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      應(yīng)對(duì)菌落蔓延,TTC的使用方法

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-12-13
      核心提示: 關(guān)于TTC的使用,從剛開始的菌落蔓延,搜索解決辦法,了解TTC之后琢磨使用劑量,可以說是花了一段不短的時(shí)間。包括對(duì)于TTC的
       關(guān)于TTC的使用,從剛開始的菌落蔓延,搜索解決辦法,了解TTC之后琢磨使用劑量,可以說是花了一段不短的時(shí)間。包括對(duì)于TTC的使用,也可以說“眾說紛紜”,一開始接觸的我真的也是不知道怎么去弄,是很頭疼的,而且遇到菌落蔓延的吧友還是挺多的。


      好了,廢話說到這,進(jìn)入正題:

      首先,TTC有毒,不僅毒細(xì)菌也毒人,所以使用的時(shí)候要小心(其實(shí)用別的化學(xué)試劑也要小心,不好意思,又說廢話了)。接著我個(gè)人是配置的0.5%的TTC溶液,你們可以根據(jù)個(gè)人的需要配置不同濃度。

      配置方法:實(shí)驗(yàn)室用水(我們用的桶裝純凈水)200mL,TTC粉末1.00 g,水不用滅菌,我個(gè)人是稍微加熱(大概40℃水溫這樣就完全溶解了),也可以攪拌至完全溶解,然后倒入棕色瓶子,放無菌室靜置大概72小時(shí)(我個(gè)人是放置72小時(shí),不確定24小時(shí)或者48小時(shí)行不行),此時(shí)配置出來的溶液加入空白培養(yǎng)基是養(yǎng)不成菌落的(我覺得這也說明了這東西有毒)。沒必要先把水滅菌,也沒必要加入PDA培養(yǎng)基里一起121℃滅菌。

      使用劑量:我一般是500mL PDA培養(yǎng)基 配 2.0mL 的 0.5%TTC 溶液,在無菌室里操作,在倒平板之前加,搖晃均勻就可以,本人親測(cè),對(duì)解決菌落蔓延問題非常有效,而且也不會(huì)有明顯的抑制細(xì)菌生長(zhǎng)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)不準(zhǔn)確的情況。

      溫馨提醒:放置條件:避光低溫保存(我是室溫保存的,化驗(yàn)室經(jīng)常開空調(diào),大概在20-25℃左右,(下班了就25-30℃左右),目前放置了一個(gè)多月,沒有出現(xiàn)粉紅色。我查找資料的時(shí)候,說是溶液呈粉紅色就要從新配置了。

       

      小結(jié)

      目的 : 為便于區(qū)別樣品顆粒與菌落,可在每 100mL 瓊脂培養(yǎng)基中加入1 mL、 0.5% 的 TTC 溶液,如有細(xì)菌存在,培養(yǎng)后菌落呈紅色。

      配制 : TTC 0.5g,蒸餾水 100mL,溶解。定性濾紙過濾,濾液置于棕色瓶中,4°C冰箱冷藏 。

      滅菌 : 配好的0.5% TTC,  過濾除菌后置于棕色瓶中4°C冰箱冷藏 ; 或按預(yù)計(jì)使用量分裝入小管,115℃高壓滅菌 20min 、121度高溫滅菌15min,過后4°C冰箱冷藏。

      使用 : 臨澆平板前,再按前述比例將TTC與培養(yǎng)基混合搖勻。

       


      只是分享經(jīng)驗(yàn),數(shù)據(jù)結(jié)論僅代表我自己親身試驗(yàn)得出的較合理結(jié)論,不具備權(quán)威性哦!

      編輯:songjiajie2010

       
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