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      實(shí)驗(yàn)一線操作,微生物檢測(cè)過(guò)程中的問(wèn)題及解答集錦

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2019-12-19
      核心提示:1.微生物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的移液槍怎么滅菌?答:移液槍用紗布包好,外面報(bào)紙包好滅菌。不能濕熱滅菌的槍,在槍口處塞入少許棉花,
       1.微生物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的移液槍怎么滅菌?

      答:移液槍用紗布包好,外面報(bào)紙包好滅菌。不能濕熱滅菌的槍,在槍口處塞入少許棉花,外面采用表面滅菌的方法擦拭滅菌,里面采用熱空氣交換法或者潔凈空氣交換法處理。

       

      2.微生物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如果移液槍槍頭想要重復(fù)使用怎么辦?

      答:槍頭盒裝好,報(bào)紙包好滅菌。槍頭少的話放入平皿或者小燒杯后,報(bào)紙包好滅菌。

       

      3. 微生物實(shí)驗(yàn)回收率上下限是多少?

      答:50—200%(藥典規(guī)定)。

       

      4. 滅菌后的物品怎么保存,幾天內(nèi)可以繼續(xù)使用?

      答:移液管、平皿之類的工器具沒(méi)打開(kāi)放無(wú)菌室一般可以放置兩個(gè)星期左右。滅菌后的培養(yǎng)基放冰箱冷藏保存通?煞乓恍瞧。

       

      5.GB4789.10-2016金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)中培養(yǎng)時(shí)間很多都改成了24-48h ,這個(gè)跨度有點(diǎn)大,具體怎么判定。

      答:如果培養(yǎng)24h后已經(jīng)長(zhǎng)菌就不需要再進(jìn)行培養(yǎng)了;如果培養(yǎng)24h后未長(zhǎng)菌則需要繼續(xù)培養(yǎng)至48h。

       

      6.請(qǐng)教食品車(chē)間人員手部微生物檢測(cè)的具體方法?

      答:①被檢人員雙手五指并攏,用浸濕生理鹽水的脫脂棉在手指曲面,從指尖、指溝處到指端來(lái)回涂抹2次(一只手涂抹面積約30平方厘米)。
      ②將脫脂棉放到10ml滅菌生理鹽水采樣管內(nèi),蓋緊試管,詳細(xì)標(biāo)記取樣點(diǎn)和取樣時(shí)間。
      ③將取好的樣品送到檢測(cè),由檢測(cè)員將每只樣試管振打80次或用混勻器充分混勻,取1ml樣液,放入滅菌平皿內(nèi),傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂,每個(gè)樣品平行接種兩塊平皿,同時(shí)接種一個(gè)空白樣,在平皿上詳細(xì)標(biāo)記取樣點(diǎn)和取樣時(shí)間。
      ④將采樣后的平皿在35-37℃條件下培養(yǎng)48±2小時(shí)后取出查看結(jié)果,計(jì)數(shù)平板上的細(xì)菌菌落數(shù);(將采樣后的平皿在27-29℃條件下培養(yǎng)5-7天后取出查看結(jié)果,計(jì)數(shù)平板上的霉菌菌落數(shù))。

      具體可參照標(biāo)準(zhǔn) GB 15979-2002。

       

      7.培養(yǎng)皿上用記號(hào)筆寫(xiě)的字,用酒精擦完還有殘留的顏色咋辦?

       答:有二個(gè)辦法:一,棉球做成小球球(和醫(yī)生擦的那種大小)然后泡酒精里,用時(shí)候少量多次。這樣殘痕少。第二個(gè)辦法:買(mǎi)點(diǎn)去污粉,先統(tǒng)一找塊抹布蘸去污粉把字先擦拭掉,然后再去統(tǒng)一擦拭去污粉,然后清水洗凈。

       

      8.微生物一般默認(rèn)是不用做回收率,感覺(jué)是約定俗成的了,但是為什么呢?有時(shí)候會(huì)有做化學(xué)的朋友問(wèn)我,但是又沒(méi)有一個(gè)特別好的解釋。大家有沒(méi)有很權(quán)威的或者理論支持很強(qiáng)的理由呢?

      答:應(yīng)該是因?yàn)槲⑸锓植嫉牟痪鶆蛐园,另外微生物?huì)生長(zhǎng)繁殖,也是重要的影響因素;食品行業(yè)沒(méi)有強(qiáng)制要求而已;制藥行業(yè)微生物檢驗(yàn)方法驗(yàn)證是要求做回收率的,詳見(jiàn)《中國(guó)藥典》2015年版四部通則與《中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》2010年版中“微生物限度檢查”有關(guān)內(nèi)容。

       

      9.內(nèi)審時(shí),專家提出高壓滅菌器的滅菌時(shí)間沒(méi)有校準(zhǔn),可是,當(dāng)?shù)氐氖∮?jì)量院計(jì)量高壓滅菌器時(shí)依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)只需要對(duì)溫度和壓力進(jìn)行校準(zhǔn),沒(méi)有時(shí)間項(xiàng)目,這個(gè)該如何整改?  

      答:這里提供一個(gè)可行性方案:增加秒表,操作員進(jìn)行秒表與滅菌器進(jìn)行校準(zhǔn)書(shū)寫(xiě)記錄,每年對(duì)秒表進(jìn)行校準(zhǔn)。

       

      10.一般在超凈工作臺(tái)里開(kāi)紫外燈,然后把玻璃門(mén)關(guān)下。如果不能穿透玻璃,是不是在超凈工作臺(tái)外還要在開(kāi)一個(gè)紫外燈滅菌。

      答:紫外線是不能穿透玻璃的,因?yàn)樽贤饩波長(zhǎng)短,能量不高,穿透能力比較弱,只能做表面的殺菌,且作用有效距離只有1.5米;紫外線是不能穿透玻璃的,超凈工作臺(tái)外還要在開(kāi)一個(gè)紫外燈滅菌。

       

      11.車(chē)間生產(chǎn)一鍋洗潔精(菌落總數(shù)檢驗(yàn)方法按GB4789.2),生產(chǎn)完(產(chǎn)品中添加防腐劑)立即取樣檢驗(yàn)菌落總數(shù)結(jié)果是300cfu/g,隔一天后重新取樣菌落總數(shù)是<10CFU/g,取樣時(shí)間不同結(jié)果差距這么大,是因?yàn)榉栏瘎⿲⒕湟种茪⑺懒藛幔是檢驗(yàn)操作出現(xiàn)問(wèn)題了?有時(shí)候感覺(jué)微生物檢驗(yàn)不確定因素太多了,比如同一個(gè)罐里同時(shí)取的原料(兩個(gè)平行樣),同時(shí)檢驗(yàn)得出的結(jié)果差距很大,一個(gè)有檢出一個(gè)沒(méi)檢出菌落,都不知道到底有沒(méi)有被污染?
      答:微生物不同其他的項(xiàng)目,比如一些理化指標(biāo),只要攪拌均勻了,數(shù)據(jù)的分布也是很均勻的,不會(huì)因取樣的位置變化而發(fā)生大的變化,但微生物就不一樣了,本來(lái)產(chǎn)品里面存在就少,還分布不均勻,而且樣品還經(jīng)過(guò)了稀釋,所以加入到培養(yǎng)基里面的試液是否含菌就很難說(shuō)。
      比如即使你取的樣品里面取到了含菌的部分,但最后做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候卻只是抽樣的一小部分,并且又經(jīng)過(guò)生理鹽水的稀釋,然后再?gòu)倪@個(gè)稀釋液里面取1ml去培養(yǎng),那這1ml里面能抽到菌體的可能性是多大呢?如果剛好抽到一個(gè),那培養(yǎng)之后就是一個(gè)菌落。防腐劑一般不殺菌。只有抑菌作用。

       

      12.無(wú)菌室有霉菌了,怎么除掉?采用施特白熏蒸后還是有霉菌,怎么辦?

      答:一般選擇進(jìn)行熏蒸和除濕,采用施特白季銨鹽還沒(méi)有氯有效,建議采用過(guò)氧乙酸熏蒸,并在熏蒸時(shí)把無(wú)菌室風(fēng)機(jī)關(guān)上,熏蒸完,靜置30分鐘再打開(kāi)風(fēng)機(jī)排棄。

       

      13.審核老師提出高壓蒸汽滅菌鍋需要考?jí)毫θ萜髯鳂I(yè)證去哪報(bào)名?

      答:市場(chǎng)監(jiān)管局或質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局的特種設(shè)備管理科室。

       

      14.哪些奶粉需要檢測(cè)阪崎腸桿菌?

      答:一般一段奶粉都需要,為保證其質(zhì)量,與其相關(guān)原輔料,包材以及與奶粉接觸的均需要,當(dāng)然包括奶粉量勺。依據(jù)GB10765-2010。

       

      15.食品大腸菌群檢測(cè),依照現(xiàn)在的國(guó)標(biāo)用什么培養(yǎng)基檢測(cè)?需要進(jìn)行復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)嗎?

      答:MPN法所用培養(yǎng)基為:初發(fā)酵為L(zhǎng)ST,復(fù)發(fā)酵是BGLB。平板計(jì)數(shù)法所用培養(yǎng)基為VRBA和BGLB。

       

      16.新版本的8538中的嚴(yán)格厭氧菌應(yīng)該使用那種呢,用雙歧桿菌是否可以呢,請(qǐng)教各位老師們!

      答:可以用雙歧桿菌。

       

      17.有人做過(guò)GB/T18204.4-2013公共用品用具的微生物檢測(cè)嗎,國(guó)標(biāo)寫(xiě)“公共場(chǎng)所用品用具每件用品采集2份樣“,因?yàn)槭俏锲凡煌课徊杉瘍煞荩敲醋鼍、金葡等檢測(cè)是兩份樣品都要用檢液測(cè)平行,還是隨機(jī)抽一份樣品做菌落平行,另一份樣品做其他項(xiàng)目?因?yàn)楣灿闷酚镁咭鼍、大腸、金葡、溶血鏈球、真菌,如果兩份樣都做同一項(xiàng)目平行樣品顯然不夠用,而且工作量大,還有該檢測(cè)大腸菌群用多少檢樣導(dǎo)入乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基,一定要10ml檢液?jiǎn)?另外想?wèn)問(wèn)公共衛(wèi)生的致病菌金葡與溶血性鏈球菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株是買(mǎi)什么編號(hào),第幾代的菌做陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)?請(qǐng)幫忙解答下,非常感謝!

      答:兩份不同部位隸屬于同一樣品,合二為一實(shí)驗(yàn)處理;是的大腸菌群檢液10ml;標(biāo)準(zhǔn)菌株編號(hào)參照GB 4789.28,工作菌株采用3、4代為宜。

       

      18.菌落總數(shù)等檢測(cè)項(xiàng)目用的稀釋液:225ml生理鹽水,這個(gè)時(shí)候的用的“生理鹽水”算培養(yǎng)基嗎? 如何做質(zhì)量驗(yàn)收?GB 4789.28《培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》 中也沒(méi)有提到。

      答:生理鹽水算自制培養(yǎng)基,要做配制記錄,但是驗(yàn)收只做供應(yīng)商和感官就好。把生理鹽水作為一種檢測(cè)用試劑,使用前填寫(xiě)配制記錄、滅菌記錄,沒(méi)有質(zhì)量驗(yàn)收一說(shuō),也可以。

       

      19.微生物培養(yǎng)箱需要定期消毒嗎?若消毒,消毒頻率如何定?用哪種消毒方式?

      答:①需要消毒。
      ②頻率自行規(guī)定,我們要求每周,有文件規(guī)定。
      ③可以用濕毛巾擦定后,再用一塊干燥的軟毛巾擦干,再噴灑75%的酒精。

      編輯:songjiajie2010

       
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