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      微生物實驗室技術(shù)操作要求

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-10-11
      核心提示:實驗室技術(shù)操作要求一、無菌操作要求食品微生物實驗室工作人員,必須有嚴格的無菌觀念,許多試驗要求在無菌條件下進行,主要原因
       實驗室技術(shù)操作要求
      一、無菌操作要求

      食品微生物實驗室工作人員,必須有嚴格的無菌觀念,許多試驗要求在無菌條件下進行,主要原因:一是防止試驗操作中人為污染樣品,二是保證工作人員安全,防止檢出的致病菌由于操作不當造成個人污染。


      1.需要建立無菌室管理制度。

      2.保持良好的衛(wèi)生:相對濕度40%-60%,溫度2-22℃,最好安裝空調(diào)。

      3.無菌室不得進行其他工作,非操作所使用的物件一律不得放入,檢后的余樣不得存放。

      4.紫外燈的使用期限一般為300小時,要記錄使用時間,到期更換。


      5.接種細菌時必須穿工作服、戴工作帽。


      6.進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應(yīng)放在無菌室緩沖間,工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。


      7.接種食品樣品時,應(yīng)在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟?/span>


      8.進行接種所用的吸管,平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。


      9.從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。


      10.接種樣品、轉(zhuǎn)種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。


      11.接種環(huán)和針在接種細菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到環(huán)和針與桿的連接處,接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min,再經(jīng)火焰燒灼。


      12.吸管吸取菌液或樣品時,應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。


      二、無菌間使用要求

       

      1.無菌間通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃,并要密封,不得隨意打開,并設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門,另設(shè)有0.5-0.7m2的小窗,以備進入無菌間后傳遞物品。


      2.無菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔,工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作臺面,不得存放與實驗無關(guān)的物品。


      3.無菌間使用前后應(yīng)將門關(guān)緊,打開紫外燈,如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時,需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時間不少于30min,使用紫外燈,應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭,除去上面灰塵和油垢,以減少紫外線穿透的影響。


      4.處理和接種食品標本時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。


      5.在無菌間內(nèi)如需要安裝空調(diào)時,則應(yīng)有過濾裝置。

       

      6.工作室應(yīng)矮小、平整,面積小,高2.2-2.3米,內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應(yīng)用不透水之材質(zhì),便于擦洗及殺菌。

      7.室內(nèi)采光面積大,從室外應(yīng)能看到室內(nèi)情況。

      8.為保證無菌室的潔凈,無菌室周圍需設(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無菌室。

      9.無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ,其電源開關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。

      10.無菌室與緩沖間進出口應(yīng)設(shè)拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應(yīng)錯開,以免空氣對流造成污染。


      三、有毒有菌污物處理要求

      微生物實驗所用實驗器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理,一律不得帶出實驗室。

      1. 經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應(yīng)放在嚴密的容器或鐵絲筐內(nèi),并集中存放在指定地點,待統(tǒng)一進行高壓滅菌。


      2. 經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物,必須經(jīng)121℃ 30min高壓滅菌。


      3. 染菌后的吸管,使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中,最少浸泡24h(消毒液體不得低于浸泡的高度)再經(jīng)121℃ 30 min高壓滅菌。


      4. 涂片染色沖洗片的液體,一般可直接沖入下水道,烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中,經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道,染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24 h后,煮沸洗滌。做凝集試驗用的玻片或平皿,必須高壓滅菌后洗滌。


      5. 打碎的培養(yǎng)物,立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸泡被污染部位,浸泡半小時后再擦拭干凈。污染的工作服或進行烈性試驗所穿的工作服、帽、口罩等,應(yīng)放入專用消毒袋內(nèi),經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。

       

      四、樣品采集及處理要求

      1.所采集的檢驗樣品一定要具有代表性,采樣時應(yīng)首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進行詳細調(diào)查,檢查是否有污染源存在。


      2.根據(jù)食品的種類及數(shù)量,采樣數(shù)量及方法應(yīng)按標準檢驗方法的要求進行。


      3.采樣應(yīng)注意無菌操作,容器必須滅菌,避免環(huán)境中微生物污染,容器不得使用煤酚皂溶液,用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌,更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物,以避免殺死樣品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應(yīng)用。


      4.樣品采集后應(yīng)立即送往檢驗室進行檢驗,送檢過程中一般不超過3h,如路程較遠,可保存在1-5℃環(huán)境中,如需冷凍者,則在凍存狀態(tài)下送檢。


      5.檢驗室收到樣品后,進行登記(樣品名稱、送檢單位、數(shù)量、日期、編號等),觀察樣品的外觀,如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者,可拒絕檢驗。

      (1) 樣品經(jīng)過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者,失去代表原食品檢驗意義者。

      (2) 瓶、袋裝食品已啟開者,熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者,即失去原食品形狀者(食物中毒樣品除外)。

      (3) 按規(guī)定采樣數(shù)量不足者。

      對送檢符合要求的樣品,檢驗室收到后,應(yīng)立即進行檢驗,如果條件不具備,應(yīng)置4℃冰箱存放,及時準備創(chuàng)造條件,然后進行檢驗。


      6.樣品檢驗時,根據(jù)其不同性狀,進行適當處理。

      (1) 液體樣品接種時,應(yīng)充分混合均勻,按量吸取進行接種。

      (2) 固體樣品,用滅菌刀、剪取其不同部位共25g,置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中,用均質(zhì)器攪碎混勻后,按量吸取接種。

      (3) 瓶、袋裝食品應(yīng)用滅菌操作啟開,根據(jù)性狀選擇上述方法處理后接種。

       

      五、樣品檢驗、記錄和報告的要求

      1.檢驗室收到樣品后,首先進行外觀檢驗,及時按照國家標準檢驗方法進行檢驗,檢驗過程中要認真、負責(zé)、嚴格進行無菌操作,避免環(huán)境中微生物污染。


      2.樣品檢驗過程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結(jié)果等均要用文字寫出試驗紀錄,以作為對結(jié)果分析、判定的依據(jù),記錄要求詳細、清楚、真實、客觀、不得涂改和偽造。

       

       

      六、實驗室檢測記錄與報告管理規(guī)范
      1

      記錄

       

      記錄是為已完成的活動或達到的結(jié)果提供客觀證據(jù)的文件。記錄的作用主要是為檢測工作的質(zhì)量效用提供客觀證據(jù),為預(yù)防和糾錯溯源提供依據(jù)。

       

      1.1 記錄的基本要求

      ⑴檢測測試過程的基本步驟和依據(jù);

      ⑵參加檢測人員的資格;

      ⑶檢測使用的儀器設(shè)備及場地;

      ⑷檢測實驗環(huán)境條件;

      ⑸檢測分析的數(shù)據(jù);

      ⑹檢測分析結(jié)果的判斷;

      ⑺檢測實驗的結(jié)論等。

       

      1.2 記錄種類

      凡對檢測工作質(zhì)量和質(zhì)量體系運行有效性有關(guān)的、需要證實的所有方面,都必須認真做好記錄。

      與檢測質(zhì)量有關(guān)的記錄分為技術(shù)記錄和質(zhì)量記錄兩類。

      ⑴技術(shù)記錄

      技術(shù)記錄是進行檢測所得數(shù)據(jù)和信息的積累。包括檢測過程的原始記錄、導(dǎo)出數(shù)據(jù)(簡稱原始記錄)、合同、任務(wù)單,以及與檢測工作相關(guān)的技術(shù)方案、采樣點設(shè)置圖等說明資料。

      ⑵質(zhì)量記錄

      質(zhì)量記錄是客觀反映質(zhì)量或質(zhì)量體系運行過程的信息載體,主要包括質(zhì)量體系內(nèi)審和質(zhì)量管理評審的記錄與報告、質(zhì)量監(jiān)督、儀器設(shè)備運行檢查、儀器設(shè)備和計量標準檔案、人員培訓(xùn)記錄檔案、申訴以及糾正措施或預(yù)防措施等。

       

      1.3 記錄管理

      ⑴所有的記錄必須指定專人負責(zé)管理;

      ⑵制訂各類記錄的保存期限;

      ⑶涉及客戶的記錄應(yīng)制定保密措施,以保護客戶信息和所有權(quán);

      ⑷記錄應(yīng)保存在適宜的環(huán)境及設(shè)施中,有效防止污損、變質(zhì)、蟲蛀和丟失;

      ⑸記錄的維護管理、查閱或借閱應(yīng)符合保護客戶信息和所有權(quán)程序要求;

      ⑹超過保管期限的記錄,由管理人員造冊,經(jīng)批準后,按有關(guān)程序予以處理。

       

      1.4 檢測原始記錄規(guī)范

      原始記錄是編制檢測報告的主要依據(jù),也是必要和可能時再現(xiàn)試驗的依據(jù),因此必須記錄完整、真實、清楚,對涂改應(yīng)作出統(tǒng)一規(guī)定。原始記錄除試驗數(shù)據(jù)和觀察記錄外,還要對所用儀器設(shè)備、標準物質(zhì)、環(huán)境條件、試驗參數(shù)、樣品編號及其狀態(tài)、測試過程中的異,F(xiàn)象進行如實記錄。

      檢測原始記錄是檢測工作活動軌跡的客觀證據(jù),是形成檢測報告的原始憑證,因此必須規(guī)范化。

      ⑴原始記錄信息要完整。

      原始記錄應(yīng)包括以下內(nèi)容:

      a)檢測的方法依據(jù);

      b)使用的儀器設(shè)備名稱、型號及編號;

      c)檢測時的被測樣品標識;

      d)檢測時的環(huán)境條件;

      e)檢測觀察結(jié)果、數(shù)據(jù)及其計算;

      f)檢測人員和復(fù)核人員簽字;

      g)其他必要的說明。

      ⑵原始記錄填寫人員應(yīng)準確、規(guī)范、完整、客觀地記錄相關(guān)內(nèi)容,不得使用鉛筆書寫;

      ⑶原始記錄因筆誤或計算錯誤需要更改時,應(yīng)按規(guī)定的程序進行修改。如使用單桿劃去原數(shù)據(jù),在其右上方寫上正確數(shù)據(jù),并有更改人的簽章;

      ⑷正確使用法定計量單位;

      ⑸使用統(tǒng)一格式的原始記錄。

       

      2

      報告

      檢測報告是檢測機構(gòu)向客戶提供的最終產(chǎn)品,也是檢測機構(gòu)工作質(zhì)量的最終體現(xiàn),因此檢測機構(gòu)應(yīng)準確、清晰和客觀報告進行的每一項檢測結(jié)果。

       

      2.1 檢測報告基本要求

      ⑴檢測報告的編制應(yīng)符合國家有關(guān)法律法規(guī)及檢測機構(gòu)所建立的質(zhì)量體系文件的規(guī)定;

      ⑵報告中所使用的術(shù)語、定義應(yīng)與現(xiàn)行有效的國家標準、技術(shù)規(guī)范一致;

      ⑶使用法定計量單位;

      ⑷檢測數(shù)據(jù)的處理與表達方式應(yīng)與現(xiàn)行有效的國家標準、技術(shù)規(guī)范一致;

      ⑸必須加蓋相關(guān)的印章;

      ⑹若有分包項目應(yīng)注明,必要時可詳細說明。

       

      2.2 檢測報告內(nèi)容

      檢測報告應(yīng)包括以下信息:

      a)標題;

      b)檢測機構(gòu)名稱、地址及聯(lián)系電話;

      c)檢測報告唯一性標識,報告總頁數(shù)及頁碼;

      d)客戶的相關(guān)信息;

      e)檢測樣品的描述說明和明確標識;

      f)檢測樣品的特性及狀態(tài);

      g)檢測方法技術(shù)依據(jù)及說明;

      h)檢測儀器設(shè)備及檢測環(huán)境條件;

      i)檢測的結(jié)果,并適當輔以表格或簡圖加以說明;

      j)報告批準(或經(jīng)授權(quán))人、審定人(適用時)、審核人、編制人的簽字或等同的標識;

      k)報告的有效性聲明;

      l)對估算的監(jiān)測結(jié)果不確定度的說明(如果適用);

      m)特定方法、客戶要求附加的信息(適用時)。

       

      2.3 檢測報告審核與簽發(fā)

      ⑴報告審核

      檢測報告在簽發(fā)前必須進行校對和審核。校對主要是對數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)移、計算處理及報告內(nèi)容差漏進行校對;審核是對報告的完整性、項目的齊全性、依據(jù)的正確性以及結(jié)論的正確性進行審查,審查內(nèi)容包括:

      ①檢測所依據(jù)的標準、方法、指導(dǎo)書的有效性;

      ②檢測所依據(jù)方法、儀器設(shè)備、環(huán)境條件選用、數(shù)據(jù)計算以及所有文字、符號、計量單位的正確性;

      ③報告的檢測結(jié)果與檢測原始記錄的一致性;

      ④報告內(nèi)容及其檔案要件的完整性;

      ⑤報告結(jié)論的正確性及報告編制的規(guī)范性。

      ⑵報告簽發(fā)

      經(jīng)審核的檢測報告由法人或其授權(quán)簽字人簽發(fā),同時應(yīng)指定專人負責(zé)待發(fā)檢測報告的管理,實行領(lǐng)用登記制度。

      有關(guān)人員從報告編制、審核到發(fā)布或傳遞檢測報告均應(yīng)遵循保護客戶信息和所有權(quán)程序的相關(guān)規(guī)定。

       

      報告由檢測機構(gòu)的負責(zé)人或其授權(quán)簽字人簽發(fā),對于授權(quán)簽字人應(yīng)滿足以下要求:

      ①相應(yīng)授權(quán)簽字領(lǐng)域的資格和經(jīng)驗;

      ②能參與監(jiān)督日常報告產(chǎn)生的關(guān)鍵過程;

      ③熟悉檢測標準與檢測程序(包括理論基礎(chǔ)知識和技術(shù)領(lǐng)域的實際能力);

      ④能對檢測結(jié)果進行科學(xué)的分析評價;

      ⑤熟悉質(zhì)量標準體系的知識;

      ⑥熟悉評審機構(gòu)方針、政策以及對實驗室的有關(guān)要求;

      ⑦有足夠的時間參與實驗室工作,熟悉實驗室質(zhì)量體系和業(yè)務(wù)工作的開展。

       

      2.4 檢測報告更改

      檢測報告的更正是指對檢測機構(gòu)已簽發(fā)批準送達客戶后,因出現(xiàn)下列原因之一需要對檢測報告進行的更正或補充。

      ①發(fā)現(xiàn)檢測報告對應(yīng)的檢測儀器設(shè)備出現(xiàn)問題,且已影響到該檢測報告所涉及的檢測結(jié)果;

      ②發(fā)現(xiàn)由于采用了不正確或不完善的檢測方法,導(dǎo)致檢測結(jié)果有誤;

      ③發(fā)現(xiàn)出具的檢測報告有其他錯誤;

      ④為滿足客戶的合理要求。

      報告的更改可采用以下方式:

      ①發(fā)布一個新的檢測報告,以替代原檢測報告。新報告應(yīng)有新的編號,并標明替代的舊報告號;

      ②以"報告的更改或補充的通知"的形式通知客戶(尤其是采用電子傳輸時),應(yīng)統(tǒng)一編制這種文件格式。

       

      2.5 檢測報告結(jié)論評價用語模式的建立

      ⑴所檢項目全部合格

      模式:該樣品所檢項目符合GB×標準。

      舉例:該樣品所檢項目符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油。

       

      ⑵所檢項目全部不合格

      模式:該樣品所檢項目不符合GB×標準。

      舉例:該樣品所檢項目不符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油。

       

      ⑶所檢項目少數(shù)不合格

      模式:該樣品所檢項目中×不符合GB×標準,其余項目合格。

      舉例:該樣品所檢項目中氨基酸態(tài)氮不符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油,其余項目合格。


      ⑷所檢項目少數(shù)合格

      模式:該樣品所檢項目中×符合GB×標準,其余項目不合格。

      舉例:該樣品所檢項目中砷符合GB 2717-2018 食品安全國家標準 醬油,其余項目不合格。

       

      ⑸參照標準評價

      模式:參照GB×標準,該樣品所檢項目…,即先加入"參照GB×標準",其后與上述相同。

      編輯:songjiajie2010

       
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