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| 一、目的要求 |
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1、了解電子捕獲檢測(cè)器（ECD）的檢測(cè)原理和使用方法。
2、掌握農(nóng)藥殘留量的測(cè)定方法。
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| 二、基本原理 |
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ECD是一種選擇性檢測(cè)器，對(duì)含X、S、P、N、O電負(fù)性強(qiáng)的物質(zhì)，影響很大，而對(duì)非電負(fù)性物質(zhì)，則影響很小。
放射源（3H或63Ni）產(chǎn)生的B射線將載氣N2電離成正離子和電子，這些離子和電子在電場(chǎng)作用下形成“基流”。當(dāng)電負(fù)
性樣品進(jìn)入檢測(cè)器后，便捕獲自由電子，形成的負(fù)離子和載氣的正離子結(jié)合為中性分子，以使基流下降，產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的
負(fù)信號(hào)——倒峰。在一定范圍內(nèi)，檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)和樣品組分的濃度成正比。
六六六、DDT是目前用量叫大的有機(jī)農(nóng)藥，其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，施用后殘留在大氣、土壤、水體、植物中不易消失，對(duì)
人體健康不利。
本法利用己烷提取樣品，采用0.23%OV-17和2.8%OV-210混合固體液分離，ECD檢測(cè)器，外標(biāo)法定量。
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| 三、儀器與試劑 |
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儀器：氣相色譜儀，ECD；離心機(jī)；布氏漏斗；0.5*22cm玻璃層析柱；1000ml分液漏斗2只
試劑：無(wú)水硫酸鈉、硫酸鈉、己烷、丙酮、濃硫酸(均為AR)；硅藻土(30—30目)、OV—17、OV—210(色譜級(jí))、
Chromosorb WAW—DMCS；α-666、β-666、γ—666、δ—666、p，p＇—DDE、o，p一DDT、p，p＇一DDD，p，p＇
—DDT。?
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| 四、實(shí)驗(yàn)步驟 |
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1．色譜條件：
Φ3mm×2m玻璃柱，固定相：o．23％OV—17+2．8％OV—210，Chromosorb?? W，AW一DMGS，80~100目
；Tc=200℃，TD=210℃，Ti=230℃；載氣：N2? (99．99％)，60~70ml／min ；放大器高阻108Ω脈沖間隔50μs。
2．試樣的提取和凈化：
將洗凈后的蔬菜或水果切碎，并充分混合稱取l00g樣品放入搗碎缸中，加己烷200ml，丙圍50ml，快速搗碎2min。
將漿液倒入500m1離心懷中，用少許蒸餾水沖洗搗碎缸并入離心杯，在3000r／min的離心機(jī)中，離心15min，離心液用
布式漏斗過(guò)濾，用己烷沖洗離心懷，并經(jīng)布式漏斗過(guò)濾，濾液倒入1000mI分液漏斗使其分層。
將水層分到第二個(gè)1000m1分液漏斗中。己烷層用500m12％硫酸鈉振搖1min，使其靜止分層。再將水層并入第二個(gè)分
液漏斗中，加50mI己烷輕輕搖2min，靜止棄去水層。最后將兩個(gè)分液漏斗中的己烷提取液都通過(guò)裝有無(wú)水硫酸鈉的簡(jiǎn)形
漏斗，濾入250m1三角瓶中。提取液在水浴上濃縮到20一30mI左右，用己烷定容到50ml。
從50mI容量瓶中吸出5mI提取液在氮?dú)饬髦袧饪s到1m1后倒入層析柱中凈化。層析柱為0.5cm×22cm玻璃管，內(nèi)裝硅
藻土(1g硅藻土滴加0.6mI的濃硫酸混和)，柱的底部放一段經(jīng)己烷洗滌過(guò)的破璃棉，硅藻土層的頂端放入少許無(wú)水硫酸
鈉。洗滌濃縮器的己烷也倒入層析柱中，然后用己烷沖洗柱，用25m1容量瓶收集。??
自25m1容量瓶中吸取一定體積的凈化溶液，經(jīng)濃縮即可進(jìn)樣分析。
3．儀器調(diào)試：
(1) 將載氣調(diào)至需要量，接通主機(jī)電源；
(2) 先升檢測(cè)器溫度，再升汽化室溫度和柱溫； 打開(kāi)微電流放大器“電源”開(kāi)關(guān)和放大器開(kāi)先，靈敏度高阻
為108Ω，衰減調(diào)到適當(dāng)位置，“基補(bǔ)”-“零調(diào)”開(kāi)關(guān)放在‘基補(bǔ)”上；
(３) 打開(kāi)“脈沖電源”開(kāi)頭，“μs選擇”調(diào)到50μs；
(４) 打開(kāi)記錄儀電源和記錄筆開(kāi)關(guān)，調(diào)“基補(bǔ)”電位器，把記錄筆調(diào)到0.8一0.95位置。
(５) 檢查基流時(shí)，“脈沖電源”開(kāi)關(guān)處于關(guān)位置，記錄筆指針向零點(diǎn)方向移動(dòng)(否則應(yīng)改變“正”“負(fù)”開(kāi)關(guān)位置)，
指針移動(dòng)量應(yīng)在記錄儀量程范圍6內(nèi)，但不應(yīng)小于0.1mV；
(６) 各恒溫器穩(wěn)定后，就可進(jìn)樣分析。
4．標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：
用己烷配制“α—666、β—666、γ—666、δ—666、p，p＇—DDE、o，p一DDT、p，p＇一DDD，p，p＇—DDT各
為l00ppm(β—666要先用少量蒸苯溶解)的貯備液。 操作溶液濃度與樣品濃度相近。
5．色譜測(cè)定：
(1)用各種濃度的六六六、DDT標(biāo)準(zhǔn)溶液注入色譜儀，以確定ECD的線性范圍；
(2)進(jìn)樣品溶液，根據(jù)樣品的峰高，用標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制濃度相近的操作溶液；
(3)在相同色譜條件下，依次進(jìn)樣品和標(biāo)樣，記錄tR和色譜圖。
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| 五、數(shù)據(jù)處理 |
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根據(jù)色譜圖測(cè)量蜂高，計(jì)算蔬菜和水果中的六六六、DDT的含量。
ci? ／ hs*Wi*K(mg/kg)=hi*cs*Ws?
式中：
ci——樣品中農(nóng)藥的濃度；
hi——扣除試劑空白后的峰高；
Ws—一標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣邑；
Wi——樣品溶液進(jìn)樣量；
hs——標(biāo)準(zhǔn)溶液峰高；
cs——標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg／kg )，
K——濃縮系數(shù)
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| 六、問(wèn)題討論 |
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1．脈沖間隔對(duì)測(cè)定有何影響？如何選擇？
2．如何防止ECD的污染？
3．所用的注射器和玻璃器皿為什么不能用丙酮、氯仿等洗滌？
4．測(cè)定時(shí)為什么要先確定ECD的線性范圍？
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| 七、注意事項(xiàng) |
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1.使用ECD時(shí)應(yīng)采用高純度載氣，并經(jīng)凈化處理。
2．新裝填的色譜柱必須在高于使用溫度的條件下充分老化，未老化好絕對(duì)不得與ECD相連。
3．使用ECD時(shí)，如短時(shí)間停機(jī)，不要關(guān)閉載氣，只將載氣流速降低。
4．所用的注射器、玻璃儀器等，必須用烴類溶劑充分洗凈，絕對(duì)不能用丙酮、氯仿等洗滌。
5．萃取中出現(xiàn)乳化現(xiàn)象時(shí)，可采用冰凍、離心、吸濾等方法破乳化。有機(jī)相中水較多時(shí)可加少許無(wú)水硫酸鈉脫水。
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