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      熒光免疫技術

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-28

      原理

      應用熒光素標記的抗體或抗原進行免疫沉淀反應,然后置于熒光顯微鏡下觀察。此法有利于微量可溶性抗原的檢查和鑒定。


      材料與試劑配制

      1.熒光素標記抗體(或抗原)

      2.待測可溶性抗原(或抗體)

      3.醋酸纖維膜(10cm×2.5cm)

      4.0.05Mol/L pH8.2巴比妥緩沖液

      5.洗滌液 pH10.0的巴比妥緩沖液。

      6.液體石蠟


      操作方法

      1.取5μl待測抗原進行膜電泳(見醋酸纖維膜電泳一節(jié))電壓6V/cm~10V/cm,電流0.4mA/cm,電泳2h。

      2.取下膜放入濕盒內(nèi),沿抗體槽的位置放一條含標記抗體濾紙條(約10μl),在室溫中孵育過夜。

      3.去掉抗體紙條,將膜浸在洗滌液中1h。

      4.流水中沖洗10min,置室溫干燥。

      5.干后浸入液體石蠟中使其透明10min。

      6.用熒光顯微鏡觀察熒光弧。

       

       

       
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