微生物檢測(cè)人員天天都在培養(yǎng)和鑒定各種細(xì)菌真菌,培養(yǎng)和鑒定過程中肯定都會(huì)用到各種各樣的培養(yǎng)基,尤其是一些選擇性和鑒定性的培養(yǎng)基。我們每天都在用的這些培養(yǎng)基,你知道它們的原理嗎?今天小編就挑選幾種常用的培養(yǎng)基給大家科普一下。
伊紅美藍(lán)瓊脂
伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基,簡(jiǎn)稱EMB,常用于大腸埃希氏菌的檢測(cè),其主要原理是培養(yǎng)基中存在的伊紅和美藍(lán)這兩種染色劑,其中伊紅為酸性染料,美藍(lán)為堿性染料。大腸埃希氏菌在伊紅美藍(lán)上的典型狀態(tài)為具黑色中心有光澤或者無光澤。當(dāng)大腸埃希氏菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌就會(huì)帶正電荷被伊紅染成紅色,再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落并帶有金屬光澤;不分解乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌就不著色,伊紅和美藍(lán)就不能結(jié)合,因此沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。典型的大腸埃希氏菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上如圖:
Baird-Parker瓊脂
Baird-Parker瓊脂主要用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng),其主要原理是培養(yǎng)基中含有的丙酮酸鈉、甘氨酸、氯化鋰、亞碲酸鉀等。金黃色葡萄球菌在Baird-Parker平板上的典型狀態(tài)為黑色,且周圍有一渾濁帶,在外側(cè)有一透明環(huán),呈現(xiàn)“雙環(huán)”現(xiàn)象。其原理為:丙酮酸鈉和甘氨酸刺激葡萄球菌的生長(zhǎng),氯化鋰和亞碲酸鉀抑制非葡萄球菌,含有卵磷脂酶的葡萄球菌降解卵黃是菌落產(chǎn)生透明圈,而脂酶作用產(chǎn)生不透明的沉淀環(huán),凝固酶陽性的葡萄球菌還能還原亞碲酸鉀產(chǎn)生黑色菌落。一般應(yīng)該注意,典型的金黃色葡萄球菌是具有“雙環(huán)”的,即一渾濁帶之外還有一圈透明環(huán),只具有單環(huán)渾濁帶的一般是變形桿菌。金黃色葡萄球菌在Baird-Parker平板上的典型菌落如圖:
HE瓊脂
HE瓊脂常用于腸道致病菌的檢測(cè),比如沙門氏菌的分離性選擇就會(huì)用到。沙門氏菌在HE瓊脂上的典型狀態(tài)為藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或者幾乎全黑色;部分菌株為黃色,中心黑色或幾乎全黑色。其原理主要是非目標(biāo)菌會(huì)分解乳糖、蔗糖和水楊素產(chǎn)酸,而pH指示劑溴麝香草酚藍(lán)和酸性復(fù)紅會(huì)使產(chǎn)酸菌呈紅色,而沙門氏菌等不發(fā)酵產(chǎn)酸的菌或呈藍(lán)綠色。同時(shí)膽鹽、去氧膽酸鈉以及兩種指示劑可以抑制革蘭氏陽性菌,硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨會(huì)檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生使菌落中心呈黑色。沙門氏菌在HE瓊脂平板上的典型菌落如圖:
TCBS瓊脂
TCBS瓊脂又叫硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基,用于致病性弧菌的選擇性分離。例如副溶血性弧菌。典型的副溶血性弧菌在TCBS上呈圓形、半透明、表面光滑的綠色菌落。培養(yǎng)基中的氯化鈉可刺激弧菌的生長(zhǎng);蔗糖是可發(fā)酵的糖類;膽酸鈉、牛膽汁粉、硫代硫酸鈉和檸檬酸鈉及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群;霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng);硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應(yīng)作為檢測(cè)硫化氫產(chǎn)生的指示劑;溴麝香草酚藍(lán)和麝香草酚藍(lán)是pH指示劑。副溶血性弧菌在TCBS平板上的典型菌落如下圖:
以上四種培養(yǎng)基都是我們?cè)跈z測(cè)致病菌中常用的,通過對(duì)它們的原理的了解,是不是對(duì)您日常的檢測(cè)工作有所幫助呢?