高效液相色譜儀分析中保留時(shí)間不重現(xiàn)的可能原因:
1 確認(rèn)流動(dòng)相是否新鮮配制的,比例有無(wú)錯(cuò)誤。
2 確認(rèn)色譜條件是否在色譜柱使用范Χ內(nèi),如pH范Χ、溫度和壓力。
3 仔細(xì)觀察柱前壓的變化。如果壓力穩(wěn)定,可以判斷泵系統(tǒng)û有問(wèn)題。如果壓力不穩(wěn)定,通常是由于泵內(nèi)有氣泡造成的,一定會(huì)影響保留時(shí)間。將流動(dòng)相仔細(xì)脫氣,并排出泵內(nèi)氣泡。
4 觀察色譜峰形和柱效變化情況,確認(rèn)色譜柱是否被污染。如果色譜柱被污染,可使用適當(dāng)溶劑沖洗。
5 如果同時(shí)伴有色譜柱柱壓升高,降低柱壓。
6 如果使用梯度洗脫,確認(rèn)平衡時(shí)間是否足夠長(zhǎng)。流動(dòng)相中使用離子對(duì)試劑(烷基磺酸鈉等)或固定相為正相硅膠等往往需要更長(zhǎng)的平衡時(shí)間。
7 確認(rèn)樣品是否過(guò)載。
8 組分在色譜柱中保留不夠。調(diào)整色譜條件,使樣品在柱上適當(dāng)保留。