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      反向間接乳膠凝集反應(yīng)

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

      原理

      同炭凝,只是載體換為聚苯乙烯乳膠,它是一種由0.6μm~0.7μm的顆粒所組成的膠體溶液,具有良好的吸附蛋白質(zhì)的性能。

      間接乳膠凝集目前已用于鼠疫菌、沙門氏菌、流感桿菌、腦膜炎雙球菌、葡萄球菌腸毒素等的診斷。


      材料與試劑

      1.聚苯乙烯乳膠

      2.免疫血清

      3.正常血清

      4.標(biāo)準(zhǔn)抗原

      5.待檢抗原

      6.0.02Mol/L pH8.2硼酸緩沖液

      硼砂 6.67g

      硼酸 8.04g

      H2O 加至 1 000ml

      7.生理鹽水


      操作方法

      1.乳膠液制備 取聚苯乙烯乳膠0.10ml,加滅菌蒸餾水0.40ml,再加pH8.2硼酸緩沖液2ml,混合后即為25倍稀釋的乳膠液。

      2.乳膠致敏 在上述乳膠液中滴加稀釋的免疫血清0.20ml~0.70ml,邊加邊搖,當(dāng)出現(xiàn)肉眼可見的顆粒后,仍繼續(xù)加血清,直至顆粒消失,成為均勻的乳膠懸液為止。鏡下檢查應(yīng)無自凝。使用時,應(yīng)與一定稀釋度的相應(yīng)抗原出現(xiàn)陽性反應(yīng),與生理鹽水出現(xiàn)陰性反應(yīng)為合格。加防腐劑后,于冰箱內(nèi)保存。注意防止冰凍。

      同時以正常血清代替免疫血清進行乳膠致敏,以作對照。

      3.取潔凈玻板一塊,用玻璃鉛筆劃成小格,滴加待檢樣品0.10ml,再滴加高免血清致敏乳膠0.01ml,以牙簽或火柴桿混勻,在3min內(nèi)判定結(jié)果。


      結(jié)果判定

      “++++”:全部乳膠凝集,成絮狀團塊,液體清亮。

      “+++” : 大部分乳膠凝集成較小的顆粒,液體清亮。

      “++” : 半量乳膠凝集成細(xì)小顆粒,液體混濁。

      “+” : 較少量的乳膠凝集成可見的細(xì)顆粒,液體混濁。

      “-” : 全部乳膠仍為均勻液體,無顆粒。

      以“++”作為該反應(yīng)滴度的終點。

       

       

       

       
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