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      液相核酸分子發(fā)光液相雜交

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06
        1 能量傳遞法:Heller等設(shè)計(jì)用兩個(gè)緊接的探針,一個(gè)探針的一端用化學(xué)發(fā)光基團(tuán)(供體)標(biāo)記,另一個(gè)探針的一端用熒光物質(zhì)標(biāo)記,并且這兩個(gè)探針靠得很近。兩個(gè)靠得很近的探針用不同的物質(zhì)標(biāo)記(標(biāo)記光發(fā)射),當(dāng)探針與特異的靶雜交后,這些標(biāo)記物靠得很近。一種標(biāo)記物發(fā)射的光被另一種標(biāo)記物吸收,并重新發(fā)出不同波長的光,調(diào)節(jié) 檢測器使自動(dòng)記錄第二次發(fā)射光的波長。只有在兩個(gè)探針分子靠得近時(shí),才能產(chǎn)生受激發(fā)光,因此這種方法具有較好的特異性。
       2 吖啶翁酯標(biāo)記法:吖啶翁酯標(biāo)記探針與靶核酸雜交后,未雜交的標(biāo)記探針分子上的吖啶翁酯可以用專門的方法選擇性除去,所以雜交探針的化學(xué)發(fā)光是與靶核酸的量成比例的。該法的缺點(diǎn)是檢測的敏感度低(約1ng的靶核酸),僅適用于檢測擴(kuò)增的靶序列,如rRNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。
       

       

       
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