一、生物學(xué)特性
1、形態(tài)與染色
鏈球菌呈球形或橢圓形,直徑0.6-1.0μm,呈鏈狀排列,長(zhǎng)短不一,從4-8個(gè)至20-30個(gè)菌細(xì)胞組成不等,鏈的長(zhǎng)短與細(xì)菌的種類(lèi)及生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。在液體培養(yǎng)基中易呈長(zhǎng)鏈,固體培養(yǎng)基中常呈短鏈,由于鏈球菌能產(chǎn)生脫鏈酶,所以正常情況下鏈球菌的鏈不能無(wú)限制的延長(zhǎng)。多數(shù)菌株在血清肉湯中培養(yǎng)2-4h易形成透明質(zhì)酸的莢膜,繼續(xù)培養(yǎng)后消失。該菌不形成芽胞,無(wú)鞭毛,易被普通的堿性染料著色,革蘭氏陽(yáng)性,老齡培養(yǎng)或被中性粒細(xì)胞吞噬后,轉(zhuǎn)為革蘭氏陰性。
2、培養(yǎng)特征
需氧或兼性厭氧菌,營(yíng)養(yǎng)要求較高,普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不良,需補(bǔ)充血清、血液、腹水,大多數(shù)菌株需核黃素、維生素B6、煙酸等生長(zhǎng)因子。最適生長(zhǎng)溫度為37℃,在20-42℃能生長(zhǎng),最適pH為7.4-7.6。在血清肉湯中易成長(zhǎng)鏈,管底呈絮狀或顆粒狀沉淀生長(zhǎng)。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、邊緣整齊、直徑0.5-0.75mm的細(xì)小菌落,不同菌株溶血不一。
3、生化反應(yīng)
分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,對(duì)乳糖、甘露醇、水楊苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七葉苷的分解能力因不同菌株而異。一般不分解菊糖,不被膽汁溶解,觸酶陰性。
4、抗原結(jié)構(gòu)
鏈球菌的抗原構(gòu)造較復(fù)雜,主要有三種:
(1)核蛋白抗原 或稱(chēng)P抗原,無(wú)特異性,各種鏈球菌均相同。
(2)多糖抗原 或稱(chēng)C抗原,系群特異性抗原,是細(xì)胞壁的多糖組分,可用稀鹽酸等提取。
(3)蛋白質(zhì)抗原 或稱(chēng)表面抗原,具有型特異性,位于C抗原外層,其中可分為M、T、R、S四種不同性質(zhì)的抗原成分,與致病性有關(guān)的是M抗原。
5、分類(lèi)
根據(jù)鏈球菌在血液培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖后是否溶血及其溶血性質(zhì)分為三類(lèi)。
(1)α-溶血性鏈球菌:菌落周?chē)?-2mm寬的草綠色溶血環(huán),也稱(chēng)甲型溶血,這類(lèi)鏈球菌多為條件致病菌。
(2)β-溶血性鏈球菌:菌落周?chē)纬梢粋(gè)2-4mm寬、界限分明、完全透明的無(wú)色溶血環(huán),也稱(chēng)乙型溶血,因而這類(lèi)菌亦稱(chēng)為溶血性鏈球菌,該菌的致病力強(qiáng),常引起人類(lèi)和動(dòng)物的多種疾病。
(3)γ-鏈球菌:不產(chǎn)生溶血素,菌落周?chē)鸁o(wú)溶血環(huán),也稱(chēng)為丙型或不溶血性鏈球菌,該菌無(wú)致病性,常存在于乳類(lèi)和糞便中,偶爾也引起感染。
6、抵抗力
該菌抵抗力一般不強(qiáng),60℃30min即被殺死,對(duì)常用消毒劑敏感,在干燥塵埃中生存數(shù)月。乙型鏈球菌對(duì)青霉素、紅霉素、氯霉素、四環(huán)素、磺胺均敏感。青霉素是鏈球菌感染的首選藥物,很少有耐藥性。
二、流行病學(xué)
溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣,存在于水、空氣、塵埃、糞便及健康人和動(dòng)物的口腔、鼻腔、咽喉中,可通過(guò)直接接觸、空氣飛沫傳播或通過(guò)皮膚、粘膜傷口感染,被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會(huì)對(duì)人類(lèi)進(jìn)行感染。上呼吸道感染患者、人畜化膿性感染部位常成為食品污染的污染源。一般來(lái)說(shuō),溶血性鏈球菌常通過(guò)以下途徑污染食品:
1、食品加工或銷(xiāo)售人員口腔、鼻腔、手、面部有化膿性炎癥時(shí)造成食品的污染;
2、食品在加工前就已帶菌、奶牛患化膿性乳腺炎或畜禽局部化膿時(shí),其奶和肉尸某些部位污染;
3、熟食制品因包裝不善而使食品受到污染。
三、致病性
溶血性鏈球菌?梢鹌つw、皮下組織的化膿性炎癥、呼吸道感染、流行性咽炎的爆發(fā)性流行以及新生兒敗血癥、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、猩紅熱和風(fēng)濕熱、腎小球腎炎等變態(tài)反應(yīng)。溶血性鏈球菌的致病性與其產(chǎn)生的毒素及其侵襲性酶有關(guān),主要有以下幾種:
1、鏈球菌溶血素:溶血素有O和S兩種,O為含有-SH的蛋白質(zhì),具有抗原性,S為小分子多肽,分子量較小,故無(wú)抗原性。
2、致熱外毒素:曾稱(chēng)紅疹毒素或猩紅熱毒素,是人類(lèi)猩紅熱的主要毒性物質(zhì),會(huì)引起局部或全身紅疹、發(fā)熱、疼痛、惡心、嘔吐、周身不適。
3、透明質(zhì)酸酶:又稱(chēng)擴(kuò)散因子,能分解細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸,故能增加細(xì)菌的侵襲力,使病菌易在組織中擴(kuò)散。
4、鏈激酶:又稱(chēng)鏈球菌纖維蛋白溶酶,能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶,具有增強(qiáng)細(xì)菌在組織中的擴(kuò)散作用,該酶耐熱,100℃50分鐘仍可保持活性。
5、鏈道酶:又稱(chēng)鏈球菌DNA酶,能使膿液稀薄,促進(jìn)病菌擴(kuò)散。
6、殺白細(xì)胞素:能使白細(xì)胞失去動(dòng)力,變成球形,最后膨脹破裂。
四、檢驗(yàn)和控制
(一)檢驗(yàn)
1、樣品處理:取25g固體(或25mL液體)檢樣加入225mL滅菌生理鹽水,制成混懸液。
2、吸取5mL混懸液接種至50mL葡萄糖肉浸液肉湯,或直接劃線(xiàn)于血平板(如檢樣污染嚴(yán)重,可同時(shí)接種5mL至匹克氏肉湯),36℃培養(yǎng)24h,接種血平板,36℃培養(yǎng)24h,挑起乙型溶血圓形突起的細(xì)小菌落,在血平板上分純,觀察在液體和固體中的培養(yǎng)特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態(tài),并進(jìn)行鏈激酶試驗(yàn)和桿菌肽敏感試驗(yàn)。
3、鏈激酶試驗(yàn):吸取草酸鉀血漿0.2mL,加0.8mL滅菌生理鹽水,混勻,再加入鏈球菌18-24h36℃肉浸液肉湯培養(yǎng)物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL,混勻,置于36℃水浴10min,血漿混合物自行凝固,觀察凝塊重新完全溶解的時(shí)間,完全溶解為陽(yáng)性,如24h后不溶解即為陰性。同時(shí)用肉浸液肉湯做陰性對(duì)照,用已知的鏈激酶陽(yáng)性的菌株做陽(yáng)性對(duì)照。
4、桿菌肽敏感試驗(yàn):取典型菌落的菌液涂布于血平板上,用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上,36℃培養(yǎng)18-24h,如有抑菌圈出現(xiàn)即為陽(yáng)性。用已知的陽(yáng)性菌株做對(duì)照。
(二)控制
1、防止帶菌人群對(duì)各種食物的污染,患局部化膿性感染、上呼吸道感染的人員要暫停與食品接觸的工作。
2、防止對(duì)奶及其制品的污染,牛奶場(chǎng)要定期對(duì)生產(chǎn)中的奶牛進(jìn)行體檢,堅(jiān)持?jǐn)D奶前消毒,一旦發(fā)現(xiàn)患化膿性乳腺炎的奶牛要立即隔離,奶制品要用消毒過(guò)的原料,并注意低溫保存。
3、在動(dòng)物屠宰過(guò)程中,應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行檢驗(yàn)法規(guī),割除病灶并以流水沖洗;在肉制品加工過(guò)程中發(fā)現(xiàn)化膿性病灶應(yīng)整塊剔除。