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      三聚氰胺檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2011-03-14  來(lái)源:北京華安麥科生物技術(shù)有限公司
      核心提示:三聚氰胺檢測(cè)試劑盒

      一、概要
      三聚氰胺是一種低毒、無(wú)味的純白色單斜棱晶體,形似蛋白粉,屬于三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物,廣泛應(yīng)用于塑料、染料、化肥的生產(chǎn)和紡織行業(yè)。由于三聚氰胺分子含氮量很高,只要添加到食品中就可在檢測(cè)中造成蛋白質(zhì)含量較高的假象。目前在飼料、牛奶、奶粉、餅干、奶糖等相關(guān)產(chǎn)品均發(fā)現(xiàn)有三聚氰胺殘留現(xiàn)象。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,三聚氰胺的攝入可能會(huì)導(dǎo)致繁殖障礙、膀胱炎、慢性腎炎、腎結(jié)石、甚至膀胱癌,F(xiàn)有的檢測(cè)三聚氰胺方法如液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、質(zhì)譜電噴射離子技術(shù)其樣品前處理復(fù)雜、所需儀器昂貴、操作復(fù)雜、耗費(fèi)時(shí)間。而使用三聚氰胺ELISA試劑盒能夠既快速又準(zhǔn)確的分析樣品中三聚氰胺殘留。
      三聚氰胺檢測(cè)試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測(cè)產(chǎn)品,操作時(shí)間短于45min,能最大限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。

      二、試驗(yàn)原理
      三聚氰胺檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被三聚氰胺抗原,樣本殘留的三聚氰胺和微孔條上預(yù)包被的抗原競(jìng)爭(zhēng)抗三聚氰胺抗體,同時(shí)三聚氰胺抗體與酶標(biāo)二抗相結(jié)合,加入TMB底物顯色,樣本吸光值與其殘留物三聚氰胺成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中三聚氰胺的含量。
      適用范圍:
      三聚氰胺檢測(cè)試劑盒可定性、定量檢測(cè)牛奶、奶粉、飼料、動(dòng)物組織和雞蛋等樣本中三聚氰胺的殘留量。
      交叉反應(yīng)率:
      三聚氰胺………………………………………………100%

      三、檢測(cè)步驟:
      1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
      2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔放入自封袋,保存于2~8℃。
      3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
      4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
      5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50l/孔到對(duì)應(yīng)的微孔中,再加入酶標(biāo)物50l/孔,再加入抗試劑50l/孔輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
      6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液300l/孔,充分洗滌5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。
      7、顯色:加入底物液A液50l/孔,再加底物液B液50l/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫25℃避光環(huán)境反應(yīng)15min。
      8、測(cè)定:加入終止液50l/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值。(若無(wú)酶標(biāo)儀,則不加終止液用目測(cè)法可進(jìn)行判定)。

      四、檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度
      試劑盒靈敏度:10ppb
      樣本最低檢測(cè)限:
      牛奶………………………………………………100ppb
      雞蛋………………………………………………100ppb
      組織………………………………………………100ppb
      奶粉……………………………………………  500ppb
      飼料……………………………………………  500ppb
      回收率:
      牛奶………………………………………………… 110±10%
      雞蛋………………………………………………… 90±10%
      組織………………………………………………… 80±10%
      奶粉………………………………………………… 80±10%
      飼料………………………………………………… 80±10%
      精密度:
      試劑盒的變異系數(shù)均小于10%

      五、貯藏條件及保存期
      貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。
      保存期:該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。
      編輯:songjiajie2010

       
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