1.學(xué)會(huì)植物細(xì)胞、組織的固定、離析和壓片方法,了解并初步掌握制作臨時(shí)玻片和永久玻片的方法。
2.觀察有絲分裂過程中染色體的形態(tài)特征和動(dòng)態(tài)變化過程,著重了解分裂期內(nèi)中、后期染色體變化的特征。
二、實(shí)驗(yàn)原理
植物根尖分生組織的細(xì)胞,依一定的程序有規(guī)律地進(jìn)行著有絲分裂過程,植物種類不同,細(xì)胞周期所需時(shí)間不同。
每天都有分裂高峰時(shí)間,此時(shí)把根尖固定,經(jīng)過染色和壓片,再放置在顯微鏡下進(jìn)行觀察,可以看到大量處于有絲分裂各時(shí)期的細(xì)胞和染色體。
一些植物根尖細(xì)胞的分裂周期(小時(shí))
根尖與莖尖是有絲分裂的高發(fā)部位,根尖由于取材方便,是觀察植物染色體最常用的材料,根尖染色體壓片法,是觀察植物染色體最常用的方法,也是研究染色體組型、染色體分帶、染色體畸變和姊妹染色單體交換的基礎(chǔ)。
如果植物種子難以發(fā)芽,或僅有植株而無種子,也可以用莖尖作為材料。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:植物細(xì)胞分裂周期的長短不盡相同,通常在十到幾十小時(shí)之間,溫度明顯地影響細(xì)胞分裂周期,同時(shí)不同植物有絲分裂高峰時(shí)間不盡相同,洋蔥根尖細(xì)胞以6點(diǎn)到9點(diǎn)分裂相較多。適于取材。
三、實(shí)驗(yàn)材料
大蒜、洋蔥的鱗莖或蠶豆的種子
四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品
1.用具:載玻片,蓋玻片,指管,試劑 瓶,滴瓶,鑷子,解剖針,吸水紙。
2.藥品:無水酒精,冰醋酸,醋酸鈉,改良苯酚品紅。
五、實(shí)驗(yàn)過程
1.材料培養(yǎng)
先剪去洋蔥的老根,然后置于盛有水的燒杯上,等不定根長出2cm時(shí),進(jìn)行預(yù)處理;或?qū)⑿Q豆等種子經(jīng)過吸脹處理24小時(shí)后,平展于鋪有吸水紙的白磁盤中,加入適當(dāng)量的水,于25℃培養(yǎng),待側(cè)根長到2cm進(jìn)行預(yù)處理。
2. 預(yù)處理
預(yù)處理可以降低細(xì)胞質(zhì)的粘度,使染色體縮短分散,防止紡錘體形成,使更多的細(xì)胞處于分裂中期,一般在分裂高峰前把根尖放到藥劑中處理3—4小時(shí)?衫眠M(jìn)行處理的藥劑很多,如秋水仙素、對(duì)二氯苯、8—羥基喹啉等,也可以經(jīng)過低溫處理以達(dá)到同樣的效果,較成功的例子主要是一些禾本科的農(nóng)作物,例如:小麥、黑麥、大麥用1~4℃,水稻和玉米用6~8℃,均獲得較好的效果。處理方法是將活體或切取根尖侵入自來水或蒸餾水中,放置在冰箱中合適的溫度層處理20—40小時(shí)。在野外或無冰箱條件下,可在保溫瓶中裝一些冰塊做低溫處理。
處理時(shí)機(jī):當(dāng)根尖長到1.5cm~2cm左右時(shí)進(jìn)行處理,此時(shí)分裂相較多,制片效果好。