1 抽取腹水
選擇接種后7－10d健康較好的動物，頸椎脫臼，固定于蠟板上，腹部皮膚消毒后，剪開并剝?nèi)ジ共科つw，用空針穿過腹部肌肉，抽吸腹水，放入無菌容器內(nèi)，置冰塊保存。若用幾只動物供瘤時，應(yīng)將腹水混合。另取小量腹水，置于加有肝素的干試管內(nèi)，作為觀察細胞形態(tài)及細胞計數(shù)用。將空針中剩余的腹水，滴一滴于載玻片上，推片，瑞氏染色，鏡下進行細胞分類計數(shù)，其中瘤細胞數(shù)應(yīng)≥95%。
抽出之腹水應(yīng)為乳白色之濃稠液體，若為黃色或有大量紅細胞數(shù)應(yīng)棄去。
2 細胞計數(shù)
取置于肝素管內(nèi)的細胞。用生理鹽水稀釋10倍及100倍；取稀釋液0.9mL，加臺盼藍(0.2%臺盼藍生理鹽水液)0.1mL，混勻。用白細胞計數(shù)法計瘤細胞總數(shù)。同時計算受感染的死細胞數(shù)。因瘤細胞死后，細胞膜的通透性改變，細胞可被臺盼藍染成藍色。
3 接種
腹水用無菌含葡萄糖的平衡鹽水(如Hanks氏液、Gey氏液、洛氏液、Earle氏液等)稀釋至適當?shù)臐舛龋鞲骨蛔⑸�，每鼠注�?.1－0.2mL。整個操作應(yīng)在60min內(nèi)完成。
一般在試驗結(jié)束后次日稱體重，逐日記錄。對照組動物通常在2－3周內(nèi)全部死光，個別存活時間太長者需剔除，但各組亦應(yīng)相應(yīng)地剔除一只。如試驗期間對照組動物于7d內(nèi)死亡≥20%，表示試驗失敗。如對照組內(nèi)20%動物存活4周以上，實驗亦應(yīng)作廢，受試物組觀察時間一般為60d(生存超過此時限者，仍按60d計算)。分別記錄對照組和受試物組的平均生存時間�！ �
白血病株的接種腹水型白血病如L1210及P388的接種同腹水型腫瘤接種法。L615小白鼠白血病的接種則按下述方法進行。取L615白血病小白鼠(約接種后第6d)，頸椎脫臼，在無菌條件下，剪取脾臟一小塊(約米粒大小)，放置玻璃組織勻漿器內(nèi)，加少量無菌生理鹽水，制成細胞懸液，并稀釋至8－9mL，取一定量加0.2%臺盼藍緩沖液，計每毫升懸液的活細胞數(shù)(臺盼藍終濃度為0.02%)。根據(jù)活細胞數(shù)值適當稀釋懸液將細胞數(shù)調(diào)整至4×107/mL，接種于小鼠皮下，每鼠接種細胞懸液0.1－0.2mL。