因?yàn)橛米飨♂屢旱目瞻兹芤河幸欢ǖ乃釅A度,會(huì)影響滴定結(jié)果,所以要做空白試驗(yàn),來(lái)扣除空白的干擾。比如空白溶液為酸性,這時(shí)候用堿滴定此溶液,得到的結(jié)果會(huì)偏高,要扣除空白溶液的酸度,得到的酸度才正確。
高效液相色譜,色譜柱是Kromasil C18(15cm*5Um),流動(dòng)相為10%乙腈和90%三氟乙酸水,走空白色譜柱時(shí)在整個(gè)保留時(shí)間的中間位置出現(xiàn)較大的色譜峰,走了好幾針空白,每針的響應(yīng)都不同,有的很高,有的又很低,但雜峰一直存在,不像是色譜柱里有雜質(zhì),用流動(dòng)相沖洗后依然出現(xiàn)此問題,什么原因?
【原因】
1、確定檢測(cè)波長(zhǎng),如果是末端吸收,排除三氟乙酸的干擾。
2、使用100%乙腈作為流動(dòng)相,乙腈作為樣品進(jìn)樣,如果為基線,則說(shuō)明色譜柱及系統(tǒng)完好。
3、然后在換流動(dòng)相為10%乙腈和90%三氟乙酸水,樣品為乙腈,如果有上述“中間位置出現(xiàn)較大的色譜峰”,那說(shuō)明八成問題在三氟乙酸上,或者稀釋三氟乙酸的水上。
4、如果上述2、3都有“中間位置出現(xiàn)較大的色譜峰”,檢查檢測(cè)器及進(jìn)樣器。
5、這些還不能解決,請(qǐng)聯(lián)系工程師。
高效液相色譜儀,進(jìn)空白乙腈,在樣品峰位子出現(xiàn)倒峰,進(jìn)雙蒸水在樣品峰出現(xiàn)正峰,進(jìn)樣品時(shí)有雜峰干擾,我已經(jīng)排除了水和乙腈的問題,不知道是不是進(jìn)樣池或者檢測(cè)器污染了,已經(jīng)整了10多天,還是沒效果,請(qǐng)指教原因和解決辦法。
【分析】
液相中出現(xiàn)倒峰,主要原因是樣品吸收比流動(dòng)相吸收小,所以排除影響,不僅要考慮進(jìn)樣系統(tǒng)污染和檢測(cè)池污染,還要考慮流動(dòng)相和色譜柱的影響。換一根柱子試試,考察系統(tǒng)的情況,如果照舊,就排除色譜柱的影響,然后更換流動(dòng)相試試,再以后清洗進(jìn)樣系統(tǒng)和檢測(cè)池等等。
或?qū)⑸V柱從系統(tǒng)中斷開,直接用乙腈或水做流動(dòng)相清洗檢測(cè)器就可以知道是否是檢測(cè)器受污染,如果基線正常,再檢查你的進(jìn)樣系統(tǒng),樣品,前處理是否有問題,如果都沒問題,就去檢查色譜柱吧。
石墨爐測(cè)鉛時(shí),空白(4硝酸+1高氯酸GR)值總是較高,與灰化法的結(jié)果不大一致(樣品為植物樣)。
【分析】
1. 所用的水為用石英亞沸水蒸餾器蒸餾得到的,先打一下空白,一般不會(huì)超過0.0015,然后采用的為硝酸(工藝超純)和高氯酸(優(yōu)極純)消化,最后溶解用的1摩爾每升的鹽酸或硝酸(結(jié)果差不多,只是鹽酸穩(wěn)定性要好一點(diǎn)),定容體積為50mL的話空白值一般為0.03左右。不過鉛比較難做,基體干擾很大。
2. 空白問題來(lái)自多方面,上面說(shuō)的水與試劑外,你用的氬氣是高純的嗎?也可用高純氮?dú)猓⒁夥肿訋П尘啊?/span>
3. 可能來(lái)自由你所用的硝酸和高氯酸不純所致。你可以先測(cè)空管,然后測(cè)你所用的水,再測(cè)含酸的水空白看看就知道了
4.有可能是試液的酸度過大會(huì)影響測(cè)定,特別是使用高氯酸,影響更大,酸度大對(duì)石墨爐損害也比較大。對(duì)于石墨爐測(cè)定鉛,濕法消化最好使用微波消化,使用硝酸和雙氧水,這樣空白中酸度比較容易控制,空白也比較低。
5. a.實(shí)際Pb含量有出入,廠家就沒有測(cè)準(zhǔn);b.你的儀器可能沒有調(diào)制最佳。
PS:石墨爐測(cè)鉛使用高氯酸加+硝酸消解的樣品測(cè)定空白不穩(wěn)定而且很高,這個(gè)故障的實(shí)際問題不是試劑不純引起的,是因?yàn)樵谙鈺r(shí)無(wú)論如何趕酸都很難完全把高氯酸除去,因?yàn)楦呗人崾歉叻悬c(diǎn)酸。這樣在最后分析樣品時(shí)殘留的酸就是高氯酸。高氯酸會(huì)在石墨爐升溫灰化階段分解出氧氣和氯化氫。一方面氯離子會(huì)在最后原子化階段產(chǎn)生非特征吸收,另一方面氧氣會(huì)和石墨管中的石墨反應(yīng)燒蝕石墨管。所以石墨管測(cè)定含高氯酸的樣品損壞速度特別快。相對(duì)來(lái)說(shuō)高密石墨管壞的比涂層管和平臺(tái)管都快的多,基本用不過20次就斷了。這才是造成實(shí)驗(yàn)不穩(wěn)定的真實(shí)原因。
1.測(cè)定介質(zhì)的選擇及濃度的影響
選擇HNO3、HCl、HClO4、H3PO4和H2SO4等進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明:以HClO4和H3PO4作介質(zhì)響應(yīng)值較低,汞在H2SO4溶液中能得到較大靈敏度,但空白值也高。汞在HNO3和HCl溶液中的熒光強(qiáng)度差別不大。在5%一25%的硝酸和5%一20%的鹽酸中熒光強(qiáng)度基本穩(wěn)定。
2.酸的影響
作為原子熒光的載流和標(biāo)準(zhǔn)試劑的基體,酸對(duì)原子熒光的影響十分的突出。一般在原子熒光中使用的酸主要有兩種-鹽酸和硝酸。我們習(xí)慣上使用鹽酸。如果購(gòu)買市場(chǎng)上質(zhì)量差的酸,對(duì)空白的影響要大得多。
3.還原劑的影響
作為原子熒光的還原劑,一般使用最多的是硼氫化鉀或硼氫化鈉,在原子熒光法中,還原劑對(duì)樣品以及空白值的影響主要體現(xiàn)在它的用量。硼氫化鉀濃度不宜超過3.0%。實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)硼氫化鈉濃度為1%時(shí),靈敏度和穩(wěn)定性好,并且有效消除干擾。
4.燈電流的影響
一般來(lái)說(shuō)燈電流與負(fù)高壓對(duì)原子熒光的影響是同方向的。提高燈電流,空白值就相應(yīng)的提高?瞻字堤蟮脑,可以適當(dāng)?shù)慕档碗娏髦,使儀器的靈敏度降低,減少標(biāo)準(zhǔn)空白的背景值,使所測(cè)的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠,但是如果電流過小,靈敏度也將變小,對(duì)所測(cè)樣品的影響就會(huì)增加,所以選擇合適的燈電流,保證一定的空白值與靈敏度才是關(guān)鍵。
5.載氣的影響
實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)氬氣流速較低時(shí),測(cè)定的靈敏較高.但結(jié)果的變動(dòng)性加大,實(shí)際測(cè)定取氬氣流速200ml/hifn,此時(shí)測(cè)定的靈敏度較高,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差可以接受。
1、試劑的配制
堿性過硫酸鉀的配制過程十分重要,掌握不好,會(huì)影響消解效果,對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。配制該溶液時(shí),可分別稱取過硫酸鉀和氫氧化鈉,兩者分開配制,再混合定容,或者先配制氫氧化鈉溶液,待其溫度降到室溫后再加入過硫酸鉀溶解。若二者在一只燒杯中溶于水,應(yīng)緩慢加水,同時(shí)攪拌,防止氫氧化鈉放熱使溶液溫度過高引起局部過硫酸鉀失效。
2、玻璃器皿的洗滌
所使用的玻璃器皿應(yīng)先用(1+9)鹽酸浸泡后,再用無(wú)氨水沖洗數(shù)次才能使用,否則,也會(huì)造成空白值偏高或平行性較差的情況。
3、比色時(shí)的注意事項(xiàng)
該項(xiàng)目的測(cè)定涉及兩個(gè)波長(zhǎng)(220nm和275nm),建議在測(cè)定完一組樣品的同一波長(zhǎng)后,再調(diào)整到另一波長(zhǎng),統(tǒng)一測(cè)定,不要測(cè)完一個(gè)樣品的兩個(gè)吸光度后再換另一個(gè)樣品,這樣反復(fù)調(diào)整波長(zhǎng)會(huì)引起一定的測(cè)量誤差。
4、試劑的選擇
堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法測(cè)定總氮的過程中,過硫酸鉀是至關(guān)重要的試劑。首先,試劑的純度關(guān)系到空白值的高低、測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度。一般普通分析純過硫酸鉀的總氮含量最高不超過0.005%,但由于試劑質(zhì)量存在差異,有些廠家、批次的試劑含氮量常常達(dá)不到這個(gè)要求,致使空白值偏高。因此,有條件的話建議使用優(yōu)級(jí)純?cè)噭M量降低試劑中的含氮量,從而降低實(shí)驗(yàn)空白值。
5、實(shí)驗(yàn)用水及試劑的質(zhì)量檢驗(yàn)
若實(shí)驗(yàn)的空白值不夠理想,則需要對(duì)實(shí)驗(yàn)用水及試劑進(jìn)行檢驗(yàn),以選擇出含氮量最低的水和試劑,獲得理想的空白值。
粗蛋白測(cè)定空白偏高的影響因素?
可以從以下方面考慮:
1.配溶液的水換沒換;
2.看看消化爐的回收率;
3.看看蒸餾儀的回收率;
4.鹽酸在不在保質(zhì)期內(nèi);
5.配溶液的硫酸是不是有問題;
6.檢查催化劑,是不是含有硝酸鉀。
空白試驗(yàn)是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié),其準(zhǔn)確性對(duì)提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度至關(guān)重要。以分光光度法空白為例 ,要用相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)用純水或有機(jī)溶濟(jì)作參比,不能用空白實(shí)驗(yàn)溶液做參比,以免人為減小空白值,從而掩蓋空白實(shí)驗(yàn)值的變異。
值得注意的是,通過計(jì)量認(rèn)證的實(shí)驗(yàn)室,由于檢測(cè)儀器和玻璃量器定期檢定 ,以及采取了全面的質(zhì)量管理措施,因此,若測(cè)定的空白實(shí)驗(yàn)值太大,一般是化學(xué)藥品純度不夠,配制的試液變質(zhì)或被污染等原因 。應(yīng)重新配制試液 ,返工重測(cè)該批樣品 ,直至空白實(shí)驗(yàn)值合格。