首先，如果要是想在色譜中使用柱前衍生化，其衍生化反應(yīng)應(yīng)該滿足以下幾個(gè)條件：

1、反應(yīng)能迅速、定量的進(jìn)行，反應(yīng)重復(fù)性好，反應(yīng)條件不苛刻，容易操作；

2、反應(yīng)的選擇性高，最好只與目標(biāo)化合物反應(yīng)，即反應(yīng)具有專一性；

3、衍生化反應(yīng)產(chǎn)物只有一種，反應(yīng)的副產(chǎn)物和過量衍生化試劑不干擾目標(biāo)化合物的分離與檢測；

4、衍生化試劑方便易得，通用性好。

（1）甲醇法：有機(jī)酸與甲醇在催化劑條件下加熱，發(fā)生酯化反應(yīng)，生成有機(jī)酸甲酯。一般采用三氟化硼作催化劑，通常將三氟化硼通入甲醇配制酯化劑，因?yàn)榕渲眠^程中以放熱，有一定的危險(xiǎn)性，現(xiàn)在也有商品化的三氟化硼甲醇溶液可直接購買使用。

（2）重氮甲烷法：重氮甲烷可以與有機(jī)酸反應(yīng)生成有機(jī)酸甲酯放出氮?dú)�。此法簡便有效，反�?yīng)速度快，轉(zhuǎn)化率高，較少副反應(yīng)，不引入雜質(zhì)，但是反應(yīng)要在非水介質(zhì)中進(jìn)行。雖然反應(yīng)條件溫和，但是重氮甲烷不穩(wěn)定，有爆炸性、有毒，制備與使用時(shí)要特別小心。另外，酚羥基在常溫下可以與重氮甲烷反應(yīng)，但在0℃下可以避免酚羥基反應(yīng)。

（3）三氟乙酸酐法： 在三氟乙酸酐的存在下有機(jī)酸和酸可以反應(yīng)生成酯，比較適合空間位阻較大的有機(jī)酸和醇或酚的酯化。

（4）其他酯化法：有時(shí)為了提高方法的靈敏度和選擇性，需要制備甲酯之外的酯，方法與甲酯化方法類似，可以用重氮乙烷、重氮丙烷、重氮甲苯代替重氮甲烷以制得相應(yīng)的酯，且這些實(shí)際的穩(wěn)定性好、爆炸性小。用三氟化硼的丙醇、丁醇或戊醇溶液與有機(jī)酸反應(yīng)也可以制得相應(yīng)的丙酯、丁酯或戊酯。

�；�能降低羥基、氨基、巰基的極性，改善這些化合物的色譜性能，并提高這些化合物的揮發(fā)性，增加某些易氧化化合物的穩(wěn)定性。當(dāng)酰化時(shí)引入含有鹵離子的�；鶗r(shí)，還可以提高使用ECD檢測器的靈敏度。常用的酰化試劑有酰鹵、酸酐和反應(yīng)活性的�；�物。

（1）乙�；�法：標(biāo)準(zhǔn)乙酰化法是將樣品溶于氯仿中，與乙酸酐和乙酸在50℃反應(yīng)2-6h，真空出去剩余試劑。還可以乙酸鈉為堿性催化劑，以乙酸酐為乙�；�試劑進(jìn)行乙酰化反應(yīng)，用于糖類分析。吡啶、三甲胺、甲基咪唑也可以作為堿性催化劑。乙酰化反應(yīng)通常在非水介質(zhì)中進(jìn)行，但是胺類和酚類化合物乙�；瘯r(shí)可在水溶液中進(jìn)行。

（2）多氟酰化法：常用的多氟化試劑是三氟乙酰（TFA）、五氟丙酰（PFP）和七氟丁酰（HFB），其活性是TFA>PFP>HFB。TFA和PFP的衍生物揮發(fā)性較強(qiáng)，而HFB的衍生物ECD靈敏度較高。多氟�；�反應(yīng)時(shí)間除了取決于多氟�；�試劑的活性，還取決于目標(biāo)化合物的活性。多數(shù)情況下氟�；�反應(yīng)不需溶劑，但有些情況下也是需要溶劑的，此外有時(shí)還需要加堿性催化劑。

在目標(biāo)化合物中引入鹵原子后可使用ECD檢測器，提高檢測的靈敏度，同時(shí)可以改善揮發(fā)性和穩(wěn)定性，常用的鹵化衍生化方法如下：

（1）鹵素法：用鹵素直接作為衍生化試劑處理樣品，鹵素的作用是加成或取代。

（2）鹵化氫法：常用HCl和HBr為衍生化試劑與不飽和鏈發(fā)生加成反應(yīng)或與羥基發(fā)生置換反應(yīng)。