編者按:在防治傳染性非典型肺炎醫(yī)源性交叉感染措施中,醫(yī)學實驗室安全性管理及標本的采集、運送、檢測和處理的安全性是十分重要的環(huán)節(jié)。為此,中華醫(yī)學會檢驗醫(yī)學分會傳染性非典型肺炎實驗室診斷專題委員會邀請有關專家召開了研討會,并制定了《檢驗科SARS標本檢測安全管理指南(暫行)》暫行辦法,供實驗室檢驗技術人員在工作中參考。
傳染性非典型肺炎,世界衛(wèi)生組織(WHO)稱為“嚴重急性呼吸道綜合征”(SARS)。SARS是一種起病急、傳播快、病死率高、病因尚未完全確定的傳染病。根據(jù)SARS病原體的高傳染性和嚴重的致病性,應定義為危險組4病原體(高個體危險,高群體危險)。為科學有效地防護SARS院內交叉感染,規(guī)范有序地進行實驗室檢測工作,根據(jù)《傳染病防治法》、《醫(yī)學臨床實驗室—醫(yī)學實驗室的安全管理》( 國際標準草案ISO/DIS 15190-2001),結合我國實際情況,特制定本《指南》。 建議作為臨床實驗室在安全性管理及標本的采集、運送、檢測和處理中的參考。
一、安全教育與人員職責
1.科室主任:有責任對實驗室全體員工進行SARS相關知識培訓和安全教育,使全體員工充分認識SARS對人員安全的嚴重危害性和高度傳染性,具備自我防護意識和對SARS的預防、消毒、隔離的技術常識。為實驗室提供信息和后勤保障。指定一位副主任負責科室預防、消毒、隔離措施的實施和監(jiān)控,發(fā)現(xiàn)問題及時反饋,并提出改進措施。
2.安全員:在科主任的領導下,負責科室預防、消毒、隔離措施的指導、實施和監(jiān)控工作,發(fā)現(xiàn)問題及時反饋,并提出改進措施。
3.全體員工:在科主任的領導和安全員的具體指導下,做好個人防護,在工作中認真履行好對SARS的一切預防、消毒、隔離措施。
4.安全手冊:在實驗室每個工作站都要準備SARS專門的安全手冊。手冊應包括對SARS病原體相關的危險物處置,以及對工作區(qū)的通風、實驗室設備的消毒、清潔和滅活作出詳細說明。
5.健康管理:應在科室營造出團結、奮進、安定的氛圍,合理安排工作,充分保證每個員工良好的心態(tài),健康的身體。
二、實驗室安全要求
1.專用實驗室或SARS工作區(qū):建議有條件的醫(yī)院在發(fā)熱門診建立獨立的 SARS專用實驗室,指定專人檢測。并(或) 在檢驗科內建立獨立的SARS專用實驗室或SARS專用工作區(qū),指定專人檢測。專用實驗室或SARS專用工作區(qū)必須配有生物安全柜。
2.實驗室管理:保持工作室整潔,物品放置有序。做到空氣流通清新,定時清掃,并做到衛(wèi)生用具專室專用。進入專用實驗室工作人員在處理病原體前要經過專門培訓,開展工作時不許外人進入實驗室。
3.實驗室消毒:(1)空氣消毒:室內有人時,首選開窗通風;不能開窗時(如沙塵天氣)安裝大功率排風扇(盡量低位)強行通風,并保證空氣的單向流通;另外,可采用乳酸加熱熏蒸,每日2次。室內無人時可采用以下消毒方法:①低臭氧紫外線燈消毒:強度>70 UW/cm3 ,照射60 min,每天2~3次。應注意安裝適當?shù)姆雷o罩,避免醫(yī)務人員發(fā)生電光性眼炎和其他損傷。②化學消毒:含氯消毒劑:“健之素”1500 mg/L噴灑消毒,用量30 ml/m3,密閉30 min后通風,每天3次(早、中、晚)。過氧乙酸:0.5%~1%過氧乙酸氣溶膠噴霧,用量30 ml/m3,密閉30 min后通風,每天3次(早、中、晚)。過氧化氫:0.5%過氧化氫氣溶膠噴霧,用量30 ml/m3,密閉30 min后通風,每天3次(早、中、晚)。③有條件的實驗時可采用靜電吸附式空氣凈化器持續(xù)消毒,室內有無人時均適用。(2) 地 面、墻壁、門窗:①墻壁、門窗消毒:用0.5%~1%過氧乙酸或“健之素”1500 mg/L噴霧。泥土墻吸液量為150~300 ml/m2,石灰墻為50~100 ml/m2,木板墻為10~50 ml/m2。對各種墻壁噴灑的消毒劑溶液不宜超過其吸液量。②地面消毒:用0.5%~1%過氧乙酸或“健之素”1500 mg/L噴霧。先由外向內噴霧1次,用量為50~300 ml/m2,之后再由內向外重復噴霧一次。以上各種方式的消毒處理,作用時間不少30 min。 (3)檢驗臺、桌面、椅子及門把等物品:每日用0.2%~0.5%過氧乙酸或“健之素”1500 mg/L擦試1~2次。(4)檢測儀器:當檢測儀器完成檢測后,儀器表面及進樣口應用2000 mg/L健之素擦拭數(shù)遍.之后再用沖洗劑擦拭或沖洗數(shù)遍,等待下次檢測。(5)檢測樣本用具:檢測樣本過程中所用一次性耗品在檢測完成后,經10%漂白水浸泡消毒后放入廢物容器內,再經高壓消毒之后,作為廢品丟棄。操作完畢后,工作臺進行消毒,所有用過的器具用消毒水消毒,再用龍頭水沖洗晾干,放好待用。(6)檢驗報告單:檢驗報告單需經過消毒后方可發(fā)出,可用環(huán)氧乙烷氣體熏蒸,也可用微波爐消毒處理。具體方法是:先將被消毒的報告單用塑料袋密封,然后在塑料袋外用濕毛巾包裹,放入微波爐內,用低、中火檔照射5 min。如有條件,建議設立專門的清潔區(qū)打印報告單。(7)安全離開實驗室:離開實驗室時將手套,口罩等放置于有“生物廢品”標記的容器,經高壓消毒后丟棄,并將隔離衣物留在室內,放在污物袋中消毒。檢測樣品不能擅自帶離實驗室,如必須移出,應妥善覆蓋,以防在轉移過程中污染環(huán)境和他人。實驗室的物品固定使用,未經消毒或隔離包裝不得移出實驗室。所用物品需消毒后方可轉用。污染物品應裝在雙層加厚堅固污物袋,消毒后送出銷毀或洗消處理。工作人員在處理傳染性物品之后,離開實驗室前要洗手。(8)發(fā)生明顯或可能與傳染物接觸的濺溢及事故時,要立即向科主任報告,以作出相應的醫(yī)學評價,進行監(jiān)測和治療。(9) 在使用紫外線照射消毒和各種化學消毒劑消毒過程中,應特別注意防止消毒劑對實驗室人員和實驗室儀器、物品的損害。
三、人員防護
1.基本要求:建議臨床檢驗人員進入實驗室穿戴工作衣、鞋、帽、口罩、防護鏡及橡膠手套,著裝規(guī)范;檢驗工作后,以0.1%有效氯消毒液泡手1~2 min后用肥皂流動水洗手;離開實驗室時應脫去隔離衣、鞋、帽、口罩及手套。進入辦公室或學習室應脫去工作衣; 禁止將食物、飲料帶入實驗室。
2.為避免交叉污染,檢驗人員原則上不直接進入病區(qū)采集標本,如必須進入時,應穿隔離衣加一次性防護服、戴20層棉紗口罩、防護鏡。接觸污物時需戴雙層橡膠手套。有條件的實驗室建議檢測人員戴N95口罩。
3.接觸標本者應穿雙層隔離衣、戴12層以上棉紗口罩(最好N95口罩)、防護鏡。接觸污物時需戴雙層橡膠手套。
4.手與皮膚的消毒:可用0.2% 過氧乙酸溶液浸泡擦拭,也可用0.5%碘伏溶液(含有效碘5 000 mg/L)涂擦,作用1~3 min。當手被血液、體液污染或可能污染后,應立即消毒液浸泡后洗手。必要時用消毒液洗手。如果工作人員在操作過程中,意外被針刺、刀割或其他形式的割傷,以致傷口與病毒標本直接接觸,或者帶病毒樣本碰到皮膚部位,必須用消毒肥皂洗傷口,再用清水沖洗,隨即向有關負責人報告。若標本濺入或接觸到眼粘膜、口粘膜上,立即用滴眼液或漱口液清洗。
四、SARS 標本的采集、運輸、檢測、保存、處理
SARS臨床檢測標本包括:體液、血液、分泌物排泄物及組織。 病毒標本在標本中存活時間長于單獨存在時間,因此,一切取自SARS患者標本均應視為帶病毒強傳染性樣品,依據(jù)傳染病法處理。
1.標本的采集:詳細登記有關病例的姓名、性別、年齡等基本信息,發(fā)病日期、采樣日期等。(1) 尿液標本的采集:將2~5 ml 尿液裝入帶蓋收集容器內,蓋緊蓋子,加注特別標識(建議紅色SARS字樣),密封送檢。(2)分泌物的采集:體液標本極具傳染性,原則上盡量減少此類標本采集和檢測。① 咽拭子:用無菌濕棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,再將棉簽放入無菌試管中,加注特別標識,密封送檢。② 痰液:讓患者直接將痰液咳入無菌平皿中,加注特別標識,密封送檢。(3)糞便標本的采集:將10~50 cm3的糞便裝入糞便杯或尿液收集容器內,蓋緊蓋子,加注特別標識,密封送檢。(4) 血液標本的采集:建議血液標本一律使用負壓靜脈采血,不使用末梢血,以免在采集過程中造成更大范圍的污染。標本采集后加注特別標識,密封送檢。
2.標本的運輸:送檢的標本,要求密封包裝,放在專門為運輸用的容器內,加蓋,由專人運送。運送過程中嚴防遺撒。送入檢驗科,由專人簽收。
3.標本前處理:任何有可能產生細顆粒氣溶膠的操作步驟,標本處理原則上在有合格證的生物安全柜內進行,普通平流超凈臺不適于SARS 標本的處理。處理標本使用專用離心機,離心時應使用密閉的離心機轉頭或密閉樣品杯。理想情況下,應在生物安全柜內取出離心機轉頭或樣品杯。離心機使用完畢,立即用1 500 mg/L健之素進行表面消毒。
4.標本的檢測:實驗室工作人員做好個人防護措施。標本盡量集中專用區(qū)域內由專人進行檢測,以便于標本、儀器、環(huán)境集中消毒和處理。盡量避免標本分散到多個實驗室。
(1)下列操作必須在生物安全3級(BSL3)或以上級實驗室中進行:用細胞培養(yǎng)的方法分離病毒;收集或濃縮病毒或其培養(yǎng)產物;用活病毒或病毒的全基因接種動物;咽拭子樣品的診斷檢測。
(2)下列操作必須在生物安全2級(BSL2)或以上級實驗室或全排式生物安全柜中進行:含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測;溶解、固定或用其他方法處理滅活的病毒和(或)無傳染性的的病毒基因片斷;常規(guī)的細菌和毒素檢查;可能產生氣溶膠的樣品處理;臨床樣品的包裝、分裝;離心管和離心機轉頭的封閉和開啟。
5.檢驗結果報告:以實現(xiàn)計算及網(wǎng)絡化的醫(yī)院建議采用網(wǎng)絡信息報告,由接收單位打出報告單,盡量不從有SARS 標本污染的實驗時發(fā)出報告單。如確需由實驗室發(fā)報告單,必須確保報告單消毒完全后再發(fā)放。
6.標本檢測后處理:(1) 檢測后標本(痰、咽拭子、糞便、尿液、血)以及檢測過程中所使用過的污染廢棄物(試管、痰盒、尿杯等)一律集中放入帶蓋專用污物桶內,用2 000 mg/L健之素或0.5%過氧乙酸消毒劑覆蓋或混勻,作用10 min以上,然后高壓30 min,取出后,直接焚燒。每4 h消毒處理1次。(2) 廢液:所有廢液(包括儀器檢測后廢液)都用2 500 mg/L健之素浸泡1 h以上,高壓,再送到醫(yī)院污水站合理消毒處理。注意保證污水氯余量大于6.5 mg/L.
7.標本的保存:分析前標本根據(jù)實驗需要合理保存。分析后已發(fā)出報告的標本原則上不保存;如有特殊需要保存的標本,應保存在加鎖的專用冰箱,專人管理并作特殊紀錄。杜絕將SARS 標本放入普通冰箱內,以免造成其他物品的污染。
注:參與本《指南》制定的專家有(按單位筆劃排序):上海復旦大學附屬中山醫(yī)院 潘伯申教授,衛(wèi)生部中日友好醫(yī)院 張遠春 主任、于雪瑩博士,北京大學人民醫(yī)院張正教授,北京地壇醫(yī)院 趙輝、肖元樸教授,北京佑安醫(yī)院 閔福援教授,北京軍區(qū)總院 王北寧主任,江蘇省人民醫(yī)院 童明慶主任,解放軍總醫(yī)院 叢玉隆、秦小玲教授,解放軍第三0二醫(yī)院 毛遠麗教授。