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| 1 | 大腸菌群計數(shù) | GB 4789.3 |
| 2 | 沙門氏菌檢驗 | GB 4789.4 |
| 3 | 致瀉大腸埃希氏菌檢驗 | GB 4789.6 |
| 4 | 商業(yè)無菌檢驗 | GB 4789.26 |
| 5 | 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求 | GB 4789.28 |
| 6 | 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗 | GB 4789.30 |
| 7 | 乳酸菌檢驗 | GB 4789.35 |
| 8 | 克羅諾桿菌檢驗 | GB 4789.42 |
1.修訂標準中培養(yǎng)基和試劑像菌落總數(shù)一樣增加了大腸菌群計數(shù)測試片，并且規(guī)定了性能要求：應(yīng)以發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣為陽性結(jié)果判斷為依據(jù)，也就是測試片上必須是有氣泡。同時其性能要符合GB4789.28中相關(guān)培養(yǎng)基的質(zhì)量要求。
修訂標準中要求對于乳及乳制品，無論是VRBA平板計數(shù)還是測試片計數(shù)，培養(yǎng)溫度均為30 ℃ ±1 ℃，而BGLB復(fù)發(fā)酵的培養(yǎng)溫度依然為36 ℃ ±1 ℃。
原因分析：
由于國內(nèi)外文獻報道，試驗發(fā)現(xiàn)對于自然污染大腸菌群的生乳，無論是使用VRBA平板計數(shù)還是測試片計數(shù)，培養(yǎng)溫度為30℃時乳制品中大腸菌群平板計數(shù)的結(jié)果，顯著高于培養(yǎng)溫度為36℃的計數(shù)結(jié)果。
2.對LST肉湯管乳糖發(fā)酵產(chǎn)氣的觀察修改為：小倒管或產(chǎn)氣收集裝置內(nèi)有氣泡產(chǎn)生，或輕輕振搖LST肉湯管可見試管內(nèi)有細密氣泡不斷上升者判斷為產(chǎn)氣。
3.修訂標準中平板菌落驗證試驗的選擇：
從同一稀釋度的VRBA平板上挑取典型和可疑菌落各5個,少于10個者,則挑取其全部菌落。
典型和可疑菌落的描述：
典型菌落為紅色至紫紅色，菌落周圍帶有或不帶膽鹽沉淀環(huán),菌落直徑一般大于0.5mm�？梢删錇榧t色至紫紅色,菌落直徑一般小于0.5 mm.
內(nèi)容來自分享報告《GB4789.3-2016大腸菌群計數(shù)標準修訂進展》
1.修改樣品前處理、增菌等：
修訂標準中樣品前處理：乳粉樣品從快速混勻，改用室溫浸泡1小時后再進行預(yù)增菌。
原因分析：
乳粉是經(jīng)過高溫噴霧干燥的產(chǎn)品，其中的沙門氏菌一般處于受損狀態(tài)。乳粉中沙門氏菌檢驗的前處理， 如果進行快速混勻，適應(yīng)了乳粉干燥環(huán)境的受損沙門氏菌可能會出現(xiàn)滲透壓休克。采用浸泡法室溫靜置一段時間后再進行預(yù)增菌，可以促進受損沙門氏菌的復(fù)蘇。
2.培養(yǎng)基修改：增加RVS代替SC作為選擇性增菌液，培養(yǎng)溫度為42℃。并且TTB培養(yǎng)基培養(yǎng)時間增加了一個36℃。
內(nèi)容來自征求意見稿《GB 4789.4 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》
致瀉大腸埃希氏菌檢驗標準修訂要點：
1.ETEC的stp基因引物序列位點存在一定的突變，考慮優(yōu)化修改。
2.根據(jù)風險監(jiān)測數(shù)據(jù)，astA作為EAEC的鑒定基因在食品檢測中假陽性率較高，考慮刪除此基因。
3.增加實時熒光PCR方法
4.配套GB 29921-2021
2013：O157:H7不得檢出（4789.36）
牛肉制品、生食果蔬制品
2021：DEC不得檢出（4789.6）
牛肉制品、即食生肉制品、發(fā)酵肉制品類；
去皮或預(yù)切水果、去皮或預(yù)切的蔬菜及上述類別混合食品；
內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗方法標準制修訂進展》
承擔單位：中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院、龍巖出入境檢驗檢疫局
主要修訂內(nèi)容：
增加生產(chǎn)過程抽樣
增加快速檢驗方法
刪除染色鏡檢要求
內(nèi)容來自分享報告《商業(yè)無菌檢驗方法應(yīng)用現(xiàn)狀》
主要修訂內(nèi)容：
1.新增了參比培養(yǎng)基的質(zhì)控要求：
2.新增分子生物學檢驗試劑的質(zhì)控評定方法
3.新增國內(nèi)菌種保藏中心菌株
CMCC：中國醫(yī)學細菌保藏管理中心
CICC：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心
4.整合了附錄D和E，標準實施后，培養(yǎng)基生產(chǎn)廠商質(zhì)檢和使用者驗收都需要采用現(xiàn)行附錄D的驗收形式。
5.新增28套培養(yǎng)基評價方法。
內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗方法標準制修訂進展》、征求意見稿等。
主要修訂內(nèi)容：
1.增加了OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方。
2.增加了Fraser增菌肉湯（FB1、FB2）培養(yǎng)基和試劑；
原因分析：
由于國際、國外標準規(guī)范，ISO標準采用了Fraser增菌肉湯(FB1、FB2)，分離平板包含OA李斯特氏菌顯色平板，征求意見稿參照ISO的方法，對其培養(yǎng)基進行調(diào)整，與國際接軌；增菌培養(yǎng)基由原來的“李氏增菌肉湯 LB(LB1,LB2)”改為“Fraser 增菌肉湯(FB1、FB2)”，分離培養(yǎng)基增加 “OA李斯特氏菌顯色平板”。
內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗方法標準制修訂進展》
4項食品用菌種檢測方法獲得2023國家標準立項
包括檢驗項目有：雙歧桿菌（修訂）、乳球菌（制定）、片球菌（制定）、魏茨曼氏菌（制定）；
標準主題構(gòu)架：包含菌種計數(shù)和鑒定兩部分
計數(shù)：純菌種+食品樣品、平板計數(shù)法
鑒定（選做）：
表型鑒定
生化鑒定
增加分子生物學方法：（PCR/熒光PCR）
內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗方法標準制修訂進展》
GB 4789.35《乳酸菌檢驗》修訂情況
主要修訂內(nèi)容：
1、增加了乳酸菌鑒定用實時熒光PCR方法
2、修改了乳酸菌的定義等。
內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗方法標準制修訂進展》
GB 4789.42《克羅諾桿菌檢驗》修訂情況
主要修改內(nèi)容：
1.修改標準名稱
《克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）檢驗》修改為《克羅諾桿菌檢驗》
2.修改適用范圍
克羅諾桿菌：增加嬰幼兒輔助食品
3.針對克羅諾桿菌屬不產(chǎn)黃色素造成漏檢風險，刪除在TSA瓊脂培養(yǎng)，建立克羅諾桿菌屬快速鑒定方法-PCR法。
4.為避免克羅諾桿菌屬生長受抑制，參考ISO22964-2017，修改選擇性增菌溫度為41.5℃±0.5℃。
內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗方法標準制修訂進展》
從以上標準制修訂的方向，可以看出，標準修訂越來越嚴謹性、越來越適用，更多的站在標準使用者角度修改相關(guān)內(nèi)容，完善了許多模糊的表述，增加了參考案例。測試片、PCR等快速檢驗及鑒定的方法逐漸走入國標中，從而使我國標準日益與國際標準接軌。
相信未來會有更多更成熟的方法引入到我國的標準體系中，我們現(xiàn)在可以去做一些技術(shù)儲備，爭取一些硬件條件，為未來的標準使用爭取一些資源。
