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      聚丙烯酰胺凝膠電泳

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
      聚丙烯酰胺凝膠電泳可用于分析和制備小于1Kb長(zhǎng)度的DNA片段。聚丙烯胺凝膠多用垂直平板電泳,準(zhǔn)備凝膠時(shí),先配制30%單體母液(29克丙烯酰胺,1克雙丙烯酰胺,加水溶解,定容至100ml),再用它來(lái)配制所需濃度的凝膠。每100ml上述液體加30μl四甲基乙胺(TEMED),混勻后即可灌注于予先準(zhǔn)備好的潔凈不滲漏的凝膠玻板,待凝膠灌至近頂端時(shí),立即插入合適的“梳子”,放室溫聚合60分鐘,若冬天室溫太低,則可放37度溫箱內(nèi),以促進(jìn)聚合。聚合完成后,拔出“梳子”,將凝膠板固定于電泳槽中,向電泳槽傾入1×TBE,用滴管沖洗加樣孔和凝膠底部以除去氣泡,即可加樣電泳。一般所用電壓1-8v/cm,隨時(shí)觀察標(biāo)記染料的遷移。電泳結(jié)束,從電槽中取出玻板并小心地撬開(kāi),凝膠浸于溴化乙錠液(0.5μg/ml1×TBE)染色,45min后放紫外燈下觀察電泳結(jié)果。
       

       

       
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