原因一：高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠，使氣體不能完全排出。

高壓鍋在滅菌過程中產(chǎn)生的最大壓力不夠，不能將小倒管內(nèi)的氣體擠出，導(dǎo)致滅菌后任留有小氣泡。此外，高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達不到滅菌溫度，也會出現(xiàn)類似現(xiàn)象。

解決辦法：使用檢查滅菌效果的用品－壓力蒸汽滅菌指示卡，對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進行監(jiān)測。

原因二：試管塞塞得太緊。

在滅菌時，試管塞塞得太緊（有些硅膠塞與試管不配套）會導(dǎo)致試管內(nèi)壓力與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。當滅菌鍋升溫升壓時，鍋內(nèi)壓力會大于試管內(nèi)壓力，試管內(nèi)壓力不夠，不能將小倒管內(nèi)氣體排盡，就留有氣泡；當滅菌鍋降溫降壓時，鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力，可能會使試管塞和培養(yǎng)基崩出，培養(yǎng)基報廢。

解決辦法：改用塑料帽、不銹鋼管帽，或者與試管相匹配的硅膠塞。

原因三：小倒管口太小。

小倒管在加熱加壓后，一方面液體培養(yǎng)基要進入小倒管，另一方面小倒管內(nèi)部的空氣要被排出，如果小倒管管口太小，液體不容易進去，里面的空氣不容易被排出，就會導(dǎo)致有小氣泡生成。
解決辦法：改用開口比較大的倒管。

原因四：培養(yǎng)基質(zhì)量引起。

由培養(yǎng)基質(zhì)量引起的氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時用水做培養(yǎng)基組的對照試驗，若培養(yǎng)基組有氣泡，而對照組沒有氣泡，可確定是有此原因引起。

解決辦法：改用其它培養(yǎng)基。

原因五：過早打開滅菌鍋。

當滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高與室溫時，不要打開滅菌鍋。因為打開鍋蓋瞬間，鍋內(nèi)大量熱量散出，溫度突然降低，試管內(nèi)溫度也隨著降低，導(dǎo)致管內(nèi)氣壓減小，沸點降低，部分水會汽化留在小導(dǎo)管內(nèi)。

解決辦法：等滅菌鍋內(nèi)氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。