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      致阿根廷“不明原因肺炎”的軍團(tuán)菌是什么?如何預(yù)防?怎么檢?

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-09-19
      核心提示: 最近一條這樣的新聞引起了大家的關(guān)注。當(dāng)?shù)貢r(shí)間2022年9月3日,阿根廷參議院健康委員會(huì)主席、前圖庫曼省公共衛(wèi)生局局長巴勃
       最近一條這樣的新聞引起了大家的關(guān)注。

      當(dāng)?shù)貢r(shí)間2022年9月3日,阿根廷參議院健康委員會(huì)主席、前圖庫曼省公共衛(wèi)生局局長巴勃羅·耶德林在接受媒體采訪時(shí)表示,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù),近日在圖庫曼省魯茲醫(yī)院發(fā)現(xiàn)的不明原因肺炎致病原因是軍團(tuán)菌

       

      當(dāng)天早些時(shí)候,阿根廷衛(wèi)生部部長卡拉·比索蒂也證實(shí),有患者樣本在軍團(tuán)菌測試中呈陽性,正在核實(shí)軍團(tuán)菌的具體類別。
      他表示,“從專業(yè)角度來看,可以證實(shí)這是一次軍團(tuán)菌的暴發(fā),可能是嗜肺軍團(tuán)菌。

      看到“不明原因肺炎”,不知道大家是不是和小編一樣感覺到有些恐慌。什么是軍團(tuán)菌,又有著怎樣的危害呢?如何檢?





      什么是軍團(tuán)菌
      軍團(tuán)菌,革蘭氏陰性需氧桿菌,一種常見的水源性致病微生物,其中至少19種是人類肺炎的病原體。最常見病原體為嗜肺軍團(tuán)菌(占病例的85%~90%)。軍團(tuán)菌是建筑供水系統(tǒng)條件致病菌(opportunistic premise plumbing pathogens,OPPPs)中的一種,團(tuán)菌的出現(xiàn)建筑水系統(tǒng)中容易發(fā)生的微生物問題。
      哪里有水,哪里就有它,它最喜歡躲在空調(diào)的冷卻水和管道中,經(jīng)過通風(fēng)口,跟著冷風(fēng)吹出浮游在空氣中,通過呼吸道進(jìn)入人體,讓人生病;也可在土壤中生存。




      軍團(tuán)菌的危害

      軍團(tuán)菌是一種在自然界中很常見的細(xì)菌,可以引起以發(fā)熱和肺炎。是潛伏在我們身邊的“殺手”,它的部分癥狀和新冠肺炎較相似,且易發(fā)展為重癥,病死率為5%~30%。軍團(tuán)菌侵入人體后,進(jìn)攻兇猛,7天內(nèi)就可導(dǎo)致患者死亡,患者死亡大都因?yàn)楹粑ソ,其次為休克和急性腎功能衰竭等。

       




      如何傳播

      軍團(tuán)菌病主要的感染途徑是人吸入被污染的氣溶膠。

      氣溶膠來源包括空調(diào)冷卻塔、冷熱水系統(tǒng)、加濕器、溫泉等。感染可通過吸入受污染的氣溶膠而發(fā)生,特別是易感的住院病人。大多數(shù)健康人群感染軍團(tuán)菌后,表現(xiàn)為無癥狀或癥狀很輕的一過性感染,50歲以上人群、吸煙者、以及有慢性肺部疾病、免疫功能低下、腫瘤、基礎(chǔ)疾病等人群感染后發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)較高。軍團(tuán)菌病潛伏期一般為2-10天。一旦患病,病情常較嚴(yán)重。如治療延遲或治療不當(dāng),其病死率可高達(dá)15%-20%。軍團(tuán)菌病患者可采用紅霉素、阿奇霉素等抗生素進(jìn)行治療。




      如何檢測

      目前空調(diào)冷卻水、噴泉水等非飲用水中軍團(tuán)菌污染問題已引起各國研究者的廣泛關(guān)注,而飲用水中軍團(tuán)菌污染的相關(guān)研究較少。但近年來飲用水系統(tǒng)被軍團(tuán)菌污染事件時(shí)有發(fā)生,特別是2020年受新冠疫情的影響,多數(shù)建筑長期封閉導(dǎo)致供水系統(tǒng)長時(shí)間水流停滯,為軍團(tuán)菌的生長繁殖提供有利條件。

      我國原衛(wèi)生部于2006年頒布了《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn),各級(jí)疾控部門和監(jiān)督部門相繼開展了公共場所集中空調(diào)嗜肺軍團(tuán)菌的監(jiān)測、評(píng)價(jià)和調(diào)查工作。2013年,中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《公共場所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法》(GB/T 18204.5—2013)出臺(tái),其中,第5部分介紹了集中空調(diào)冷凝水、冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌的檢測方法。上述行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)與國家標(biāo)準(zhǔn)對集中空調(diào)冷凝水、冷卻水中嗜肺軍團(tuán)菌的檢測方法基本相同,且與歐美等國家監(jiān)測方法相似,即通過對集中空調(diào)冷凝水、冷卻水進(jìn)行過濾、洗脫、酸處理、熱處理后進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。分離培養(yǎng)法是目前國際通用檢測軍團(tuán)菌的“金標(biāo)準(zhǔn)”,適用于各種環(huán)境水體。

      近些年出現(xiàn)了多種新的嗜肺軍團(tuán)菌定量檢測方法。其中,酶底物法作為一種同時(shí)適用于飲用水和非飲用水的嗜肺軍團(tuán)菌檢測方法備受關(guān)注。酶底物法作為嗜肺軍團(tuán)菌定量檢測方法,是嗜肺軍團(tuán)菌利用酶底物試劑中氨基酸、維生素和其他營養(yǎng)物質(zhì)迅速生長和增殖,其代謝產(chǎn)物與試劑發(fā)生反應(yīng)使溶液顯褐色,基于最可能數(shù)(most probable number,MPN)方法對樣本中嗜肺軍團(tuán)菌進(jìn)行定量分析。

       

      今天我們先學(xué)習(xí)一下國家標(biāo)準(zhǔn)《公共場所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法》(GB/T 18204.5—2013)中空調(diào)冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團(tuán)菌檢測方法:


      01
      嗜肺軍團(tuán)菌檢測方法

      原理

       

      樣品經(jīng)培養(yǎng)在 GVPC 瓊脂平板上生成典型菌落,并在 BCYE 瓊脂平板上生長而在 BCYE-CYE 瓊脂平板不生長,進(jìn)一步經(jīng)生化實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)實(shí)驗(yàn)鑒定確認(rèn)的菌落為嗜肺軍團(tuán)菌。

       

      儀器設(shè)備

       

      2.1.平皿:90mm。

      2.2.CO2 培養(yǎng)箱:35 ~37 

      2.3.紫外燈:波長360nm2nn.

      2.4.濾膜過濾器

      2.5.濾膜:孔徑 0.22μm~0.45μm。

      2.6.真空泵

      2.7.離心機(jī)

      2.8.渦旋振蕩器

      2.9.普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡

      2.10.水浴箱

      2.11.廣口采樣瓶:玻璃或聚乙烯材料,磨口,容積 500 mL。

       

       

      試劑和培養(yǎng)基


      3.1.GVPC瓊脂平板

      3.2.BCYE瓊脂平板

      3.3.BCYE-CYE瓊脂平板

      3.4.革蘭氏染色液

      3.5.馬尿酸鹽生化反應(yīng)管

      3.6.軍團(tuán)菌分型血清試劑

      3.7.硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液[c(Na2S203)-- 0.1 mol/L]

       

       

      采樣

       

      4.1將采樣廣口瓶(2.11) 用前滅菌。


      4.2每瓶中加人Na2S2O3(c =0.l mol/L)0.3 mL~0.5 mL,中和樣品中的氧化物。


      4.3水樣采集位置:冷卻水采樣點(diǎn)設(shè)置在距塔壁20cm、液面下10cm 處,冷凝水采樣點(diǎn)設(shè)置在排水管或冷凝水盤處。


      4.4 每個(gè)采樣點(diǎn)依無菌操作取水樣約 500 mL。


      4.5 采集的樣品 2d 內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,不必冷凍,但要避光和防止受熱,室溫下貯存不應(yīng)超過 15d。


       

      檢驗(yàn)步驟

       

      5.1樣品的沉淀或離心:如有雜質(zhì)可靜置沉淀或1000 r/min離心lmin去除。


      5.2樣品的過濾:將經(jīng)沉淀或離心的樣品通過濾膜(2.5)過濾,取下濾膜置于15mL滅菌水中,充分洗脫﹐備用。


      5.3樣品的熱處理:取1 mL洗脫樣品﹐置50℃水浴(2.10)加熱30min。


      5.4樣品的酸處理:取5 mL洗脫樣品,調(diào)pH至2.2,輕輕搖勻,放置5 min。


      5.5樣品的接種:取洗脫樣品(5.2),熱處理樣品(5.3)及酸處理樣品(5.4)各0.l mL,分別接種GVPC平板。


      5.6樣品的培養(yǎng):將接種平板靜置于CO2培養(yǎng)箱(2.2)中,溫度為35℃~37℃,CO2濃度為2.5%。無CO2培養(yǎng)箱可采用燭缸培養(yǎng)法。觀察到有培養(yǎng)物生成時(shí),反轉(zhuǎn)平板,孵育10d,注意保濕。


      5.7菌落觀察:軍團(tuán)菌生長緩慢,易被其他菌掩蓋﹐從孵育第3d開始每天在顯微鏡(2.9)上觀察。軍團(tuán)菌的菌落顏色多樣,通常呈白色、灰色、藍(lán)色或紫色﹐也能顯深褐色、灰綠色、深紅色;菌落整齊,表面光滑﹐呈典型毛玻璃狀,在紫外燈下,部分菌落有熒光。


      5.8菌落驗(yàn)證:從平皿上挑取個(gè)可疑菌落﹐接種BCYE瓊脂平板和BCYE-CYE瓊脂平板,35 ℃~37℃培養(yǎng)2 d,凡在BCYE瓊脂平板上生長而在BCYE-CYE瓊脂平板上不生長的則為軍團(tuán)菌菌落。


      5.9菌型確定:應(yīng)進(jìn)行生化培養(yǎng)與血清學(xué)實(shí)驗(yàn)確定嗜肺軍團(tuán)菌。生化培養(yǎng):氧化酶(一/弱+),硝酸鹽還原(一),尿素酶(一),明膠液化(+),水解馬尿酸。血清學(xué)實(shí)驗(yàn):用嗜肺軍團(tuán)菌診斷血清進(jìn)行分型。


      編輯:songjiajie2010

       
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