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      液體石蠟法

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-12-31  來源:CICC
      核心提示:液體石蠟法是定期傳代法輔助法。由于培養(yǎng)物表面覆蓋液體石蠟后可隔絕空氣,因此降低了微生物菌體的物質(zhì)代謝,延緩細(xì)胞的衰老,同時也防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā),是一種簡易的菌種保藏方法。

      亦稱礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,最適條件下培養(yǎng)至菌種長出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟,使其覆蓋整個斜面,再直立放置于低溫(4~6℃)干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。

      操作步驟如下:
      1 液體石蠟的準(zhǔn)備
      選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:
      121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無菌檢查后備用。
      160℃干熱滅菌2個小時,冷卻后,經(jīng)無菌檢查后備用。

      2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

      3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件下注入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。

      4 保藏
      4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時間2~10年。
      4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時補充無菌的液體石蠟。

      5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時,挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。
       

      編輯:songjiajie2010

       
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      關(guān)鍵詞: 液體石蠟法 菌種保藏
       

       
       
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