1.00ml等于1.00mg汞。
    b.汞標準使用液：用1N硫酸把貯備液稀釋成1.00ml含有0.10μg汞。此溶液使用前配制。

D.2.3分析步驟

    D.2.3.1樣品處理：準確稱取處理好的發(fā)樣0.1～0.2g置于石英舟中（上蓋一小塊濾紙），將石英舟放入管式電爐的石英管里，石英管的一端與氧氣瓶連接，另一端與盛有20ml吸收液的吸收管連接。如下：

    將爐溫控制在750±50℃通氧氣（流速2L/min），分段燃燒3min，樣品中的汞富集于吸收液中，備作測定。 D.2.3.2測定：準確吸取一定體積吸收液（燃燒后的）于汞反應瓶中，加入2m1 30％氯化亞錫溶液后立即塞緊瓶塞，開動循環(huán)泵，讀取最大吸收值，根據(jù)標準曲線求出汞含量。 D.2.4標準曲線的繪制：分別吸取0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml汞標準使用液于汞反應瓶中，配成的標準系列為0.00，0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50μg汞，以1N硫酸溶液稀釋到一定體積，加入2ml 30％氯化亞錫溶液，立即塞緊瓶塞，開動循環(huán)泵，讀取最大吸收值。以吸收值為縱坐標，汞量（μg）為橫坐標，繪制標準曲線，繪制時應減去空白值。

D.2.5計算

    汞（Hg，μg/L）=讀取汞量(μg)×吸收液總體積(ml)/[發(fā)樣重量(g)×測定取試樣溶液體積(ml)……………………(1）

D.2.6注意事項

    a.石英器皿在使用前或測定后必須清洗。

    b.測定時石英管出口及連接部位塞緊，避免漏氣。

D.3 方法二

    三酸混合消解法。

D.3.1儀器

    a.測汞儀（F-732型）。

    b.50ml汞發(fā)生管。

    c.100ml三角瓶。

    d.漏斗。

    e.可調(diào)電爐。

D.3.2試劑

    a.硝酸，優(yōu)級純。

    b.硫酸，優(yōu)級純。

    c.高氯酸，優(yōu)級純。

    d.5％高錳酸鉀溶液：稱取5g優(yōu)級純高錳酸鉀溶于100ml去離子水中。

    e.10％鹽酸羥胺溶液：稱取分析純鹽酸羥胺10g溶于去離子水中，并稀釋至100ml。

    f.30％氯化亞錫溶液：同D.2.2.1。

    g.汞標準溶液:同方法一。

D.3.3分析步驟

    D.3.3.1樣品消化：稱取清洗過的發(fā)樣50mg，放入100ml三角瓶中，同時做空白試驗，加入硝酸5ml。放入一些小玻璃球，三角瓶放在電熱板上加熱5min，加硫酸5ml繼續(xù)加熱10min，再加高氯酸1ml加熱5min取下，冷卻后加入少量去離子水，滴加5％高錳酸鉀呈紫紅色，將此溶液洗入50ml汞發(fā)生管備用。

    D.3.3.2樣品測定：往消化液中加入10％鹽酸羥胺0.25ml，使高錳酸鉀的紫色消失，加入20％氯化亞錫5ml，立刻測定，讀取測得值，從標準曲線上查出汞含量。

D.3.4標準曲線制作

    取0.10μg/ml汞標準使用液0，0.1，0.3，1.0，1.2，1.5，2.0ml。分別置于50ml汞發(fā)生管中，加入少量去離子水，然后加入5ml硫酸，1滴高錳酸鉀，用去離子水稀釋到50ml，加入10％鹽酸羥胺0.25ml，使高錳酸鉀的紫色消失，加入5ml 20％氯化亞錫，進行測定。以測得值為縱坐標，汞含量為橫坐標，制備標準曲線。

D.3.5 計算

    總汞(μg/g)=查出的汞含量(μg)/樣品重量(g)…………………………………(2)

D.3.6 注意事項

    D.3.6.1 硝酸加入樣品后,加熱溫度控制在130℃以下,使反應緩慢進行,加入硫酸、高氯酸后，消化溫度控制在250℃左右，以二氧化硫白煙產(chǎn)生為消化終點，立刻取下，否則會造成汞損失。

    D.3.6.2 注意玻璃容器對汞的吸收。所有的玻璃容器，特別是新用的玻璃容器，使用前用熱高錳酸鉀-硫酸溶液洗二次，再用去離子水沖洗干凈。　

附錄E頭發(fā)及尿中甲基汞含量的測定方法（補充件）

E.1 原理

    用鹽酸浸提出樣品中的甲基汞，在pH=3條件下，經(jīng)疏基棉富集，用2N鹽酸解析，以苯萃取。采用氣相色譜儀測定苯萃取液中的甲基汞。 E.2 儀器和試劑

E.2.1 儀器

    a.氣相色譜儀：具電子捕獲檢測器。

    b.疏基棉管：自制，內(nèi)徑8～10mm玻璃管，長10～15cm，一端拉細，一端平口。

E.2.2 試劑

    a.苯：優(yōu)級純，色譜圖上無干擾氯化甲基汞的雜峰。

    b.鹽酸；優(yōu)級純。

    c .氯化甲基汞標準溶液。

    d.巰基棉：取50ml硫代乙醇酸（HS－CH₂COOH），加入35ml乙酸酐，16ml 36％乙酸，0.15ml濃硫酸，5ml去離子水于具塞三角燒瓶中混勻。加入15g脫脂棉浸透，加塞放在37～39℃的烘箱中烘四天，取出用蒸餾水洗至中性，擠掉水分后攤在瓷盤上，置于39℃烘箱中烘干（注意避免污染）,成品保存于棕色廣口瓶中備用。新制備的疏基棉需用甲基汞標樣進行回收率實驗，回收率在95％以上者方可應用。

    e.硫酸銅溶液：溶解50g CuSO₄·5H₂0于200ml去離子水中。

E.3:操作步驟

E.3.1樣品提取

    E.3.1.1頭發(fā)：準確稱取經(jīng)過清洗的發(fā)樣0.1～0.5g，放人20ml離心管中，加入5m1 2N鹽酸，浸泡過夜，用去離子水稀釋至20ml左右，投入1～2g氯化鈉，將清液傾人分液漏斗中，調(diào)節(jié)pH＝3。以下按濃縮步驟進行。

    E.3.1.2人尿：取尿樣50～100ml于分液漏斗中，用濃鹽酸酸化至1N，加入幾滴硫酸銅溶液，10min后用氫氧化鈉溶液和稀鹽酸調(diào)節(jié)pH=3，以下操作按濃縮步驟進行。

E.3.2濃縮

    在分液漏斗下端接上巰基棉管，令提取液通過巰基棉并以每分鐘40滴的速度流出。流完后用蒸餾水沖洗分液漏斗管壁。最后用二聯(lián)球加壓吹出最后一滴。

    取下巰基棉管。將其放在具塞比色管上，加入2ml 2N鹽酸，令其自然流下，用玻璃棒擠凈殘存酸液。

    準確取1ml純苯，加入上述比色管中，振搖3min，以萃取鹽酸中的甲基汞，待分層后即可取上層苯液進行色譜測定。

E.4 色譜條件

    a.固定液：國產(chǎn)7％丁二酸乙二醇聚酯或7％PEG-20M。

    b.擔體：上試201酸洗紅色擔體（預涂5％NaCl）或Chromosorb W 60～80目。

    c.色譜柱：1m×4mm不銹鋼柱或玻璃柱。

    d.柱溫:165～170℃。

    e.檢測器溫度：175～180℃。

    f.氣化室溫度：210℃。

    g.出口溫度：150℃。

    h.載氣：高純氮，流速70mL/min。

E.5 結(jié)果計算

    甲基汞（μg/g或μg/L）=標準甲基汞量（μg）×樣品峰高（mm）×萃取液總體積（mL）/[標準峰高（mm）×進樣體積（ml）×發(fā)樣重量（g）或尿樣體積（L）]　

附錄F尿中總汞含量的測定方法（補充件）

F.1 原理

    在堿性溶液中鎘離子催化下，尿中各種形態(tài)的汞能迅速地被氯化亞錫還原為元素汞，用測汞儀測定其總汞含量。

E.2 儀器 測汞儀： F732型，附帶10～15ml翻泡瓶。

F.3 試劑

    a. 30％氫氧化鈉溶液（優(yōu)級純）。

    b. 氯化亞錫。硫酸鋼鎘度劑:取氯化亞錫（分析純）10g，加鹽酸（優(yōu)級純）5m1，溶解后加去離子水至20ml，加入硫酸鎘（分析純）1.6g。臨用前配制。

    c. 抗泡劑：磷酸三丁酯或滅泡劑（天津助劑廠）。

    d. 2％L-半胱胺酸溶液。

    e. 汞標準液：1m1含0.1g汞（Hg²⁺）。

F.4測定

    吸取尿樣5-10ml于翻泡瓶中，加30％氫氧化鈉2ml，2％L-半胱胺酸0.25m1，抗泡劑1～2滴，氯化亞錫-硫酸銅試劑1m1，立即塞緊瓶塞，開動循環(huán)泵，讀取最大吸收值。

F.5標準曲線制作

    取汞標準液（0～0.15μgHg²⁺），按上述測定方法，測定其吸收值，以汞標準液濃度為橫坐標，吸收值為縱坐標，繪出標準曲線。

F.6 結(jié)果計算

    尿汞含量（μg/L）=相當于標準液汞的微克數(shù)/尿樣量(L)

G.1本標準的使用范圍

    凡長期大量食用被汞污染水體的魚貝類食物者，可按本標準診斷及處理。

G.2幾點說明

G.2.1慢性甲基汞中毒診斷，應由省級以上的專門診斷組織進行。

G.2.2長期大量食用汞污染魚

    長期是指經(jīng)常食用汞污染魚達半年以上。大量是指平均每天食用汞污染魚500g以上。汞污染魚是指在汞污染水體中的魚貝類汞含量超過我國食品衛(wèi)生標準規(guī)定0.3μg/g。

G.2.3驅(qū)汞試驗

    用5％二巰基內(nèi)磺酸鈉5ml一次肌肉注射后，收集24h尿量，測尿中總汞及甲基汞含量。

G.2.4采發(fā)樣部位及清洗方法

    采取后發(fā)際貼頭皮的頭發(fā)。

    發(fā)樣清洗：將發(fā)樣置于10％中性洗滌劑中浸泡10min，振搖洗滌后，再依次用自來水、去離子水漂洗，干燥后剪成1～3mm長備用。如果發(fā)樣油脂較多，可將按上述方法清洗后的發(fā)樣，浸泡于乙醚(或丙酮）中，攪拌10min后取出晾干備用。

　

附加說明：

本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出。

本標準由白求恩醫(yī)科大學、哈爾濱醫(yī)科大學負責起草。

本標準由衛(wèi)生部委托白求恩醫(yī)科大學、哈爾濱醫(yī)科大學負責解釋。