細(xì)胞融合的方法有物理法,如電融合、激光融合,化學(xué)融合法和生物融合法,如仙臺病毒,此處例舉化學(xué)融合法中的一種即聚乙二醇融合法。
聚乙二醇(PEG),在分子量為200~700時(shí),呈無色、無臭的粘稠狀液體,分子量大于1 000時(shí),呈乳白色蠟狀固體,能溶于水、乙醇及其他許多有機(jī)溶劑,對熱穩(wěn)定,與許多化學(xué)藥品不起作用。用作細(xì)胞融合劑的聚乙二醇一般選用分子量為4 000者,常用濃度為50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3調(diào)整),分子量小的PEG,融合效應(yīng)差,又有毒性,分子量過大,則粘性太大,不易操作。50%濃度,pH偏堿時(shí)融合效應(yīng)最高。
也有采用30%~50%濃度的PEG加上10%二甲亞砜。
不同批號的PEG,即使分子量相同,但融合率卻有明顯差異,選用時(shí)必須注意。每批都必須進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗(yàn)后方可應(yīng)用。要買高純度的,一般選供氣相色譜用的PEG。