微載體培養(yǎng)技術（micro-carrier culture technique）于1967年被用于動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)。經(jīng)過三十余年的發(fā)展，該技術日趨完善和成熟，廣泛應用于生產(chǎn)疫苗、基因工程產(chǎn)品等。微載體培養(yǎng)是目前公認最具發(fā)展前途的一種動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術，其兼具懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點，且容易放大。該技術已廣泛用于培養(yǎng)各類型細胞，如293細胞、成肌細胞、Vero細胞、CHO細胞。

一、 微載體

微載體是指直徑60-250 μm，能適用于貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。常用商品化微載體有三種：Cytodex1、2、3，Cytopore和Cytoline。

二、微載體培養(yǎng)原理與操作

其原理是將對細胞無害的微載體顆粒加入培養(yǎng)容器的培養(yǎng)液中，作為載體，使細胞在微載體表面附著生長，同時通過持續(xù)攪動使微載體始終保持懸浮狀態(tài)。

貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖，要經(jīng)歷黏附貼壁、生長和擴增三個階段。細胞只有貼附在固體基質(zhì)表面才能增殖，因此細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展和生長的關鍵。細胞主要通過靜電引力和范德華力與微載體黏附，這取決于細胞與微載體的接觸概率和相融性。

由于動物細胞無細胞壁，對剪切力敏感，因此微載體培養(yǎng)在操作中對攪拌轉速及攪拌方式的要求都十分嚴格。微載體培養(yǎng)要求攪拌的速度非常慢，最大速度75 r/min。細胞微載體培養(yǎng)通常分為三個時期：貼壁期，過渡期和培養(yǎng)期。貼壁期和過渡期可以使用超低速細胞磁力攪拌系統(tǒng)進行培養(yǎng)，該系統(tǒng)具有超低的攪拌速度，剪切力小且能在低速下充分混勻細胞。

三、微載體培養(yǎng)的優(yōu)勢

產(chǎn)業(yè)化細胞培養(yǎng)首先需要提供足夠大的細胞生長面積，使培養(yǎng)容器單位容積所提供的細胞生長面積有所增加，從而提高疫苗和生化制劑的產(chǎn)量；其次需要加強和改善細胞培養(yǎng)的環(huán)境，有利于細胞生長；第三，細胞的均一化程度要高，在一個大發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)細胞，生長環(huán)境需一致。要滿足以上三點要求，常規(guī)的培養(yǎng)瓶靜態(tài)培養(yǎng)，甚至是轉瓶都很難滿足，而微載體培養(yǎng)技術則能很好的解決這些問題。

總結

綜上所述，微載體的優(yōu)勢可以歸納為以下幾點：表面積/體積大，單位體積培養(yǎng)液的細胞產(chǎn)率高；把懸浮細胞和貼壁細胞培養(yǎng)融合在一起，兼有兩者的優(yōu)點；可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表面的生長情況；簡化細胞生長過程中對各種環(huán)境因素的檢測和控制，重現(xiàn)性好；培養(yǎng)基利用率較高；放大容易；細胞收獲過程不復雜；勞動強度��；培養(yǎng)系統(tǒng)占地面積和空間小等。

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