一、用途

沙門氏菌乳膠凝集檢測(cè)試劑用于確證鑒定選擇性平板上分離出的可疑菌落。該試劑盒僅供專業(yè)人員使用。

二、原理

乳膠顆粒表面包被與沙門氏菌特異性抗原具有特異性的多價(jià)抗血清。與沙門氏菌菌懸液混合后，乳膠顆粒可迅速凝集。HKM^®沙門氏菌乳膠凝集試劑盒可檢測(cè)99%以上的有動(dòng)力的沙門氏菌和特定的無(wú)動(dòng)力沙門氏菌。

三、試劑盒組成成分

REAG TEST  測(cè)試試劑　HM42a 沙門氏菌乳膠試劑　2.5mL

乳膠顆粒包被沙門氏菌抗原相應(yīng)的兔抗血清。含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。（藍(lán)色瓶蓋）

CONTROL +  陽(yáng)性對(duì)照試劑　HM42b　陽(yáng)性對(duì)照　　0.5mL

無(wú)活性的沙門氏菌抗原，含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。（黑色瓶蓋）

NaCl 0.85%   0.85%鹽水　HM40　0.85%生理鹽水　5.0mL

含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。（白色瓶蓋）

使用說(shuō)明書

檢測(cè)板

攪拌棒

需要的其它材料

l      接種環(huán)

l      移液器

四、警告和注意事項(xiàng)

安全：

1、試劑僅供體外診斷使用。

2、試劑盒作防腐劑使用的疊氮化鈉可與鉛或銅制品反應(yīng)形成易爆的金屬疊氮化物�？捎么罅克疀_洗以避免疊氮化物的堆積。

3、在處理或檢測(cè)可疑致病菌時(shí)應(yīng)采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。含酸的廢液應(yīng)作中和處理。

4、陽(yáng)性對(duì)照液在生產(chǎn)中已作惰性處理，但在使用中依然應(yīng)小心處理。

檢測(cè)過(guò)程：

1、試劑盒應(yīng)按說(shuō)明書使用。

2、所有試劑在使用前應(yīng)達(dá)到室溫。

3、不要稀釋試劑盒內(nèi)的任何試劑

4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。

5、不要冷凍試劑盒內(nèi)的試劑。

6、不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到陽(yáng)性對(duì)照試劑或細(xì)菌樣品。

7、注意凝集狀態(tài)，呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實(shí)凝集。

8、使用前應(yīng)確保檢測(cè)板清潔干燥。

五、貯存及保質(zhì)期

檢測(cè)試劑盒不使用時(shí)應(yīng)貯存在2～8℃，并應(yīng)在包裝盒標(biāo)簽上的有效期內(nèi)使用檢測(cè)試劑。

六、樣本

可檢測(cè)選擇性分離平板上的沙門氏菌可疑菌落。

七、檢測(cè)過(guò)程

質(zhì)量控制：

在每次使用檢測(cè)試劑盒前應(yīng)作下列質(zhì)量控制檢測(cè)，以確證試劑的有效性。

1、檢測(cè)試劑的控制：滴1滴測(cè)試試劑(HM42a)和1滴生理鹽水(HM40)于同一個(gè)測(cè)試反應(yīng)環(huán)內(nèi)，用攪拌棒在整個(gè)區(qū)域內(nèi)混勻液體，輕搖檢測(cè)板2分鐘并觀察是否會(huì)出現(xiàn)凝集。如果出現(xiàn)凝集反應(yīng)，表明檢測(cè)試劑或生理鹽水受到污染，應(yīng)廢棄處理。

2、陽(yáng)性對(duì)照的控制：滴1滴陽(yáng)性對(duì)照試劑(HM42a)和1滴測(cè)試試劑(HM42a)于同一個(gè)測(cè)試反應(yīng)環(huán)內(nèi)，不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到陽(yáng)性對(duì)照試劑。用攪拌棒在整個(gè)區(qū)域內(nèi)混勻液體，輕搖檢測(cè)板2分鐘，應(yīng)觀察到凝集反應(yīng)。如果未出現(xiàn)凝集反應(yīng)，應(yīng)采用新鮮的檢測(cè)試劑盒。

測(cè)試程序：

1、滴1滴生理鹽水(HM40)于檢測(cè)板的一個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。

2、用接種環(huán)從選擇性分離平板上挑取可疑菌落，與反應(yīng)環(huán)內(nèi)的生理鹽水混合，形成均勻的混濁的菌懸液。

3、輕搖檢測(cè)板2分鐘，觀察是否會(huì)出現(xiàn)自動(dòng)凝集現(xiàn)象。如果菌懸液保持均勻狀態(tài)，繼續(xù)第4步。

4、搖勻乳膠測(cè)試試劑后，滴1滴于已滴加菌懸液的反應(yīng)環(huán)內(nèi)，不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到菌懸液。

5、用1支干凈的攪拌棒混勻菌懸液和測(cè)試試劑，輕搖檢測(cè)板2到3次，在2分鐘內(nèi)觀察凝集結(jié)果。

6、記錄結(jié)果后，將攪拌棒和檢測(cè)板進(jìn)行適當(dāng)?shù)南�毒處理�?/span>

八、結(jié)果說(shuō)明

在2分鐘內(nèi)出現(xiàn)凝集，表明樣品中有沙門氏菌，如不出現(xiàn)凝集，表明測(cè)試菌落中無(wú)沙門氏菌。

九、使用的局限性

1、結(jié)果應(yīng)依據(jù)所有的臨床或?qū)嶒?yàn)室信息進(jìn)行判斷。

2、沙門氏菌的粗糙菌株可在生理鹽水中形成非特異性自動(dòng)凝集，因此不可用乳膠試劑盒檢測(cè)。

3、不能檢測(cè)部分無(wú)動(dòng)力沙門氏菌。

4、有些氧化酶陽(yáng)性菌株可能引起假陽(yáng)性凝集結(jié)果。

5、保存較長(zhǎng)時(shí)間的腸桿菌科的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物可引起非特異性凝集，而保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的沙門氏菌可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此檢測(cè)菌株應(yīng)為新鮮培養(yǎng)物。

6、乳膠凝集檢測(cè)為初步鑒定結(jié)果，所有的陽(yáng)性結(jié)果的純培養(yǎng)物應(yīng)作進(jìn)一步的鑒定分析和血清分型。

十、檢測(cè)效果對(duì)比

HKM^® 沙門氏菌乳膠試劑盒與一種已廣泛使用的商業(yè)化的乳膠試劑盒檢測(cè)效果對(duì)比，用二種產(chǎn)品檢測(cè)126株沙門氏菌和58株潛在交叉反應(yīng)的菌株。

靈敏度　135/136＝99.3%

特異性　48/48＝100%

一致性　183/184＝99.5%

1^＊一個(gè)樣品在HKM^®檢測(cè)試劑中呈陰性結(jié)果，在對(duì)比檢測(cè)試劑中呈可凝結(jié)果。樣品最終鑒定為bergen沙門氏菌

^＊＊135株分離菌株中，11株在2種試劑盒均存在交叉反應(yīng)。它們分別為：差異檸檬酸桿菌1株、鮑氏不動(dòng)桿菌2株、斯氏普羅威登氏菌1株、蠟樣芽孢桿菌2株、金黃色葡萄球菌4株、鏈球菌1株。以上所有交叉反應(yīng)的菌株中，均不會(huì)在沙門氏菌選擇性分離平板上生長(zhǎng)或生長(zhǎng)時(shí)菌落呈現(xiàn)非典型的沙門氏菌菌落形態(tài)。蠟樣芽孢桿菌凝集時(shí)為非典型凝集，（呈纖維狀。）

^＊＊＊1株都伯林沙門氏菌在二種試劑盒均重復(fù)性的出現(xiàn)陰性結(jié)果。

十一、重復(fù)性

批內(nèi)重復(fù)性：通過(guò)以系列稀釋度的參照抗原和試劑盒對(duì)照抗原及一組34個(gè)細(xì)菌樣品盤對(duì)同1批產(chǎn)品的靈敏度和特異性進(jìn)行檢測(cè)。由不同的操作者隨機(jī)測(cè)試3次，最終效價(jià)由參照/對(duì)照抗原測(cè)定，并且3次定性分析結(jié)果完全一致。