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      實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制注意事項(xiàng)和常見問題解答!

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-03-10
      核心提示:標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn)是實(shí)際操作中最大的難點(diǎn),也是工作中誤區(qū)和爭議最多的話題了!先來了解下最重要的檢驗(yàn)項(xiàng)目:1.精密度檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線

      標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn)是實(shí)際操作中最大的難點(diǎn),也是工作中誤區(qū)和爭議最多的話題了!

       

      先來了解下最重要的檢驗(yàn)項(xiàng)目:

       

      1.精密度檢驗(yàn)

      標(biāo)準(zhǔn)曲線的精密度檢驗(yàn):精密度檢驗(yàn)就是看試驗(yàn)點(diǎn)距離擬合的直線的距離有無異常,所以也稱線性檢驗(yàn)(擬合檢驗(yàn)),需用F檢驗(yàn),P<0.05作為線性檢驗(yàn)合格的標(biāo)準(zhǔn)。

       

      2.截距檢驗(yàn)&斜率檢驗(yàn)

      標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距檢驗(yàn)和斜率檢驗(yàn)分別考察Y=a+bX中a和b與0的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,a與0有差別說明有試劑空白或系統(tǒng)誤差,而b若與0沒差別說明儀器的靈敏度根本達(dá)不到分析要求。

       

      標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn)應(yīng)該是線性檢驗(yàn)結(jié)合失擬檢驗(yàn),以及殘差的正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)合才是統(tǒng)計(jì)學(xué)上比較完備的。




       

      接下來,我們看看實(shí)驗(yàn)員在標(biāo)準(zhǔn)曲線使用中還遇到過哪些問題?

      圖片

      問題一:標(biāo)準(zhǔn)曲線需要人為的增加(0,0)點(diǎn)嗎?

      答:不能。通常的標(biāo)準(zhǔn)系列多是配制0,1,2,3mg/L系列這樣的說法,沒做實(shí)驗(yàn)人為添加(0,0)很不妥,因?yàn)楹芏鄷r(shí)候0管進(jìn)入儀器可能也有響應(yīng)值,這也是我們考察試劑空白的一個(gè)重要步驟。這個(gè)0管在某些時(shí)候非常重要,如,全血鉛測定,我們采用牛血清來基體匹配標(biāo)準(zhǔn)系列,如果此時(shí)你用酸做空白或沒做實(shí)驗(yàn)人為添加(0,0),那你就很難做好標(biāo)準(zhǔn)曲線,所以,標(biāo)準(zhǔn)曲線的0管也是做好標(biāo)準(zhǔn)曲線的重要考慮點(diǎn)。


      問題二:標(biāo)準(zhǔn)曲線需要減掉試劑空白來做嗎?

      答:不需要。儀器測出來標(biāo)準(zhǔn)系列的響應(yīng)值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應(yīng)值來做,工作中我們也常用0管來做儀器調(diào)零。其實(shí)沒有必要那么麻煩,即使空白或0管有響應(yīng)值,在構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),我們已經(jīng)認(rèn)為該響應(yīng)值就是0濃度,也就是扣除了這個(gè)空白的。

       

      問題三:什么時(shí)候用Y=bx和二次曲線呢?

      答:標(biāo)準(zhǔn)曲線我們通常采用的是Y=a+bX,曲線擬合完必須要做統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)且要做統(tǒng)計(jì)完備的線性檢驗(yàn)和失擬檢驗(yàn),然后再做a與0的差別檢驗(yàn),如果a與0的統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異,你就可以考慮用Y=bX的擬合曲線,擬合出來后同樣做線性檢驗(yàn)和失擬檢驗(yàn),如果線性檢驗(yàn)合格(P<0.05)且失擬檢驗(yàn)合格(p>0.05)此時(shí)你就可以采用Y=bX。二次曲線的采用同樣是這樣的道理,如果你Y=a+bX時(shí)擬合不合格,你就考慮用Y=a+bX+cX2,同樣做失擬檢驗(yàn),考察擬合的符合情況。如果Y=a+bX 和Y=a+bX+cX2都滿足擬合檢驗(yàn)和失擬檢驗(yàn)合格,則采用Y=a+bX形式,這樣符合統(tǒng)計(jì)學(xué)上參數(shù)最少的統(tǒng)計(jì)簡潔性原則。

       

      問題四:標(biāo)準(zhǔn)曲線去查含量時(shí)是先減空白信號算樣品含量還是先算出空白含量相減呢?

      答:工作中我們常要減掉空白得到樣品含量,現(xiàn)有國家標(biāo)準(zhǔn)方法有的推薦先算出空白含量,用樣品含量相減,也有推薦先用樣品信號減空白信號然后去標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量。而且這兩種算法常常差距很大。其實(shí)這種差距往往是低含量水平時(shí)才出現(xiàn),在低含量水平通過標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量時(shí),本身不確定度就很大。這兩種方法都可以。個(gè)人推薦先用樣品信號減空白信號然后去標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量,因?yàn)檫@樣出來的含量不確定度要小一些,而先算出空白含量再相減就增加了1次標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量時(shí)的不確定度,因?yàn)楹玫臏y量永遠(yuǎn)是不確定度小的測量。

       
      編輯:songjiajie2010

       
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