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      微生物檢測(cè)能力驗(yàn)證能力考核要點(diǎn)

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-03-10
      核心提示:一、什么是能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證,通俗地講,就是評(píng)價(jià)一個(gè)實(shí)驗(yàn)室有無開展某項(xiàng)檢驗(yàn)檢測(cè)活動(dòng)、出具合法有效的檢驗(yàn)檢測(cè)報(bào)告的能力
       

       


      一、什么是能力驗(yàn)證

      實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證,通俗地講,就是評(píng)價(jià)一個(gè)實(shí)驗(yàn)室有無開展某項(xiàng)檢驗(yàn)檢測(cè)活動(dòng)、出具合法有效的檢驗(yàn)檢測(cè)報(bào)告的能力。能力驗(yàn)證的目的是保證實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行滿足質(zhì)量管理的要求,出具的結(jié)果公平公正、合法有效。

      能力驗(yàn)證要從兩個(gè)方面來入手:

      第一,硬件:是否具備與所要從事的檢驗(yàn)檢測(cè)活動(dòng)相匹配的場(chǎng)地、人員、設(shè)備。

      第二,軟件:人員的能力是否滿足要求,實(shí)驗(yàn)室的管理運(yùn)行是否滿足要求。

       


      二、實(shí)驗(yàn)室收到盲樣菌株標(biāo)本后

       

      1、操作前仔細(xì)閱讀參指導(dǎo)書,尤其小的備注要注意,很多特殊情況的處理大都在備注里。

       

      2、樣品接收前的檢查很重要,首先對(duì)樣品的完整性進(jìn)行檢查,對(duì)信息的閱讀要全面,如果發(fā)現(xiàn)樣品有問題及時(shí)溝通,這樣要比做樣品的時(shí)候在發(fā)現(xiàn)來的要及時(shí),能節(jié)省不少的時(shí)間;

       

      3、作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位,很多能力驗(yàn)證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書,作業(yè)指導(dǎo)書中往往會(huì)對(duì)本次能力驗(yàn)證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項(xiàng)等有明確的規(guī)定,熟讀這些對(duì)試驗(yàn)準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會(huì)要求將試驗(yàn)后樣品一塊寄發(fā)組織單位,有的實(shí)驗(yàn)室如果不仔細(xì)閱讀的話很容易將測(cè)試后樣品立即處理掉,如果寄樣時(shí)在看見可就完了。

       

      4、測(cè)試前的準(zhǔn)備工作一定要做好,包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運(yùn)行等,有條件的情況下可以在正式測(cè)試前選擇一塊相仿的樣品進(jìn)行一下預(yù)測(cè)試,這樣會(huì)將測(cè)試過程中的問題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對(duì)正式測(cè)試的操作有幫助。

       


      三、能力驗(yàn)證樣品處理

       

      1、樣品測(cè)試過程中的判斷能力很重要,有時(shí)候我們?cè)跍y(cè)試中往往會(huì)自以為是,為了保證測(cè)試過程中的準(zhǔn)確操作最好是找一個(gè)經(jīng)驗(yàn)豐富的作督察,發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)解決,如果等操作完畢再發(fā)現(xiàn)問題的話可能會(huì)因?yàn)闃悠返南亩鵁o法驗(yàn)證結(jié)果;

       

      2、定量項(xiàng)目,西林瓶內(nèi)樣品不可分割,應(yīng)全部用于檢測(cè)。一般參考書指導(dǎo)的是加40mL稀釋液制成40mL樣品。

       

      3、定量項(xiàng)目樣品稀釋。指導(dǎo)書標(biāo)明了稀釋范圍的,在稀釋范圍左右各加1個(gè)稀釋度進(jìn)行;書上沒有稀釋范圍的,多做稀釋倍數(shù),選擇合適的稀釋倍數(shù)計(jì)數(shù)(一般可稀釋至10-8)。

       

      4、定量項(xiàng)目,除了要多做稀釋倍數(shù)外,同時(shí)同一稀釋度要多倒幾皿,從原理上來講,檢測(cè)過程屬于隨機(jī)抽樣檢查,平板越多,數(shù)據(jù)越接近真值?紤]性價(jià)比,又不可能一直瘋狂一個(gè)稀釋度很多平板,所以能力驗(yàn)證時(shí)候多倒幾皿,求好結(jié)果。

       

      5、定性項(xiàng)目有一些重要步驟。

      a、增菌及分離步驟尤其重要。選擇合適的增菌液和分離用培養(yǎng)基對(duì)目標(biāo)菌的檢出非常關(guān)鍵,選擇兩種以上的增菌液和分離用培養(yǎng)基對(duì)菌株作直接分離和增菌后分離。

      b、劃線分離十分重要,要把增菌液中的目標(biāo)菌盡量多的表達(dá)出來,要分出單個(gè)菌落并盡可能多挑取可疑菌落,確保分離到目標(biāo)菌。

      c、生化試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)以營養(yǎng)瓊脂平板上的純培養(yǎng)細(xì)菌為好。

       


      四、實(shí)驗(yàn)過程一定要做陰陽對(duì)照

       

      陽性對(duì)照,是在試知驗(yàn)中,檢驗(yàn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合,如果在實(shí)驗(yàn)中,陽性實(shí)驗(yàn)沒有生長的話,那這個(gè)實(shí)驗(yàn)是失敗的。陰性對(duì)照主道要是檢測(cè)培養(yǎng)基是否污染,在沒有加入任何東西培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會(huì)顯示陽性回結(jié)果,這就說明培養(yǎng)基滅菌不徹底,染菌答了,這樣也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的。

       


      五、培養(yǎng)基方面需要注意的地方

       

      1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。

      正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝,再加入剩余水量,混勻后滅菌或分裝。

       

      2、混菌法倒皿要充分混勻。

      培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈(混勻速度一定要慢,目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染),找較水平位置冷卻凝固。

       

      3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問題。

      覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動(dòng),造成片狀生長,無法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對(duì)于不運(yùn)動(dòng)的菌,可以不覆蓋,對(duì)于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。

       

      總結(jié)一下:

      a、長期檢測(cè)同一種樣品,不覆蓋并無蔓延現(xiàn)象,不覆蓋;長期檢測(cè)蔓延選擇了覆蓋,一直覆蓋。

      b、未知樣品,進(jìn)行覆蓋和不覆蓋的比對(duì)實(shí)驗(yàn),然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗(yàn)。

      c、能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),覆蓋和不覆蓋的都做,不要吝惜那么一點(diǎn)點(diǎn)培養(yǎng)基或耗材,畢竟能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做的漂亮才是實(shí)驗(yàn)室(是室而不是人。┠芰Φ木C合體現(xiàn)。

       

      4、培養(yǎng)過程防止平皿干燥。

      培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基可以倒的適當(dāng)厚一些,比如25mL。培養(yǎng)箱底部接一個(gè)不銹鋼盆,裝上足量無菌水。

       

      5、 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程勤觀察。

      微生物培養(yǎng)過程一般需要幾小時(shí)到幾十小時(shí),要利用這段時(shí)間觀察培養(yǎng)箱及菌生長情況,比如溫度是否穩(wěn)定,培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等,多思多看,準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

      原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗(yàn)的全過程,原始記錄要包含時(shí)間、試驗(yàn)現(xiàn)象、試驗(yàn)結(jié)果三個(gè)要素,方便試驗(yàn)出現(xiàn)問題的查找。

       


      結(jié)果判定

       

      結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作,但是對(duì)于人為操作如評(píng)級(jí)、手工操作等結(jié)果可能會(huì)因?yàn)槿藛T的差別而會(huì)有不同的偏差,這樣在判定時(shí)最好是找有經(jīng)驗(yàn)的部門負(fù)責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪,這樣的話會(huì)減少很多不必要的錯(cuò)誤。


      編輯:songjiajie2010

       
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      關(guān)鍵詞: 能力驗(yàn)證
       

       
       
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